王珏
- 作品数:16 被引量:32H指数:4
- 供职机构:昆明医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金云南省卫生科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 猪骨髓间充质干细胞抑制脂多糖诱导炎症反应改善猪胰岛细胞功能损伤被引量:1
- 2021年
- 背景:猪胰岛移植是治疗糖尿病的常用手段,但炎症反应和氧化应激会导致猪胰岛移植的远期效果欠佳。猪骨髓间充质干细胞已被证实与胰岛联合移植可改善移植物的功能。但关于猪骨髓间充质干细胞通过调节胰岛细胞中miR-299-5p的表达来调控胰岛β细胞功能和存活率还尚未被报道。目的:探讨猪骨髓间充质干细胞通过miR-299-5p/SIAH1分子轴调控JNK/C-Jun信号通路对猪胰岛细胞功能损伤的影响。方法:用脂多糖诱导猪胰岛细胞功能损伤,然后与骨髓间充质干细胞共培养24 h,采用ELISA检测猪胰岛细胞中白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、活性氧、超氧化物歧化酶及胰岛素水平,Hoechst 33258染色观察猪胰岛细胞凋亡情况,Annexin V-FITC/PI检测猪胰岛细胞凋亡率,Western blot检测SIAH1和JNK/C-Jun信号通路相关蛋白表达;qPCR检测猪胰岛细胞中与胰岛细胞功能损伤有关的miRNAs表达;双荧光素酶报告基因验证miR-299-5p和SIAH1的靶向关系。结果与结论:①猪骨髓间充质干细胞抑制脂多糖引起的白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、活性氧上调和促凋亡作用,同时也抑制脂多糖引起的超氧化物歧化酶、胰岛素分泌量下调作用;②猪骨髓间充质干细胞显著上调miR-299-5p表达,miR-299-5p可通过靶向下调SIAH1表达抑制JNK/C-Jun信号通路激活;③结果表明,猪骨髓间充质干细胞通过调控miR-299-5p/SIAH1分子轴抑制JNK/C-Jun信号通路激活,抑制脂多糖诱导的炎症反应、氧化应激和猪胰岛细胞凋亡,并促进胰岛素分泌,从而改善猪胰岛细胞功能。
- 袁宝红赵维山王若天管傲然王珏李汝红
- 关键词:干细胞骨髓间充质干细胞胰岛细胞脂多糖
- HOTAIR过表达慢病毒载体的构建及稳定细胞株的建立被引量:3
- 2021年
- 目的构建稳定过表达HOTAIR的人滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系,并验证HOTAIR的表达。方法利用PCR技术扩增HOTAIR基因全长序列,并将其克隆入LV5载体中,构建LV5-HOTAIR载体,重组质粒经双酶切鉴定及测序验证成功后,转染人胚肾细胞293T,包装过表达病毒颗粒,制备并浓缩慢病毒颗粒。将构建好的过表达HOTAIR慢病毒载体感染HTR-8/SVneo细胞,采用嘌呤霉素筛选出HOTAIR稳定表达的细胞系,荧光显微镜观察绿色荧光表达;qRT-PCR验证HOTAIR表达。结果重组质粒酶切得到的条带与预期相符,过表达HOTAIR慢病毒载体中序列与目标序列一致。荧光显微镜下过表达HOTAIR组细胞有绿色荧光表达;qRT-PCR结果表明过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR表达是Control组的206.3倍(P<0.05),是NC组的232.8倍(P<0.05)。结论成功建立稳定过表达HOTAIR的HTR-8/SVneo细胞,且过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR mRNA表达水平明显升高。
- 李晓娟王珏王珏何建萍钱源
- 关键词:慢病毒载体子痫前期
- 维生素D通过下调miR-21的表达促进人胎盘滋养细胞的迁移和侵袭被引量:7
- 2019年
- 目的探讨维生素D对microRNA-21表达的调控作用以及对人胎盘滋养细胞迁移、侵袭能力的影响。方法不同剂量维生素D刺激HTR-8/SVneo细胞24、48、72 h后,RT-qPCR检测microRNA-21表达情况;将miR-21 mimic、miR-21 mimic-nc、miR-21 inhibitor和miR-21 inhibitor-nc分别转染至HTR-8/SVneo细胞,或将miR-21 mimic、miR-21 inhibitor联合维生素D共同刺激细胞,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,western blot检测E-cadherin、Fibronectin、MMP9的蛋白表达水平。结果维生素D刺激HTR-8/SVneo细胞后抑制了micoRNA-21的表达,且抑制作用呈浓度-时间依赖性增强。单独转染miR-21 mimic抑制HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭能力,E-cadherin表达水平增加,Fibronectin、MMP9表达水平降低;联合维生素D共同刺激细胞则可以减弱该作用。单独转染miR-21 inhibitor促进了HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭能力,E-cadherin表达水平降低,Fibronectin、MMP9表达水平增加;联合维生素D共同作用与单细胞独转染miR-21 inhibitor相比,细胞迁移、侵袭能力以及蛋白水平无明显改变。结论维生素D可能通过下调microRNA-21的表达来影响子痫前期发生发展。
- 周芝熠李晓娟蒋国庆王珏钱源
- 关键词:维生素DMIR-21迁移
- 孕晚期产妇血清sHLA-g与子痫前期的Meta分析
- 2020年
- 目的:系统评价孕晚期产妇血清sHLG-g水平与子痫前期发病的相关性。方法:利用计算机检索the Cochrane library、EMBASE、Medline、PubMed、万方、中国知网、中国生物医学文献数据库等数据库,收集2019年8月,以前发表的关于sHLA-g表达与子痫相关性的中英文文献。按纳入与排除标准筛选文献、评价文献质量、提取数据。采用Review Manager 5.3软件对纳入的文献进行Meta分析。结果:最终纳入7篇文献共514例患者(病例组244例,对照组270例)。子痫前期孕妇血清中sHLA-g的表达水平较正常孕妇出现明显下降,差异有统计学意义(MD=-21.14,95%CL[-25.24~17.30])。采用相同的检测试剂的研究共3篇,病例组90例,对照组117例,研究结果间无统计学异质性(χ2=0.10,P>0.05,I 2=0%),病例组血清sHLA-g水平低于对照组,差异有统计学意义(MD=-27.94,95%CL[-35.48~20.40]);采用其它检测试剂的研究共4篇,病例组154例,对照组153例,研究结果间存在统计学异质性(χ2=23.50,P<0.0001,I 2=87%),病例组血清sHLA-g水平低于对照组,差异有统计学意义(MD=-19.47,95%CL[-23.63~15.32])。结论:子痫前期孕妇血清中sHLA-g的表达水平较正常孕妇有明显下降,sHLA-g对于监测子痫前期的发生是一个潜在的生物标志物。
- 王珏李晓娟李晓娟
- 关键词:SHLA-G子痫前期META分析
- 1例成人先天性肛门闭锁伴直肠阴道瘘患者肠造口手术的术前、术中护理
- 2018年
- 先天性肛门闭锁是一种较为常见的先天性肛门直肠畸形疾病,是消化道畸形中最常见的一种,发生率可达1/1500-1/5000。先天性肛门闭锁在文献中报道多为男婴,男女比例约为3∶1,多伴有直肠阴道瘘或直肠尿道瘘,最初症状主要便秘,后期大便可从阴道或舟状窝出来。大多数患儿会在婴幼儿时期或学龄前完成肛门再造手术,成人肛门闭锁较为少见。
- 欧密江帆罗群王华孙锋溥玉秀王珏杨明莹
- 关键词:先天性肛门闭锁直肠阴道瘘肠造口护理
- 重度子痫前期胎盘microRNA谱差异表达研究被引量:4
- 2019年
- 目的筛选云南地区重度子痫前期孕妇与正常孕妇胎盘组织中microRNA差异表达,探究microRNA与重度子痫前期发病机制的关系。方法通过对3例重度子痫前期患者和3例正常孕妇胎盘组织抽提Total RNA样品检测,Small RNA Sample Pre Kit文库构建,上机行HiSeq测序,获得microRNA的表达数据。对差异表达的microRNA进行差异分析、靶基因预测、靶基因注释等生物信息学分析。结果通过对实验组与对照组microRNA表达谱的对比,筛选出了41个差异表达的microRNA,其中22个表达上调,19个表达下调。对候选靶基因KEGG富集最显著的20条分析结果显示:候选靶基因功能富集通路与Rap1信号通路、雌激素信号通路、焦点黏着、FcγR介导的吞噬作用、调节干细胞多能性的信号通路、钙信号通路、炎症介质调节的TRP通道、Ras信号通路、TGF-β信号通路的炎症介质调节等相关。结论重度子痫前期与正常产妇胎盘组织存在差异表达的microRNA,可能与重度子痫前期的发病机制相关,胎盘组织中差异表达的microRNA为探寻新的重度子痫前期诊断标记物及潜在治疗靶点提供依据。
- 李晓娟周芝熠王珏钱源
- 关键词:重度子痫前期MICRORNAS生物标记物
- 染色体荧光原位杂交技术与核型分析技术在产前诊断中的对比研究
- 目的探讨与羊水细胞染色体核型分析相比,荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在产前诊断中的应用价值。方法对2015年1月至2018年3月昆明医科大学第一附属医院...
- 王珏钱源段勇
- 文献传递
- ALKBH5通过抑制上皮-间质转化降低人滋养细胞的迁移和侵袭能力被引量:2
- 2020年
- 目的探讨去甲基酶ALKBH5对滋养细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭功能及对上皮-间质转化(EMT)过程的影响。方法将ALKBH5高表达、抑制及其阴性对照NC质粒转染人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Westen boltting(WB)实验检测各组细胞中ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白的表达水平。并通过Transwell实验检测转染后滋养细胞迁移、侵袭功能变化,同时通过WB实验检测各组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关蛋白:Vimentin、Fibronectin、E-cadherin、N-cadherin、MMP9及MMP2的表达水平。结果ALKBH5组与未转染组(Control)和无意义序列组(NC)相比,ALKBH5 mRNA及蛋白高表达效果显著(P<0.05);shALKBH5组与未转染组(Control)和无意义序列组(NC)相比,ALKBH5 mRNA及蛋白抑制效果显著(P<0.05)。ALKBH5高表达后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能降低(P<0.05),EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达上调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。ALKBH5表达抑制后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能增强(P<0.05),EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达下调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALKBH5通过抑制EMT过程降低滋养细胞迁移、侵袭能力,从而参与子痫前期的发病机制。
- 何建萍李晓娟吕梦欣王珏王珏罗胜军钱源
- 关键词:子痫前期上皮-间质转化细胞迁移细胞侵袭
- 血管内皮多糖包被与围术期液体管理研究进展被引量:6
- 2018年
- 近年来,随着研究的不断深入及临床监测技术的改进,围术期液体治疗管理逐步实现精准化、个体化,对患者良好的转归产生了极大的推动作用。其中多糖包被参与构成血管内皮屏障、机械传导、调节微循环和血液黏度等[1],它的发现为液体管理提供了新的思路。数十年来人们在液体管理中一直遵循传统的Starling理论,认为血管内与组织间隙的静水差和胶体渗透压差决定着液体的扩容效果,多糖包被模型的提出使得人们对血管屏障产生了新的认识,并对传统的Starling理论进行了修正[2]。本文就多糖包被模型和围术期液体管理的相关研究进展作一综述。
- 王珏王全刘曼
- 关键词:液体管理血管内皮围术期包被多糖血液黏度
- 重度子痫前期胎盘中microRNA的表达谱变化
- 钱源祁文瑾王珏肖雪杨建林杨继青郭知张兰马润玫