刘志安
- 作品数:5 被引量:20H指数:3
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金南京市医学科技发展项目浙江省中医药科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 分类检测非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞的临床价值被引量:13
- 2016年
- 目的:探讨利用上皮细胞黏附分子( EpCAM)分类检测非小细胞肺癌( NSCLC)患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的临床意义。方法收集47例NSCLC患者的外周血样品各7.5 ml,其中3例患者在每一治疗周期结束时采集外周血样品用于动态监测CTCs。以阴性?磁性法分离和富集CTCs,经EpCAM和CK 7/8免疫荧光染色后,流式细胞仪鉴定CTCs并计数。结果47例患者的血液样品中,表达EpCAM的CTCs检出率为48.9%(23/47),其中Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期患者的检出率分别为64.3%(9/14)、40.0%(4/10)和43.5%(10/23)。不表达EpCAM的CTCs检出率为87.2%(41/47),其中Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期患者的检出率分别为78.6%(11/14)、90.0%(9/10)和91.3%(21/23)。两类CTCs的总检出率差异有统计学意义(P<0.001),其中Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ期患者的两类CTCs的检出率差异均无统计学意义(均P>0.05),而Ⅳ期患者的两类CTCs检出率差异有统计学意义(P=0.001)。各分期患者外周血中,不表达 EpCAM 的 CTCs 数量均明显高于表达 EpCAM 的 CTCs 数量(均 P<0.05)。Ⅳ期患者中,不表达EpCAM的CTCs>90%患者的比例明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P=0.030),不表达EpCAM的CTCs在50%~90%患者的比例明显低于Ⅰ~Ⅱ期患者(P=0.001)。不表达EpCAM的CTCs>50%时,患者的治疗普遍无效( P=0.033)。结论 EpCAM 分类检测 CTCs,有助于评估NSCLC患者的远处转移和治疗疗效。
- 尹寒露阴建陈立文李宁刘志安胡志斌沈洪兵
- 关键词:循环肿瘤细胞上皮细胞黏附分子
- Ca~(2+)/CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ介导GluR6丝氨酸磷酸化及其对GluR6受体功能的调控
- 背景:研究表明,KA受体亚单位GluR6丝氨酸磷酸化在脑缺血再灌注诱导的神经细胞损伤和死亡的调控中发挥重要作用,但是对于GluR6丝氨酸磷酸化调节的具体机制却知之甚少。目前,对于CaMKⅡ(Ca2+/CaM依赖的蛋白激酶...
- 刘志安
- 关键词:GLUR6PSD-95神经保护作用
- 文献传递
- 一种高纯度循环肿瘤细胞的富集方法及试剂盒
- 本发明属于生物技术工程及肿瘤医学领域,公开了一种高纯度循环肿瘤细胞的富集方法及试剂盒。该方法采用2次磁分离技术,一次对白细胞进行CD45抗原磁性标记与磁场去除,一次对白细胞进行CD53抗原磁性标记与磁场去除,该方法可获得...
- 沈洪兵刘志安胡志斌尹寒露阴建
- 文献传递
- 循环肿瘤细胞的磁分离法建立及在肺癌EGFR-TKI治疗中的应用被引量:4
- 2015年
- 目的探索磁分离循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)联合竞争性等位基因特异性Taq ManPCR(Cast PCR)检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的可行性。方法收集12例晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血液样本各7.5 m L,两步法磁分离CTCs,免疫荧光染色检测上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和细胞角蛋白(Cytokeratin)后,流式细胞术检测CTCs数量及纯度;Cast PCR检测CTCs及循环DNA中EGFR基因del EGFR19、T790M和L858R突变;用EGFR基因突变检测试剂盒(ADx-ARMS法)检测癌组织的上述位点突变。结果高表达与不表达Ep CAM的CTCs分别在6例和12例NSCLC患者中被检测出;del EGFR19、T790M和L858R突变例数分别在2例、8例和5例NSCLC患者的CTCs中被检测出,其总检出率为83.3%(10/12);2例患者的循环DNA中检出L858R突变;ADx-ARMS法检测12例NSCLC患者癌组织中上述3种突变分别是2例、5例和3例,总检出率为75.0%(9/12)。CTCs与癌组织的突变具有一致性(Kappa=0.75,P=0.007),循环DNA与癌组织的突变一致性无统计意义(Kappa=0.06,P=0.546)。结论磁分离CTCs联合Cast PCR能有效检测EGFR基因突变,值得在NSCLC患者的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗中推广应用。
- 阴建尹寒露王毅陈文萍陈立文刘志安胡志斌沈洪兵
- 关键词:循环肿瘤细胞磁分离表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂
- 非小细胞肺癌胸水原代肿瘤细胞系建立及其药敏试验的临床应用价值被引量:3
- 2019年
- 目的通过非小细胞肺癌(NSCLC)患者恶性胸腔积液肿瘤细胞的体外原代培养,检测其对常规化疗药物的敏感性,为临床筛选个体化治疗方案提供参考。方法收集20例经病理组织学确诊为NSCLC患者的恶性胸腔积液,通过密度梯度离心法分选后体外短暂培养以去除非肿瘤细胞成分,建立原代细胞系;使用MTT法检测肺癌常规化疗药物作用于肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50),与理论计算获得的血药浓度值(IC50 m)进行比较获得IC50绝对预测值(R),并将其与患者的临床实际疗效进行比对分析。结果 20例恶性胸腔积液样本经预处理及培养4代后均能获得在体外稳定传代的原代肿瘤细胞系,巴氏染色证实其具有癌细胞特征,且显微镜下观察癌细胞纯度近乎100%。MTT法检测结果显示,使用R值时,能将超出测试浓度上限的无效IC50值进一步纳入疗效评估的有效范围;与其中具有完整化疗史的6例患者的实际疗效比对结果显示,当用R值在0.5~2.0和大于2.0分别预测实际疗效为疾病稳定和疾病进展时,其疗效预测的总体一致性为77%(10/13)。结论癌性胸水原代肿瘤细胞培养及其药敏检测在预测NSCLC患者的实际化疗疗效中具有参考价值。
- 胡嘉华王海涛刘志安赵建华
- 关键词:恶性胸腔积液原代肿瘤细胞MTT法化疗药物敏感性