杨金凤
- 作品数：19 被引量：19H指数：3
- 供职机构：河北农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：河北省高等学校科学技术研究指导项目河北省引进留学人员资助项目国家苹果产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 苹果锈果类病毒RT-PCR检测体系的建立被引量：7
- 2015年
- 为了开发苹果锈果类病毒（ASSVd）快速、准确的RT—PCR检测方法，以感染苹果锈果类病毒的田间苹果枝条为试材，对苹果锈果类病毒RT—PCR反应体系和程序进行选择和优化，利用优化的检测体系对保定市曲阳县苹果园苗木及3—5年生母本树苹果锈果病的发生情况进行检测，验证该体系的可靠性。结果表明：自行设计引物ASSVdQCxin3特异性最好，优化体系灵敏度达到能够检测3．75ng新鲜样本中的病毒，可准确、灵敏检测苹果锈果类病毒田间样本；曲阳县苹果园48株苗木中携带苹果锈果类病毒13株，带毒率为27．1％；18株母本树中携带苹果锈果类病毒5株，带毒率为27.8％。
- 杨金凤吕运霞唐兴敏王亚南曹克强
- 关键词：苹果苹果锈果病苹果锈果类病毒RT-PCR
- 河北保定地区苹果锈果类病毒分离物的序列分析被引量：6
- 2016年
- 以采自河北保定的苹果锈果类病毒（apple skin scar viroid,ASSVd）样本为试材,采用用RT-PCR方法对样本中的ASSVd全基因组序列进行扩增,然后利用生物学软件MEGA 6.0对该分离物与已发表的其它分离物序列构建系统发育树,对系统进化关系进行分析。结果表明：ASSVd保定分离物基因组全长332nt,将序列提交到GenBank,登录号为KR264032。该分离物与已发表的其它13个来自不同寄主、不同国家的ASSVd分离物间进化关系极近,核苷酸相似性为92%~99%。与加拿大苹果上的X71599株系亲缘关系最近,相似性为99%,仅在第221位有一个碱基差异,与新疆梨上的JX861259株系亲缘关系最远。系统发育分析表明,不同地区的ASSVd分离物聚类没有规律性,说明ASSVd不存在地区专化性。新疆梨、桃、杏、苹果不在同一分支,说明ASSVd可能存在一定的寄主特异性。二级结构预测表明,该分离物的中央保守区与末端保守区与ASSVd其它序列相同。
- 杨金凤郭永斌胡同乐王树桐王亚南曹克强
- 关键词：苹果锈果类病毒
- 苹果锈果类病毒河北保定分离物序列分析
- 苹果锈果病又名花脸病或裂果病,是危害苹果较为严重的非潜隐性病毒之一,也是中国苹果上重要的检疫性对象.苹果锈果病的病原为苹果锈果类病毒(Apple skin scar viroid,ASSVd),异名苹果斑纹类病毒(Dap...
- 杨金凤郭永斌李云皓吕运霞王亚南曹克强
- 关键词：苹果锈果类病毒
- 苹果花脸病田间病情发展及ASSVd在组培条件下的传播被引量：4
- 2020年
- 为了明确苹果锈果类病毒(apple scar skin viroid,ASSVd)引起的苹果花脸病在田间的病情发展情况以及ASSVd在组培条件下的传播方式,2012—2015年对河北省顺平南神南村3个果园进行持续调查和检测。结果显示,果园A、B、C的显症率分别从3.00%、19.35%和10.00%上升至10.00%、34.41%和22.00%,带毒率分别从11.00%、20.43%和14.00%上升至23.00%、37.63%和30.00%,带毒率和显症率都逐年增加,而且带毒率大于显症率,即有些带毒果树不显症。发病果树田间分布有明显的发病中心。通过高通量测序发现显症果树ASSVd vsiRNA reads数是带毒未显症reads数的4.08倍,同时实时荧光定量PCR检测发现显症树ASSVd病毒积累量显著高于带毒未显症树。以携带ASSVd的组培苗和无毒组培苗为试材,利用RT-PCR检测明确了ASSVd可通过伤口沾染带毒汁液、组培剪污染、含毒培养基、根系接触进行传播,其中根系接触传染率较高。
- 郗娜娜赵坷杨金凤孟祥龙胡同乐王树桐王亚南曹克强
- 关键词：苹果苹果锈果类病毒高通量测序RT-PCR病情发展
- 苹果树木质部及韧皮部组织基因组DNA的提取及质量检测
- 苹果树木质部及韧皮部中含有大量的酚类、多糖等次生代谢物质,严重影响基因组DNA提取的得率和纯度。本试验采用3种不同的方法,即改良的CTAB法,快速盐提法,试剂盒法,从苹果树木质部及韧皮部提取基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶...
- 刘钰娇杨金凤赵璐王亚南胡同乐王树桐曹克强
- 关键词：韧皮部木质部基因组DNA
- 一种以内标为基础的苹果锈果类病毒RT‑PCR检测技术
- 本发明涉及一种以内标为基础的苹果锈果类病毒RT‑PCR检测技术。以带有叶芽苹果一年生枝条顶端0~5 cm皮层组织为试材，采用RNA提取改良法提取组织总RNA，以总RNA为模板，苹果锈果类病毒特异性引物和苹果内源基因引物进...
- 王亚南杨金凤曹克强
- 文献传递
- 一种复配杀菌剂及其制备方法
- 本发明公开了一种复配杀菌剂及其制备方法，复配杀菌剂由活性成分、填料和助剂组成，其中，活性成分由三唑类杀菌剂戊唑醇、苯并咪唑类杀菌剂多菌灵组成。可有效防治苹果树皮腐烂病菌、苹果轮纹病菌等枝干真菌性病害。发明在防治苹果树腐烂...
- 党建美李云皓李婷刘欣王树桐胡同乐王亚南曹克强杨金凤何乙坤苏律范军印沈倩胡清玉
- 利用内标为基础的苹果锈果类病毒RT-PCR检测技术被引量：3
- 2017年
- 为开发准确、灵敏的苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd)RT-PCR检测方法,以田间染病苹果组织为试材,提取高质量总RNA为模板,在常规RT-PCR检测体系中引入苹果线粒体nad5基因作为内标基因,对RT-PCR反应体系和程序进行优化,并测定其灵敏度和稳定性,最后利用优化的检测体系确定苹果果实着色期最佳检测部位。结果表明:以RNA提取改良法提取总RNA为模板合成cDNA后,进行PCR扩增,优化后的PCR体系(25μL)中cDNA模板2μL、ASSVd(20pmol/μL)正反向引物各1.0μL,nad5(20pmol/μL)正反向引物各0.1μL;扩增程序中退火温度为60.9℃,循环次数为35次;检测灵敏度为37.5ng新鲜样本;果实着色期,染病植株的幼嫩叶片、1a生枝的韧皮部和木质部、果实及部分种子样本均能检测到病毒,最佳检测部位为幼嫩韧皮部。研究结果可以为ASSVd高效、快速、准确的检测提供可靠方法,并为田间病害诊断及无毒苗木繁育提供依据和借鉴。
- 吕运霞李楠王亚迪王雪静杨金凤胡同乐王树桐王亚南曹克强
- 关键词：苹果锈果类病毒RT-PCR
- 苹果树木质部及韧皮部组织基因组DNA的提取及质量检测
- 2016年
- 苹果树木质部及韧皮部中含有大量的酚类、多糖等次生代谢物质，严重影响基因组DNA提取的得率和纯度。采用3种不同方法，即改良的CTAB法、快速盐提法、试剂盒法，从苹果树木质部及韧皮部提取基因组DNA，并通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测所提取基因组DNA的质量。结果表明，改良的CTAB法提取的组织基因组DNA不论是浓度、质量还是随机引物PCR扩增效果均能够满足进一步分子试验需要，而改进的快速盐提法和试剂盒法提取得率太低，不能用于分子生物学研究。
- 刘钰娇杨金凤赵璐
- 关键词：基因组DNA提取韧皮部木质部苹果树紫外分光光度法琼脂糖凝胶电泳
- 一种以内标为基础的苹果锈果类病毒RT-PCR检测技术
- 本发明涉及一种以内标为基础的苹果锈果类病毒RT-PCR检测技术。以带有叶芽苹果一年生枝条顶端0~5cm皮层组织为试材，采用RNA提取改良法提取组织总RNA，以总RNA为模板，苹果锈果类病毒特异性引物和苹果内源基因引物进行...
- 王亚南杨金凤曹克强
