陈凯
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目南方医科大学南方医院院长基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 低浓度雷公藤内酯联合伊达比星在急性髓系白血病干细胞凋亡中的作用
- 2017年
- 目的研究IC_(20)浓度(5 nmol/L)的雷公藤内酯(TPL)联合IC_(50)浓度(27 nmol/L)的伊达比星(IDA)能否通过下调MDR1基因表达水平诱导急性髓系白血病(AML)干细胞凋亡。方法从KG1a细胞株中分选CD34^+CD38^-亚群,将其作为AML干细胞模型;分成空白对照组、TPL组、IDA组、联合组。空白对照组:培养液中不含TPL及IDA;TPL组:培养液中含IC_(20)浓度(5 nmol/L)的TPL;IDA组:培养液中含IC_(50)浓度(27 nmol/L)的IDA;联合组:培养液中含IC_(20)浓度(5 nmol/L)的TPL及IC_(50)浓度(27 nmol/L)的IDA。Annexin V-FITC/PI双标法流式细胞术检测处理后AML干细胞的凋亡情况;RT-PCR法检测上述4组中AML干细胞MDR1 mRNA表达水平的变化;Western blot检测上述4组AML干细胞给药后MDR1蛋白表达水平的变化。结果空白对照组、TPL组、IDA组及联合组中AML干细胞在处理24 h后凋亡率分别为(0.37±0.29)%、(18.07±0.32)%、(20.13±0.06)%和(60.17±1.45)%,联合组中AML干细胞凋亡比例显著高于TPL组及IDA组,差异有统计学意义(P<0.001)。RT-PCR结果显示TPL组、IDA组及联合组中AML干细胞内MDR1 mRNA表达水平均有不同程度下调,空白对照组、TPL组、IDA组及联合组中MDR1 mRNA表达水平分别为0.927±0.084、0.462±0.048、0.396±0.019和0.231±0.023,联合组MDR1 mRNA表达水平均显著低于TPL组及IDA组,差异有统计学意义(P<0.001)。Western blot结果显示TPL组、IDA组及联合组AML干细胞内MDR1蛋白表达水平均不同程度下调,其中联合组更加明显。结论 IC_(20)浓度的TPL可显著提高IC_(50)浓度的IDA对AML干细胞的凋亡诱导作用,其机制可能与抑制MDR1基因及蛋白的表达有关。
- 唐家宏徐兵李妍妍陈菲莉陈凯周淑芸
- 关键词：雷公藤内酯伊达比星MDR1基因
- Apatinib抑制套细胞淋巴瘤细胞株增殖与凋亡实验研究被引量：2
- 2017年
- 目的套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)的化疗效果欠佳,亟需开拓新的靶向治疗方式。本研究探讨新一代小分子血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)酪氨酸激酶抑制剂阿帕替尼(Apatinib)对MCL细胞株增殖与凋亡的影响及机制。方法体外培养MCL细胞株Mino和Z138;CCK8法检测不同浓度下Apatinib对Mino和Z138细胞株的增殖抑制作用;AnnexinⅤ/PI双标记流式细胞术检测不同浓度Apatinib对Mino和Z138细胞株的诱导凋亡作用;蛋白质印迹法检测药物处理后ERK1/2通路相关蛋白ras、c-raf、pMEK和pERK1/2的表达的变化。结果 Aptinib对Mino和Z138细胞株均有明显的增殖抑制作用,呈浓度依赖性。Mino细胞经过Apatinib处理48h后,2.5μmol/L的抑制率为(5.72±2.43)%、5μmol/L的抑制率为(8.19±2.2)%、10μmol/L的抑制率为(17.70±4.01)%、20μmol/L的抑制率为(44.58±7.59)%、40μmol/L的抑制率为(85.12±2.67)%,IC50为(20.63±0.18)μmol/L,经多个独立样本非参数检验Kruskal-Wallis H分析表明,各处理组与对照组多重比较,差异均有统计学意义,H=22.016,P=0.001。Z138细胞组2.5μmol/L的抑制率为(7.19±1.71)%、5μmol/L的抑制率为(10.60±1.43)%、10μmol/L的抑制率为(20.24±5.93)%、20μmol/L的抑制率为(53.46±4.91)%、40μmol/L的抑制率为(87.07±1.41)%,IC50为(18.15±0.18)μmol/L,经多个独立样本非参数检验Kruskal-Wallis H分析表明,各处理组与对照组两两比较差异有统计学意义,H=16.460,P=0.006。细胞凋亡结果显示,Apatinib处理Mino细胞48h后,对照组凋亡率为(4.03±0.99)%、10μmol/L的凋亡率为(8.10±0.98)%、20μmol/L的凋亡率为(29.46±7.18)%、30μmol/L的凋亡率为(35.06±4.17)%、40μmol/L的凋亡率为(50.01±2.14)%。经Kruskal-Wallis H分析表明,处理组与对照组两两比较差异有统计学意义,H=13.033,P=0.011。Z138细胞对照组凋亡率为(5.45±1.82)%、10μmol/L的凋亡率为(10.58±2.74)%、20μmol/L的凋亡率为(16.51�
- 陈钦伟王焱华佳叶邓漫漫查洁陈凯徐兵
- 关键词：套细胞淋巴瘤细胞凋亡ERK1/2信号通路
- Disulfiram联合铜对B淋巴细胞白血病细胞株增殖与凋亡影响机制探讨被引量：4
- 2015年
- 目的研究Disulfirum(DS)联合Cu(DS/Cu)对B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞株(nalm6细胞)增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法 CCK8法检测不同浓度DS/Cu对Nalm6的增殖抑制作用,AnnexinⅤ/PI法检测不同浓度DS/Cu对Nalm6细胞的诱导凋亡作用,JC-1法检测不同浓度DS/Cu处理nalm6后线粒体膜电位的变化,蛋白质印迹法检测药物处理后线粒体通路相关蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的表达变化。结果 0.5μmol/L Cu作用24h后对nalm6细胞的增殖抑制率为(6.39±4.93)%,与对照组比较差异无统计学意义,t=-2.244,P=0.154。而不同浓度的(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2和6.4μmol/L)DS联合0.5μmol/L Cu对nalm6细胞均具有显著的增殖抑制作用,抑制率分别为(22.29±6.69)%、(48.66±11.58)%、(50.83±12.61)%、(59.24±9.43)%、(62.74±9.17)%、(66.7±7.63)%、(72.13±7.94)%和(77.86±5.43)%,与对照组比较差异均有统计学意义,P值均<0.05;24h的IC50为(0.18±0.08)μmol/L。AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡结果显示,0.5μmol/L Cu作用24h后nalm6细胞的凋亡比例为(7.82±5.13)%,与对照组(8.34±6.23)%比较差异无统计学意义,t=0.112,P=0.916。而不同浓度的DS/Cu对nalm6细胞均具有显著的诱导凋亡作用,0.025、0.05、0.1、0.2和0.5μmol/L的DS联合Cu(0.5μmol/L)作用24h后的凋亡率分别为(17.84±7.68)%、(31.39±5.86)%、(60.41±13.87)%、(69.26±13.29)%和(81.37±12.72)%,与对照组比较差异有统计学意义,P值均<0.05。JC-1法检测线粒体膜电位变化结果显示,单药Cu(0.5μmol/L)组的JC-1多聚体/单体比值为1.12±0.09,与对照组(0.90±0.13)比较差异无统计学意义,t=-2.442,P=0.071。不同浓度的(0.025、0.05、0.1、0.2和0.5μmol/L)DS联合0.5μmol/L Cu组处理nalm6细胞12h后,线粒体膜电位水平明显降低,表现为JC-1多聚体/单体比值随浓度的增加而逐渐降低,分别为1.4±0.32、0.32±0.13、0.14±0.09、0.1±0.02和0.06±0.005,与对照组比较差异有统计学意义,P值均<0.001。蛋白质印迹法显示,DS/Cu�
- 邓漫漫蒋治武李洁陈凯李鹏周淑芸徐兵
- 关键词：双硫仑铜线粒体通路急性B淋巴细胞白血病
- 初治急性髓系白血病患者中MDR1和Nrf2基因的表达研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨急性髓系白血病（AML）患者MDR1和Nrf2基因表达水平及其临床意义。方法选择2011年10月至2014年1月南方医科大学南方医院血液科110例初治AML患者,其中男性66例,女性44例;年龄14~77岁,中位年龄36岁。通过实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法联合检测患者MDR1和Nrf2基因的表达水平,分析其表达水平与疾病特征及临床疗效之间的关系。结果以110例初治AML患者MDR1和Nrf2基因表达量的中位数为分界点,将患者分别分为MDR1基因低表达组和MDR1基因高表达组及Nrf2基因低表达组和Nrf2基因高表达组各55例,而初治AML患者MDR1和Nrf2基因表达水平在不同分层的年龄、性别、法国（France）、美国（American）和英国（Britain）（FAB）分型、外周血象、骨髓原始细胞比例、遗传学危险度分层、免疫分型CD34表达间差异无统计学意义（P〉0.05）。MDR1基因低表达组完全缓解（CR）率和总生存（OS）率均显著高于MDR1基因高表达组（P=0.032、0.045）,而Nrf2基因低表达组和Nrf2基因高表达组CR率和OS率差异无统计学意义（P〉0.05）。在MDR1基因低表达组患者中Nrf2基因表达水平高、低两组患者CR率及OS率差异均无统计学意义（P〉0.05）。但在MDR1基因高表达组患者中Nrf2基因高表达组患者CR率和OS率皆优于Nrf2基因低表达组患者（P=0.007和P=0.001）。结论 MDR1基因是AML预后差的指标之一,Nrf2基因不同表达水平患者的危险度分层、疗效、预后差异均无统计学意义;但在MDR1基因高表达组患者中Nrf2基因高表达可能是预后好的指标。
- 韦祁董慧娟梁家宝陈凯周勇周淑芸徐兵
- 关键词：MDR1基因治疗预后
- 可溶性肿瘤坏死因子受体及白介素-2受体的基础与临床研究
- 白岚高蕾南清振杨希山黄聪武陈凯赖卓胜张兰兰
- 该项目自行标记特异性的单抗，建立ELISA方法，并应用于临床检测恶性肿瘤、慢性肝病患者体液中的可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFRs）及可溶性白介素-2受体（sIL-2R）水平，用流式细胞仪技术检测患者外周血单个核细胞（P...
- 关键词：
- 关键词：可溶性肿瘤坏死因子受体可溶性白介素-2受体
- Disulfiram联合Cu通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导白血病干细胞凋亡被引量：4
- 2015年
- 目的探讨Disulfiram联合Cu(DS/Cu)诱导急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)细胞凋亡及其相关分子机制。方法磁珠筛选CD34+CD38-的KG1α细胞作为AML干细胞,流式细胞术检测空白对照组、DS单药组(5μmol/L)、DS/Cu组(5μmol/L/0.5μmol/L)、DS/Cu+NAC组(5μmol/L/0.5μmol/L/10 mmol/L)的AML干细胞24 h后凋亡比率及ROS水平;qRT-PCR检测上述各组TNF-α、CD40、TNFRSF11B、TNFRSF1B、HRK凋亡相关基因mRNA表达水平;Western blot检测各组处理后TNF-α的蛋白表达水平;予以中和抗体TNF-αm Ab(2μg/m L)和对照抗体Ig G(2μg/m L)预处理2 h后,流式细胞术检测空白对照组、DS/Cu组、TNF-αm Ab组、TNF-αm Ab+DS/Cu组、Ig G组及Ig G+DS/Cu组的AML干细胞24 h后的ROS水平。结果予以DS或DS/Cu处理CD34+CD38-KG1α细胞后,细胞凋亡率由空白对照组的(6.65±0.64)%分别上升至(11.87±1.30)%、(27.43±1.65)%,差异均具有显著性统计学意义(P=0.01和P<0.01);CD34+CD38-KG1α细胞ROS也分别上升了(1.39±0.12)倍和(2.81±0.11)倍,差异也具有统计学意义(P<0.03和P<0.01),并且DS/Cu组比DS组更明显(P=0.00);应用NAC抑制DS/Cu诱导ROS蓄积后,细胞凋亡率由(27.43±1.65)%下降到(12.37±0.85)%(P<0.01)。qRT-PCR结果显示DS及DS/Cu均上调TNF-α、CD40、TNFRSF1B、TNFRSF11B、HRK凋亡相关基因的mRNA水平(P<0.05),且DS/Cu组较DS组上调的更明显(P<0.05),但是予以NAC预处理2 h后,仅TNF-α基因水平依然高表达(P=0.73),而CD40、TNFRSF11B、TNFRSF1B、HRK基因水平均明显下调(P<0.05)。为进一步证实TNF-α作用,分别予以TNF-αm Ab(2μg/m L)或Ig G(2μg/m L)预处理2 h后,TNF-αm Ab+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS相对变化率由(2.78±0.25)倍下降到(1.28±0.17)倍(P=0.00),而Ig G+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS相对变化率无显著性差异(P=0.23),TNF-αm Ab及Ig G组相比空白对照组的ROS水平无显著性差异(P=0.09和P=0.50)。结论 DS/Cu可通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导AML干细胞凋亡。
- 周勇钟文彬陈凯董慧娟闫道广周淑云徐兵
- 关键词：CUROS
- Disulfiram联合Cu通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导白血病干细胞凋亡
- 目的 探讨Disulfiram联合Cu (DS/Cu)诱导急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)细胞凋亡及其相关分子机制.方法 磁珠筛选CD34+CD38-的KG1 α细胞作为A...
- 周勇钟文彬陈凯董慧娟闫道广
- 关键词：CUROS
