李响
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:海南大学环境与植物保护学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 农杆菌介导的AtMYB118基因转化橡胶树易碎胚性愈伤组织体系优化(英文)
- 2014年
- [目的]采用正交设计L25(56)优化农杆菌介导的AtMYB118基因对橡胶树易碎胚性愈伤组织的遗传转化体系,为橡胶树品种遗传改良提供参考.[方法]以75.0 mg/L卡那霉素筛选经过转化的愈伤组织;采用GUS瞬时表达检测方法评价6个因素即预培养时间、农杆菌菌液浓度(OD600)、乙酰丁香酮(AS)浓度、侵染时间、共培养温度和共培养时间对遗传转化的影响.[结果]6个因素显著影响橡胶树长期培养的易碎胚性愈伤组织的转化频率,易碎胚性愈伤组织遗传转化优化条件为:预培养0d,菌液OD600为0.7,侵染时间7 min,共培养时间5d,AS 200 μmol/L,共培养温度25℃.在此优化条件下可获得最高转化频率.经过4~6个月的筛选,获得17个GUS染色阳性的易碎愈伤组织系.经PCR和反转录PCR分析转化愈伤组织,进一步证实uidA、nptⅡ、AtMYB118基因已被整合到愈伤组织基因组中并表达.培养获得1539个胚状体,其中164个为转基因胚状体,转化频率为10.6%;最终获得4株转AtMYB118基因植株.[结论]优化获得可行有效的橡胶树易碎胚性愈伤组织遗传转化体系,可为其品种遗传改良提供技术支持.
- 毕政鸿李哲王志秋戴雪梅方家林黄华孙林位夫LARDE TLudovicMONTORO PascalCARRON Marc-PhilippeLECLERCQ Julie左建儒牟金叶杨晓辉李响
- 关键词:橡胶树反转录PCR
- 差异显示法分离橡胶树与白粉菌侵染相关基因
- 橡胶树白粉病是世界橡胶树种植园的重要病害之一,由粉孢属真菌Oidium heveae引起。该病主要为害橡胶树的嫩叶,嫩梢,嫩芽和花序。本实验以抗白粉病橡胶树品系RRIC52为实验材料,利用mRNA差异显示技术(DDRT-...
- 李响梁鹏何其光刘文波林春花缪卫国郑服丛
- 关键词:橡胶树白粉菌MRNA差异显示QRT-PCR
- 文献传递
- 棉花角斑病菌遗传驯化体系的建立被引量:2
- 2016年
- Xanthmonas citri subsp.malvacearum(Xcm)是棉花角斑病的病原,由于缺乏适合的遗传驯化体系,难于对其特定的基因进行研究,所以建立高效的基因缺失突变系统,是迫切需要解决的问题。采用去甲基化氮胞苷(5-AZA)驯化野生菌株Xcm 8号小种菌株V8和V8无细胞胞外物(CFEs)驯化重组质粒p K18mobsac B::N1012及p K18mobsac B::m762这2种驯化方法,以来自V8的hpa Xm N和hpa Xm为靶基因验证其有效性。结果表明,成功获得了△hpa Xm N和△hpa Xm突变体;虽然2种驯化方式都能获得转化子,但驯化菌株的电转化效率是驯化质粒的10~100倍。遗传驯化体系的建立消除了Xcm V8由于限制修饰系统引起的转化障碍,实现了特定基因的定点突变,为后续获得Xcm V8其他基因缺失突变体奠定了基础。
- 王清梁鹏李响刘文波林春花郑服丛缪卫国
- 关键词:V8驯化定点突变
- 橡胶树白粉菌诱导寄主及非寄主植物产生活性氧积累的研究被引量:4
- 2013年
- 采用DAB染色法观察了橡胶树、马占相思、芒果树和假败酱等植物叶片在接种橡胶树白粉菌后不同时间点的活性氧的积累和白粉病菌的侵入情况。结果表明,橡胶树叶片在接菌后24 h才能检测到微弱活性氧的积累,接菌后48 h活性氧的积累量略有增强,接菌后72 h达到最大强度,之后减弱,接菌后120 h白粉病菌产生分生孢子并且成功侵入叶片组织。马占相思叶片接菌后白粉菌与植物叶片互作的整个过程中活性氧变化规律与橡胶树观察结果相同,接菌后24 h出现活性氧积累,此后随时间的变化活性氧积累先增强后减弱,120 h白粉菌可以产生分生孢子并顺利侵入叶片组织。芒果树叶片接菌后12 h即可检测到大量的活性氧产生,整个互作过程中,活性氧积累量大,接菌后120 h时白粉菌虽然可以产生分生孢子,但未能导致芒果叶片发病。假败酱叶片接种白粉菌后,接菌后12 h可观察到强烈的活性氧积累,随时间的变化染色程度不断加深,染色斑范围扩大,接菌后72 h观察到白粉菌无法继续扩展,最终无法成功侵入叶片组织。观察结果揭示了活性氧,尤其是浸染早期活性氧的积累在植物抵抗白粉病侵染中发挥的重要作用。
- 李响戴懿梁鹏缪卫国郑服丛
- 关键词:活性氧
- 橡胶树抗白粉病相关防卫基因的克隆及转hpa1Xoo基因植株再生体系的建立
- 巴西橡胶树(Hevea brasliensis)是天然橡胶的主要来源,在国民经济中具有举足轻重的地位。橡胶树的种植和生产常受白粉病的严重威胁,白粉病是世界范围内危害橡胶树的三大病害之一,发病严重时导致新梢枯死、胶乳减产,...
- 李响
- 关键词:橡胶树防卫基因MRNA差异显示
- 一种植物表达载体pCAMBIA1304-hpa1xoo的构建方法及表达载体
- 本发明提出了一种植物表达载体pCAMBIA1304-hpa1xoo的构建方法,构建过程中,采用间接载体进行构建,具体为通过对pCAMBIA1304载体和pCAMBIA2301载体进行重组成pCAMBIA1304-2301...
- 缪卫国李响刘文波郑服丛林春花
- 文献传递