刘少军
- 作品数：23 被引量：55H指数：5
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- X射线诱导人脑胶质瘤细胞系放射抗拒的比较蛋白质组学研究
- 目的:放射治疗是目前恶性胶质瘤综合治疗的最重要手段之一。胶质瘤的放射敏感性差异很大,因此放疗对一部分脑胶质瘤患者效果不佳。本研究旨在分析不同放射敏感性的胶质瘤细胞的蛋白质组表达差异,并最终达到预测胶质瘤放射治疗反应的目的...
- 胡震刘少军刘炜王丽娜梁景耀肖健勇夏云飞陈忠平
- 关键词：胶质瘤放射抗拒
- 文献传递
- 乙腈预处理血清寻找肝细胞癌发病相关的蛋白质被引量：1
- 2010年
- 【目的】应用乙腈(ACN)预处理血清的方法,对肝细胞癌(HCC)患者的血清进行蛋白质组分析,寻找与HCC发病相关的蛋白质。【方法】收集原发性HCC患者和健康人的血清各12例,首先使用乙腈预处理,然后去除白蛋白和免疫球蛋白等高丰度蛋白质,再进行双向电泳(2-DE)分析,筛选HCC与健康对照血清中有显著性差异的蛋白质斑点,并进行MALDI-TOF/TOF质谱鉴定。【结果】血清经0%、20%和30%浓度的乙腈预处理后,进行2-DE分析发现蛋白质斑点的检出数量分别为532±96、623±102和674±123;对预处理后HCC患者和正常人的血清进行差异分析,发现甲状腺素(Tetraiodo-L-Thyronine)和Proapolipoprotein的表达上调,而维生素D结合蛋白(Vitamin D-binding Protein)和铁传递蛋白(Transferrin)的表达下调。【结论】对血清样本的蛋白质组分析,应用乙腈预处理会增加与白蛋白非特异性结合的蛋白质的检出;HCC患者血清中甲状腺素等4个蛋白的表达异常与HCC相关。
- 张剑文刘炜傅斌生胡坤华刘少军李华张琪黎明涛陈规划
- 关键词：蛋白质组学肝细胞癌血清
- LOX-1过表达诱发H9C2心肌细胞肥大
- 2014年
- 目的:构建携带过表达大鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)基因的慢病毒载体,研究LOX-1与心肌细胞肥大的关系。方法:构建大鼠LOX-1基因pHIV-LOX-1过表达质粒,与包装质粒psPAX2、pMD2G共转染293T细胞,检测其侵染效率。包装慢病毒并侵染H9C2心肌细胞,72 h后观察其侵染效率。qPCR法检测细胞LOX-1表达。检测过表达LOX-1后心肌细胞面积及其蛋白含量变化。结果:成功构建过表达LOX-1 H9C2心肌细胞。过表达LOX-1组(Lv.LOX-1+)心肌细胞面积(16691.890±1022.368μm2)较对照组(Lv.NC)(3459.865±343.175μm2)显著增加(P<0.001)。Lv.LOX-1+组心肌细胞蛋白含量(132.457±8.188 pg/cell)较Lv.NC组(45.095±1.655 pg/cell)显著增加(P<0.001)。结论:LOX-1过表达能诱导H9C2心肌细胞肥大。
- 刘彬张竞之刘少军邱怀娜郭景新刘慰华
- 关键词：凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1心肌细胞肥大慢病毒载体
- 饥饿诱导人胚肾细胞自噬模型的构建被引量：2
- 2015年
- 目的探讨饥饿诱导的人胚肾细胞(HEK293)自噬模型的构建。方法采用Earle's平衡盐溶液(EBSS)分别处理HEK293细胞0、1、2、4、8 h,显微镜下观察细胞形态变化,蛋白免疫印迹法检测自噬微管相关蛋白轻链(LC)3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62的表达;双荧光mRFP-e GFP-LC3(ptf LC3)质粒转染HEK293细胞24 h后,荧光显微镜观察EBSS饥饿条件下细胞内红色和绿色LC3荧光亮点的变化。结果饥饿处理后,HEK293细胞皱缩、变小变圆,蛋白免疫印迹法可检测到LC3的蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加;荧光显微镜可观察到细胞内红色和绿色LC3荧光亮点均增加。结论饥饿可成功诱导HEK293细胞自噬,表现为LC3蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的增加,以及荧光显微镜下细胞内红色和绿色LC3荧光亮点的增加。
- 黄桢钧刘慰华钟赟刘少军
- 关键词：自噬P62
- Cofilin-1 siRNA的设计及其对细胞自噬的影响
- 2017年
- 目的设计Cofilin-1的小分子干扰RNA(siRNA),并利用该方法初步探索干扰Cofilin-1对细胞自噬的影响。方法利用在线软件及根据文献报道设计出3对靶向人Cofilin-1的siRNA,转染人胚肾细胞HEK293,蛋白免疫印迹法检测细胞Cofilin-1、p62、LC3Ⅰ及LC3Ⅱ蛋白的表达变化。mRFP-GFP-LC3双荧光观察细胞自噬流(自噬体及自噬溶酶体的变化)。结果蛋白免疫印迹法证实siRNA-a及siRNA-b有较好的干扰效果。成功干扰Cofilin-1后,HEK293细胞的p62表达下调、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增大、自噬体和自噬溶酶体增多。结论 siRNA能有效干扰Cofilin-1的表达,Cofilin-1参与细胞自噬过程。
- 李爱群黄桢钧刘少军
- 关键词：小分子干扰RNA细胞自噬
- 颅内动脉瘤患者血清蛋白组变化的研究被引量：6
- 2006年
- 【目的】寻找颅内动脉瘤患者血清中表达差异的蛋白。【方法】采集12例血清蛋白样本(颅内动脉瘤患者4例、脑挫裂伤患者4例及正常成人本4例)用不同的CyDye染料交叉标记后依次进行双向胶内差异凝胶电泳(2-DDIGE)、图像分析及基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。【结果】发现胶号为1119的蛋白质点,在颅内动脉瘤患者血清中比正常成人组表达升高1.82倍(P<0.05),而在脑挫裂伤患者血清中与正常成人的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。该蛋白点经质谱鉴定为结合珠蛋白。【结论】结合珠蛋白在颅内动脉瘤患者血清中表达升高,可能参与了颅内动脉瘤的形成及扩张。
- 朱永华刘炜石忠松刘少军李明昌黎明涛潘伟生黄正松
- 关键词：血清蛋白颅内动脉瘤结合珠蛋白
- C-反应蛋白损伤内皮细胞的蛋白质组学研究被引量：1
- 2017年
- 目的:从蛋白质组学的角度探讨C-反应蛋白(CRP)损伤内皮细胞(EC)的作用机制。方法:采用培养的人冠状动脉内皮细胞HCAEC第4代用于实验,25μg/mL CRP刺激HCAEC 24 h,2D DIGE结合MALDI-ToF-ToF质谱鉴定进行蛋白质组学分析研究。结果:发现差异表达蛋白斑点11个,鉴定出其中4个,包括Heat shock cognate 71 kDa protein、Elongation factor 1-beta和Proteasome activator complex subunit 1等。结论:通过蛋白质组学研究,筛选了CRP损伤EC的差异表达蛋白,为深入理解EC损伤的分子机制提供有益的线索。
- 刘少军胡坤华刘慰华
- 关键词：C-反应蛋白内皮细胞蛋白质组学研究动脉粥样硬化
- 小檗碱对高糖诱导心肌成纤维细胞增殖、胶原合成及Akt激活的影响被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨小檗碱对高糖诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及Akt激活影响。方法：分离新生乳鼠心肌成纤维细胞,MTT法检测不同浓度小檗碱（10~40μM）对高糖（25 mM）诱导心肌成纤维细胞增殖的影响。采用qPCR法检测大鼠心肌成纤维细胞纤连蛋白（FN）的表达。采用Western blot法检测大鼠心肌成纤维细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、Akt的表达。结果：25 mM高糖刺激48 h后心肌成纤维细胞的细胞增殖显著增加,FN、PCNA、p-Akt表达升高,小檗碱以剂量依赖性方式抑制高糖诱导上述指标的改变。结论：小檗碱可以通过抑制高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,其机制可能与抑制Akt有关。
- 刘彬刘慰华张竞之刘少军李爱群刘世明
- 关键词：小檗碱心肌成纤维细胞高糖AKT
- 黄芪含药血清对NK细胞活性及KLRK1表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨黄芪含药血清对自然杀伤(NK)细胞活性及杀伤细胞凝集素样受体K1(KLRK1)表达的影响。方法:SD大鼠灌胃不同剂量的黄芪水煎剂制备黄芪含药血清。NK92MI细胞与不同剂量黄芪含药血清及对照血清孵育12 h后,采用乳酸脱氢酶释放测定法检测NK细胞对靶细胞YAC-1的杀伤活性,采用qPCR和western blot检测KLRK1 mRNA和蛋白表达。结果:不同浓度黄芪含药血清刺激12 h后NK细胞杀伤活性明显增强,KLRK1表达显著升高。结论:黄芪含药血清能活化NK细胞,其机制可能与其激活KLRK1有关。
- 刘慰华张竞之刘少军邱怀娜郭景新刘彬
- 关键词：NK细胞
- 从NK细胞促心梗后血管新生探讨中医“气能行血”的内在机理被引量：2
- 2015年
- 心梗后心室重构是介于心梗及心衰之间重要的病理过程,防治心梗后心室重构对于延缓心梗后心衰的发生具有重要意义。益气活血法从内经"气能行血"理论立法处方,在治疗心梗后心室重构中取得良好的效果。然而"气能行血"的内在机制至今尚不明确,影响了益气活血法在临床的应用。从益气活血法、益气药以及NK细胞促进心肌血管新生防治心梗后心室重构多个角度论述,探讨基于NK细胞促血管新生出发研究益气药促心梗后血管新生机制以及"气能行血"的机理的可行性。
- 刘彬刘慰华张竞之刘少军李爱群刘世明
- 关键词：益气活血NK细胞血管新生心室重构
