陈泽文
- 作品数:7 被引量:21H指数:3
- 供职机构:安徽医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金:安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- TGF-β1刺激心肌成纤维细胞活化过程中DNMT3A的表达变化被引量:4
- 2014年
- 目的探讨转化生长因-β1(TGF-β1)刺激大鼠心肌成纤维细胞活化过程中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)的表达变化情况。方法将30只雄性SD大鼠处死,取大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养大鼠心肌成纤维细胞。模型组的心肌成纤维细胞分别给予TGF-β1 1、5、10μg·L-1,建立体外心肌成纤维细胞活化模型。MTT法检测细胞增殖活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液胶原含量,Western blot法检测DNMT3A和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果与正常对照组相比较,模型组TGF-β1刺激细胞12、24、48 h后,血清中I型胶原和III型胶原的含量明显增高,细胞增殖活性明显增强,Western blot检测显示模型组DNMT3A和α-SMA的表达明显高于正常对照组。结论心肌纤维化的形成可能与DNMT3A表达上调有关,潜在的分子作用机制有待于进一步研究。
- 陈泽文石开虎陶辉吴君旭徐盛松宣海洋曹炜沙纪名占红英
- 关键词:心肌纤维化Α平滑肌肌动蛋白
- MicroRNA-29a对心肌成纤维细胞活化增殖的调控机制研究
- 目的: 心房颤动(Atrial fibrillation,AF)属于快速型心律失常,在临床上的发病几率最高,其发生发展和转归的分子机制是心血管疾病领域的研究重点。心房颤动的病理生理学基础是心肌纤维化,其可导致心房颤动及...
- 陈泽文
- 关键词:心房颤动心肌纤维化心肌成纤维细胞
- 文献传递
- HDAC8在异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化中的作用被引量:2
- 2015年
- 目的初步探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC8)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中表达的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机均等分为正常组和模型组。模型组给予ISO 1次/d(5 mg/kg),正常组予以等剂量生理盐水皮下注射,连续注射7 d后处死大鼠取血液标本,并取心肌组织。测定心脏质量指数;ELISA法检测血清中I型胶原和Ⅲ型胶原的含量;HE和Masson染色法观察心肌纤维化程度;Western blot法测定HDAC8和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达情况;qRT-PCR法检测HDAC8 mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组心脏质量指数明显增加(P<0.05);HE和Masson染色显示模型组心肌组织出现明显的胶原纤维增生;模型组血清标本中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量较正常组明显增加(P<0.05);Western blot法检测显示模型组HDAC8、α-SMA的蛋白表达明显高于正常组(P<0.05,P<0.01);qRT-PCR检测模型组HDAC8 mRNA表达明显高于正常组(P<0.05)。结论 HDAC8在心肌纤维化中高表达,而在正常心肌组织中低表达,提示其在心肌纤维化的发生发展中可能发挥作用。
- 支敏陶辉陈泽文汪裕琪宣海洋占红英石开虎
- 关键词:心肌纤维化Α-SMA
- 化学合成microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响被引量:5
- 2015年
- 目的探究microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法应用LipofectamineTM2000Reagent向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染microRNA-21 inhibitors 24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测microRNA-21、I型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;Western blot法检测Col1A1和α-SMA的表达水平;MTT法检测microRNA-21 inhibitors对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。结果转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞中,microRNA-21表达下调,Col1A1和α-SMA的表达下降;转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞增殖活性明显减弱。结论 microRNA-21 inhibitors可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,提示microRNA-21是心肌成纤维细胞活化增殖的潜在靶向分子,有利于为干预和预防心肌纤维化的发生发展提供新思路。
- 张猛陶辉陈泽文张家贵宣海洋占红英石开虎
- 关键词:MICRORNA-21心肌成纤维细胞COL1A1Α-平滑肌
- 过表达LncRNA GAS5对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响被引量:8
- 2017年
- 目的应用长链非编码RNA GAS5(LncRNA GAS5)过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)转染SD大鼠心肌成纤维细胞,观察其对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法提取SD大鼠心肌成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激其增殖,分为pEGFP-C1-GAS5组、阴性对照组和空白对照组,应用LncRNA GAS5基因的过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)通过脂质体瞬时转染细胞,48 h后收获细胞。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测GAS5、Ⅰ型胶原前胶原(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,Western blot分析Col1A1和α-SMA蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖活力。结果 TGF-β1刺激心肌成纤维细胞后,qRT-PCR结果显示LncRNA GAS5的表达量较正常组下降(P<0.05);与阴性对照组和空白对照组比较,转染了pEG-FP-C1-GAS5的实验组,qRT-PCR结果显示实验组的GAS5表达均明显升高(P<0.05),同时α-SMA和Col1A1 mRNA表达显著降低(P<0.05);Western blot结果显示转染pEG-FP-C1-GAS5的实验组α-SMA和Col1A1蛋白表达量均明显降低(P<0.05);MTT法检测结果表明在实验组心肌成纤维细胞的增殖活力低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论过表达LncRNA GAS5可显著降低心肌成纤维细胞的增殖活力,提示GAS5有抑制心肌成纤维细胞的活化增殖的作用,为以后进一步研究提供依据。
- 张家贵陶辉施鹏陈泽文曹炜占红英石开虎
- 关键词:心肌成纤维细胞Α-平滑肌肌动蛋白
- 化学合成microRNA-29a inhibitors和mimics对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响被引量:3
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-29a(miR-29a)inhibitors和mimics对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法取SD大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养SD大鼠心肌成纤维细胞。应用Lipofectamine^(TM)2000 Reagent分别向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染miR-29a inhibitors和miR-29a mimics 24 h和48 h后,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-29a、Ⅰ型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的RNA水平的表达,MTT法检测细胞增殖活性。结果与正常对照组和阴性对照组比较,在瞬时转染miR-29a inhibitors的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平下调;而在转染miR-29a mimics的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平上调。CoilA1在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,而在miR-29a mimics组中则表达水平降低。α-SMA在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,在miR-29a mimics组中则表达水平降低。瞬时转染miR-29a mimics 24、48 h后,与空白对照组和其阴性对照组相比较,心肌成纤维细胞活力明显下降;而瞬时转染miR-29a inhibitors 24、48 h后,心肌成纤维细胞活力则明显增强。结论 miR-29a mimics可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,而miR-29a inhibitors则显著提高心肌成纤维细胞的增殖活性,提示心肌纤维化的形成可能与miR-29a表达下调有关,其潜在的分子作用机制有待进一步研究。
- 陈泽文陶辉周晓施鹏张家贵宣海洋占红英石开虎
- 关键词:心肌成纤维细胞Α-SMA
- miR-29a对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响
- 石开虎陈泽文陶辉施鹏张家贵