李海斌
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 供职机构:新乡医学院三全学院更多>>
- 发文基金:河南省高校科技创新团队支持计划河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 甘露聚糖结合凝集素抑制肽聚糖刺激THP-1/CD14细胞产生的炎性反应及机制被引量:5
- 2012年
- 目的探讨甘露聚糖结合凝集素(mannan-bindinglectin,MBL)对肽聚糖(peptidogly—can,PGN)刺激佛波酯(PMA)活化的THP-1/CD14细胞产生TNF—α和IL-6影响。方法用PMA活化THP-1/CD14细胞,以不同浓度人MBL预处理2b后再用PGN刺激24h。收集培养上清,以ELISA从蛋白水平分析TNF-α和IL-6的产生。收集细胞提取总RNA,以RT—PCR从转录水平评估TNF—α和IL-6的表达。FACS分析MBL与THP-1/CD14细胞的结合,并进一步分析MBL对PGN结合THP-1/CD14细胞的影响,Western blot分析NF-κB的细胞核移位。结果ELISA检测发现,PGN可刺激PMA活化的各THP-1/CD14细胞分泌TNF-α和IL-6,高浓度MBL(10~20mg/L)可抑制PGN诱导细胞分泌TNF—α和IL-6;RT—PCR分析亦显示,MBL(20mg/L)对PGN诱导的TNF—α和IL-6的mRNA表达有不同程度的抑制作用;流式细胞术检测显示MBL能够与THP-1/CD14细胞以Ca^2+依赖形式结合,PGN可竞争性抑制MBL结合THP-1/CD14细胞。MBL还可通过结合THP-1/CD14竞争性抑制PGN与THP-1/CD14的结合。Western blot分析显示,MBL对PGN诱导的NF—κB细胞核移位有显著的抑制作用。结论MBL通过配体结合抑制PGN诱导的THP-1/CD14细胞产生的细胞反应,提示MBL能够在PGN诱导的炎性反应中起免疫调控作用。
- 王凡平王明永杨建斌赵东方连荣徐素玲邵峰孙瑞利郭庆合李海斌郭继强宋志善
- 关键词:甘露聚糖结合凝集素肽聚糖THP-1
- MBL抑制LPS诱导DC成熟机制的研究被引量:8
- 2013年
- 本研究探讨甘露聚糖结合凝集素(MBL)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)成熟的机制。从健康成人外周血分离单核细胞(Mo),用常规方法体外诱导未成熟DC(imDC),FACS分析MBL与imDC的结合,并进一步分析MBL对LPS结合imDC的影响;ELISA和Western blot分析MBL与可溶性的TLR4胞外段蛋白(sTLR4)结合;Western blot分析NF-κB的细胞核移位。结果表明,在钙离子存在下,MBL能够直接与imDC结合,sTLR4和LPS可竞争性抑制MBL与imDC的结合。Western blot与ELISA分析结果显示,MBL能够以浓度依赖的方式结合sTLR4蛋白。FACS分析结果进一步表明,MBL通过结合imDC竞争性抑制LPS与imDC的结合。Western blot分析结果亦显示,MBL对LPS诱导的NF-κB细胞核移位有显著的抑制作用。结论:MBL可通过结合表达在imDC的TLR4分子竞争性抑制LPS结合imDC,从而抑制LPS诱导imDC成熟,提示MBL能够通过配体结合调控DC分化成熟。本研究为阐明MBL抑制LPS诱导DC成熟的机制提供了较好的实验依据。
- 王凡平王明永郭晓芳石如玲徐素玲马淑君李海斌郭继强杨秀丽
- 关键词:甘露聚糖结合凝集素细菌脂多糖树突状细胞TOLL样受体-4