尹文化
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
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- 大鼠脊髓全横断损伤模型标准化的初步探索被引量：5
- 2008年
- 目的:对比研究两种脊髓全横断模型大鼠的后肢运动功能评分和病理学特征,探索建立标准化的脊髓全横断模型。方法:成年雌性SD大鼠60只,随机分为A组(n=12)、B组(n=24)和C组(n=24),每组再随机分为术后7、14、28d3小组。以T9椎体为中心,A组行椎板切除,为假手术对照组;B、C两组行脊髓全横断,造成脊髓急性损伤模型,其中B组采用常规外科方法造模,C组采用标准化显微操作技术造模。各小组于术后7、14和28d行后肢运动功能BBB评分,然后采用过量麻醉处死大鼠,经心脏灌注取材,切片行HE染色。观测脊髓横断处瘢痕组织厚度、脊髓残端间距、空洞横径和脑脊液囊腔形成情况,计算瘢痕指数、残端间距指数和空洞指数,并对B、C两组的BBB评分及各项检测指标进行对比研究。结果:A组术前、术后BBB评分和脊髓病理无明显变化。B、C两组大鼠术后后肢完全性瘫痪,其中B组大鼠后肢功能无恢复。术后1～2周,C组大鼠开始出现后肢运动功能自发性恢复,且C组脊髓病理学检测指标值均明显低于B组,差异具有极显著性意义(P<0.01)。各组病理学观测指标与BBB评分之间无相关关系。结论:标准化脊髓全横断造模方法有利于消除个体差异,更有利于对治疗效果的量化分析和研究比较。
- 尹文化金大地鲁凯伍闫慧博余磊王璐
- 关键词：脊髓损伤
- 大鼠脊髓去细胞支架化学萃取方法的初步探讨
- 2009年
- 脊髓损伤是脊柱外科常见疾病，制备脊髓去细胞支架，获得天然的脊髓基质和三维结构，构建组织工程化脊髓，可能有助于改变目前脊髓损伤治疗效果不理想的现状。应用化学萃取的方法可有效制备同种异体外周神经去细胞支架，而且不出现宿主免疫排斥反应。本研究采用Sondell等报道的方法萃取大鼠脊髓，观察其形态学变化特点，为制备具有天然脊髓结构的组织工程化脊髓提供理论依据。
- 尹文化鲁凯伍邓许勇金大地
- 关键词：脊髓损伤化学萃取组织工程化免疫排斥反应
- 人脐血干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的功能评价被引量：3
- 2008年
- 背景：在脊髓损伤模型的研究中，BBB评分系统和斜板试验均与脊髓损伤程度高度相关。目的：建立改进大鼠脊髓全横断模型，对比观察BBB评分和斜板试验在人脐血干细胞移植术后功能评价中的作用。设计、时间及地点：观察对比实验，于2007-04／2008—07在广东省组织构建与检测重点实验室完成。材料：脐血来自健康足月产妇。实验动物为SPF级健康成年雌性SD大鼠50只，随机分为假手术对照组（n=10）、磷酸盐注射组（n=20）、脐血干细胞移植组（n=20）。方法：分离和体外培养人脐血干细胞。在显微镜下纵行剖开SD大鼠硬脊膜囊后，于硬脊膜内、蛛网膜外将超薄刀片刀尖直抵椎体骨质，将蛛网膜、脊髓、两侧壁和腹侧的硬脊膜作为一个整体完全划断，制作大鼠脊髓全横断模型，假手术对照组仅打开椎板，脐血干细胞移植组大鼠于脊髓两断端分别显微注射人脐血干细胞悬液6×10^9～7×10^9L^-1，磷酸盐注射组注射等量磷酸盐缓冲液。主要观察指标：术后12周内每2周分别应用BBB评分和斜板试验进行1次后肢运动功能评价。结果：假手术对照组后肢运动功能于手术前后无显著变化。从术后第2周开始，磷酸盐注射组和脐血干细胞移植组逐渐恢复部分后肢运动功能，两组的BBB评分和斜板试验检测结果均表现出一致的增长趋势，呈线性正相关关系。从术后4周开始，BBB评分〈13分的磷酸盐注射组和BBB评分≥13分的脐血干细胞移植组大鼠，在斜板试验中差异非常显著（P〈0．01）。到术后第12周时，磷酸盐注射组和脐血干细胞移植组斜板试验角度和恢复程度分别为34．25。和52．94％、53．85。和83．23％，并且脐血干细胞移植组高于磷酸盐注射组（P〈0．01），而同期磷酸盐注射组和脐血干细胞移植组对应的BBB评分和恢复程度仅分别为8．15和38.81％、13．90和66．19
- 尹文化金大地鲁凯伍邓许勇
- 关键词：脊髓损伤脐血干细胞
- 显微操作在脐血干细胞移植修复大鼠脊髓损伤中的应用
- 2008年
- [目的]建立大鼠脊髓全横断损伤模型,应用显微操作方法和人脐血干细胞移植修复大鼠脊髓损伤,观察显微操作技术对大鼠受损脊髓功能恢复的影响。[方法]取足月健康顺产新生儿脐血,分离、培养脐血干细胞。60只SD雌性大鼠,随机分为假手术对照组(A组,n=10)、实验对照组(B组,n=10)、常规治疗组(C组,n=20)和显微治疗组(D组,n=20)。A组大鼠只打开椎板;B、C组大鼠采用常规方法行T8~9平面脊髓全横断,造成急性脊髓损伤,C组大鼠于脊髓两断端用1μl注射器分别注射脐血干细胞悬液1μl(干细胞浓度为6×109/L^7×109/L),B组同法注射等量PBS液;D组采用显微操作技术行脊髓横断,并以口径50μm的毛细玻璃针用相同方法注射脐血干细胞。术后1~8周内每周进行1次后肢BBB评分,术后第8周处死大鼠,对比观察术中和术后第8周各组大鼠脊髓大体标本外形、颜色、质地和体积大小改变。[结果]A组大鼠手术前后运动功能、脊髓大体标本未见明显变化。B、C、D组大鼠术后双侧后肢完全性瘫痪,B组大鼠无明显恢复。而C、D组大鼠,从术后第2周开始逐渐恢复部分后肢运动功能。第3周以后,D组大鼠后肢运动功能BBB评分明显优于C组,具有显著性差异(P<0.05)。术后第8周,所有大鼠脊髓横断处均瘢痕愈合,B组大鼠远侧段脊髓干瘪、皱缩;C组大鼠远侧段脊髓直径轻度变细,外形尚饱满;D组大鼠横断处两侧脊髓直径无明显差异,外形圆润,但局部可见明显瘢痕粘连。[结论]人脐血干细胞移植对脊髓横断性损伤具有较好的治疗作用,显微操作技术的应用能最大可能地减少人为造成的脊髓损伤,有利于脊髓损伤的功能修复。
- 尹文化金大地鲁凯伍闫慧博王璐邓许勇
- 关键词：显微操作脊髓损伤脐血干细胞
- 机械振荡对脊髓去细胞支架形态学的影响被引量：9
- 2008年
- 目的探讨机械振荡对脊髓去细胞支架形态学的影响,建立大鼠脊髓去细胞支架的化学萃取方法,为脊髓损伤修复提供具有仿生结构的支架。方法取成年大鼠脊髓15段,分成A组、B组和C组,每组5段,用TritonX-100和脱氧胆酸钠溶液进行化学处理,3组振荡频率分别为80、120和160r/min。对萃取后的脊髓行石蜡切片、HE染色和扫描电镜观察,比较脊髓萃取后细胞清除情况和脊髓基质形态学变化。结果A组去细胞脊髓内残留大量脱核神经细胞胞体及髓鞘结构。B组和C组脊髓萃取后细胞、轴突和髓鞘被彻底清除,去细胞脊髓为一种无细胞、网格样纵行排列的基质纤维网状结构,但是C组硬脊膜和脊髓内基质纤维结构出现明显破坏。结论机械振荡有利于清除脊髓内细胞、轴突和髓鞘,合适的机械振荡频率在去细胞的同时,还能较好地保存脊髓内天然的基质纤维和三维空间结构,为构建组织工程化脊髓提供理想的支架材料。
- 尹文化金大地邓许勇鲁凯伍
- 关键词：机械振荡脊髓化学萃取细胞支架
