米薇
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 应用氨基酸稳定同位素标记-质谱技术构建肺癌细胞14—3—3sigma相互作用的分子网络被引量:2
- 2013年
- 目的筛选14—3—3sigma在非小细胞肺癌细胞中的功能相关蛋白,构建相互作用的分子网络。方法构建稳定过表达14—3—3sigma蛋白的非小细胞肺癌细胞株(PG细胞,大细胞肺癌),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法检测PG细胞的生长速度。利用稳定同位素标记氨基酸(stableisotopelabelingbyaminoacidsincellculture,SILAC)技术,联合线性离子阱回旋共振质谱仪(LC-LTQ—n’)鉴定由14-3-3sigma过表达引起的差异表达蛋白,将质谱鉴定为表达〉2倍或〈0.5倍的蛋白作为差异蛋白。通过检索人类蛋白参考数据库(Humanproteinreferencedatabase,HPRD)和蛋白质交互作用网络数据库(Kyotoencyclopediaofgenesandgenomes,KEGG)构建分子网络。结果显示C4克隆中外源14—3—3sigma表达量最高(命名为PGSC4),后续实验用PGSCA细胞进行。转染14—3-3sigma后,PG细胞生长速度明显减慢。建立了包含147个蛋白差异蛋白的数据库。构建的分子网络中含有26个蛋白,其中参与了多个细胞活动(细胞周期调控、细胞分化、凋亡等)的重要激酶——酪蛋白激酶Ⅱ0t亚基(caseinkinaseIIsubunitalpha,CSNK2A1)是表达升高最明显的蛋白质,与DNA损伤调节机制相关的转录调节因子MENl(Menin)则是表达降低幅度最大的蛋白质。结论14.3—3sigma可以抑制非小细胞肺癌PG细胞的生长速度,与细胞周期、DNA损伤修复等机制相关的蛋白质发生了变化,并构成了相互作用的分子网络。
- 肖汀米薇李敏曹邦荣冯林程书钧高燕宁
- 关键词:肺肿瘤PG细胞
- 蛋白质组学相关技术及其在正常人肝组织和肝癌研究中的应用
- 肝脏是人体最重要的器官之一,复杂程度仅次于脑,它是多种物质进行代谢的消化器官,并执行其它多种功能。肝脏疾病影响着超过全世界10%的人口,肝脏疾病的治疗也仍然困难重重,原因是缺乏有效诊断,分级和预后方法。由国际人类蛋白质组...
- 米薇
- 关键词:蛋白质组双向凝胶电泳膜糖蛋白
- 文献传递
- 人肝脏线粒体氨甲酰磷酸合成酶单克隆抗体的制备、鉴定与应用
- <正>目的本研究旨在制备人肝脏细胞线粒体单克隆抗体。方法分离人肝脏细胞线粒体,用总蛋白免疫小鼠,并进行了3次细胞融合。结果共获得了23株杂交瘤细胞株。通过筛选cDNA 文库鉴定了抗体的特异性,所获得的抗体中有3株(MBE...
- 鞠艳芳杨金菊吴琼李辉宋颖博任飞垚周枫李戬何湘高媛杜雪梅王兆卿王京兰米薇柳晓兰陈勇蔡云钱小红贺福初高建恩孙启鸿
- 文献传递
- 基于液相色谱-串连质谱的糖基化蛋白质组研究策略
- 人体内50%以上的蛋白质是糖基化修饰蛋白质。糖基化对于蛋白质的折叠、运输、定位起着重要作用,免疫系统中几乎所有的关键分子都是糖蛋白,蛋白质糖基化程度及糖链结构的异常变化也常常是癌症及其他疾病发生的标志。本文以标准糖基化蛋...
- 贾伟卢庄米薇宋丽娜应万涛蔡耘钱小红
- 关键词:液相色谱质谱分析糖基化蛋白质组
- 文献传递
- 抗人肝脏线粒体蛋白单克隆抗体的制备、鉴定与应用
- <正>背景线粒体在细胞的能量代谢、氧自由基生成、凋亡、信号转导、细胞内离子跨膜转运及电解质稳态平衡调控等许多生理、病理过程中起着非常关键的作用,线粒体功能的异常也与退行性疾病、心脏病、衰老和癌症等多种疾病相关。线粒体蛋白...
- 鞠艳芳杨金菊吴琼李辉宋颖博任飞垚周枫李戬何香高媛杜雪梅王兆卿王京兰米薇柳晓兰陈勇蔡云钱小红贺福初高建恩孙启鸿
- 文献传递