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鸡堆型艾美耳球虫Rhomboid增强型核酸疫苗构建及免疫保护作用: 鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫属7种球虫引起的肠道寄生虫疾病，其中堆型艾美耳球虫（Eimeria acervulina）是其主要病原之一。鸡球虫子孢子入侵到肠道上皮细胞并增殖使其严重受损从而导致饲料转化...; 黄艺华; 关键词：堆型艾美耳球虫核酸疫苗抗球虫指数免疫保护

鸡堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶增强型核酸疫苗构建和免疫保护研究: 本试验根据Gen Bank发表的堆型艾美耳球虫(Eimeiria acervulina)乳酸脱氢酶(LDH)基因序列设计引物,成功克隆上海株堆型艾美耳球虫的部分LDH基因,大小为993 bp。构建LDH的原核表达质粒,表...; 黄艺华丛培君黄小丹杨贵君李广兴

鸡堆型艾美尔球虫3-1E抗原表位的生物信息学预测被引量：4: 2015年; 应用生物信息学分析和预测鸡堆型艾美尔球虫3-1E蛋白二级结构和抗原表位,为确定和筛选优势表位,研制安全、高效表位疫苗奠定基础。以克隆获得的鸡堆型艾美尔球虫3-1E蛋白氨基酸一级结构为基础,采用DNAStar软件和生物信息学在线分析程序Prot Param、SOSUI、IEDB、SYFPEITHI等预测3-1E蛋白理化性质和二级结构,并分析其序列跨膜区、可溶性、亲水性、可及性、柔韧性参数以及抗原指数,预测B细胞表位和T细胞表位的可能区域。3-1E蛋白由170个氨基酸组成,分子式C818H1257N213O272S3,分子质量18.5234 ku,理论等电点为4.25,半衰期为10 h;无跨膜区均为膜外区,是一种可溶性蛋白。其二级结构中α螺旋占31.76%,β转角为12.35%。B细胞表位预测区域:44-49、65-67、86-87、111-116;分值较高的T细胞表位区域:52-60、94-102、97-105、154-162、157-165。运用生物信息学方法确定3-1E存在多个抗原表位,对进一步研究3-1E的抗原性和研发优势表位疫苗具有重要意义。; 李广兴丛培君潘龙马玲冯俪黄艺华任玉东黄小丹; 关键词：抗原表位生物信息学

鸡堆型艾美耳球虫基因重组疫苗及其引物和应用: 本发明涉及一种鸡堆型艾美耳球虫基因重组疫苗及其引物和应用。鸡堆型艾美耳球虫基因重组疫苗，其序列如序列表Seq No.1所示。用于构建鸡堆型艾美耳球虫基因重组疫苗的引物对，上引物P1：如序列表Seq No.2所示；下引物P...; 李广兴冯俪黄艺华; 文献传递

鸡堆型艾美耳球虫Hsp90克隆表达及其核酸疫苗的免疫保护作用被引量：2: 2016年; 利用RT-PCR方法从鸡堆型艾美耳球虫(E.acervulina)子孢子中成功克隆热休克蛋白90(Hsp90)基因,并构建其原核和真核表达质粒pET30a-Hsp90和pVAX-Hsp90。重组表达的89 kD可溶蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA和Western-Blot表明,其反应性和特异性良好。真核表达质粒pVAX-Hsp90体外瞬时转染间接免疫荧光检测可见成功表达。雏鸡真核表达质粒免疫后进行攻虫保护试验,结果表明,pVAX-Hsp90组较空载体组及PBS组增重极明显(P<0.01),且肠道病变减轻,OPG减少,抗球虫指数为166.17。综上初步评价了Hsp90核酸疫苗的免疫保护作用,表明Hsp90是一种潜在的鸡球虫保护性抗原。; 冯俪聂思静黄艺华黄小丹蔡皓璠马德星李广兴; 关键词：堆型艾美耳球虫热休克蛋白90 克隆表达核酸疫苗免疫保护

鸡堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶增强型核酸疫苗构建和免疫保护研究: <正>本试验根据Gen Bank发表的堆型艾美耳球虫(Eimeiria acervulina)乳酸脱氢酶(LDH)基因序列设计引物,成功克隆上海株堆型艾美耳球虫的部分LDH基因,大小为993 bp。构建LDH的原核表达质...; 黄艺华丛培君黄小丹杨贵君李广兴; 文献传递

鸡堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶增强型核酸疫苗构建和免疫保护研究: 本试验根据GenBank发表的堆型艾美耳球虫(Eimeiria acervulina)乳酸脱氢酶(LDH)基因序列设计引物,成功克隆上海株堆型艾美耳球虫的部分LDH基因,大小为993bp.构建LDH的原核表达质粒,表达大...; 黄艺华丛培君黄小丹杨贵君李广兴; 关键词：乳酸脱氢酶基因序列免疫保护; 文献传递

鸡产气荚膜梭菌的分离鉴定及药敏试验被引量：5: 2015年; 对哈尔滨市3个鸡场送检疑似鸡坏死性肠炎病例进行了病理剖检和细菌分离,从菌落、菌体的形态、生化特性、PCR鉴定、病理组织学检查和细菌致病性等方面对病原菌进行了鉴定。结果表明,病原菌为厌氧的革兰阳性短杆菌,在含卵黄的TSC培养基上形成周围带白浊环的黑色圆菌落,能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖和紫牛乳;PCR鉴定及致病性试验表明分离的细菌为产气荚膜梭菌,且有致病性。药敏试验显示,分离菌株对青霉素等5种药物高度敏感;对新霉素等4种药物耐药。; 张艳李兰兰黄艺华王莹莹解真真张自强郑晓星黄小丹杨贵君张瑞丽刘思国李广兴; 关键词：鸡坏死性肠炎产气荚膜梭菌药敏试验

鸡堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定被引量：1: 2016年; 为了研究堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的生物学功能及其作为潜在免疫抗原蛋白的可能性,根据Gen Bank上柔嫩艾美耳球虫Rhomboid基因序列(DQ323509.1)设计特异性引物,以堆型艾美耳球虫c DNA为模板PCR扩增包含Rhomboid基因ORF的片段。根据测序结果及抗原表位分析,设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接于p GEX-6P-1原核表达载体成功构建p GEX-Rhomboid表达质粒。将此质粒转入大肠杆菌Rosetta感受态细胞中进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析显示有36 ku的预期蛋白表达。蛋白纯化复性后免疫新西兰大白兔制备兔抗Rhomboid多克隆抗体。ELISA方法检测该多克隆抗体效价达到216,Western-blot及瞬时转染pc DNA-Rhomboid质粒表明,制备的多克隆抗体与堆型艾美耳球虫子孢子目的蛋白和真核质粒瞬时转染BHK21细胞表达蛋白均具有良好的反应性。本试验结果为进一步研究堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的生物学活性奠定了基础。; 黄艺华冯俪刘鹏从培君黄小丹张瑞莉杨贵君李广兴; 关键词：堆型艾美耳球虫原核表达多克隆抗体

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黄艺华