张二龙
- 作品数：17 被引量：43H指数：4
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生历史地理农业科学更多>>
- DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
- 2022年
- 目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering RNA sequence, siRNA)敲低Dnase2a的表达,采用质粒过表达上调细胞中Dnase2a和Hif1a的表达。采用外源性加入线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)诱导细胞增殖,使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA作为HIF-1α激动剂上调细胞中HIF-1α的表达。采用MTS法检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量PCR法检测Dnase2a的mRNA表达,Western blot法检测DNase 2α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白(cell cycle protein D1,Cyclin D1)的表达。结果 缺氧可诱导RPASMCs增殖,并上调DNase 2α的表达(P<0.05)。siRNA可显著降低RPASMCs中Dnase2a的表达(P<0.05),并显著增强缺氧诱导的RPASMCs增殖(P<0.05),同时显著上调PCNA和Cyclin D1的蛋白表达(P<0.05)。过表达Dnase2a可显著上调RPASMCs中DNase 2α的表达(P<0.05),并显著抑制缺氧诱导RPASMCs增殖(P<0.05)。外源性加入mtDNA可诱导RPASMCs增殖,而过表达Dnase2a可显著抑制mtDNA诱导的RPASMCs增殖(P<0.05)。过表达Hif1a或使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA可显著上调HIF-1α表达,并显著上调DNase 2α的蛋白表达(P<0.05)。结论 DNase 2α可抑制缺氧或线粒体DNA诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,缺氧诱导的DNase 2α表达上调与HIF-1α有关。
- 耿建慧陈建张二龙阳一栋陈德伟吴刚王羽赵文琦高钰琪
- 关键词：线粒体DNA大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧
- 常驻高原部队官兵营养知识-态度-行为及其影响因素的研究被引量：7
- 2017年
- 目的了解高原边防部队官兵的营养知识水平、态度、膳食习惯及其影响因素。方法运用自行设计的营养知识-态度-行为(KAP)问卷对90名驻守高原6个月以上的部队官兵进行调查,问卷现场发放并收回。根据《军队营养调查和评价方法》(GJB 1636A-2016)的要求测量部队官兵身高、体重、上臂围和三头肌皮褶厚度,并计算体重指数(BMI)和上臂肌围值。结果高原部队官兵营养知识水平中等,营养态度较好,营养行为水平中等;营养知识与营养行为呈明显正相关(r=0.283,P=0.003),营养知识与年龄呈明显正相关(r=0.228,P=0.04),营养态度与官兵来源(南北方)呈明显正相关(r=0.339,P=0.035),营养行为与上臂肌围呈明显正相关(r=0.222,P=0.030)。65.6%的官兵希望了解膳食与疾病关系的相关知识,25.6%的官兵在高原有饮酒习惯。结论高原部队官兵营养知识缺乏,一定程度造成其营养行为的不正确,但官兵们改变现有不良饮食现状的态度积极。建议对常驻高原部队官兵进行高原特需营养膳食宣教,以科学地指导特殊环境下官兵的膳食营养行为,提高身体健康水平。
- 刘璐徐刚张二龙李鹏刘显胜陈莉高钰琪
- 关键词：营养调查
- 热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制研究被引量：1
- 2019年
- 目的探讨热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制。方法雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为正常对照(C)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、缺氧(H)组(7 600 m,1 d)、热习服+缺氧(HHA)组(34℃30 d+7 600 m 1 d)。各组处理结束后,取脑组织比较其湿干质量比,对脑组织HE染色、FJB染色后观察病理形态学改变,透射电镜观察脑组织超微结构改变,取血液标本检测血常规、血气分析和血红蛋白氧解离曲线,同时检测脑组织中丙二醛(MDA)含量和热休克蛋白70(HSP70)及水通道蛋白4(AQP4)蛋白的表达。结果与C组(4.50±0.07)相比,H组脑组织湿干质量比(4.62±0.08)显著升高(P<0.05);HHA组脑组织湿干质量比(4.52±0.06)显著低于H组(P<0.05)。与C组相比,H组脑组织HE染色和透射电镜结果显示细胞肿胀,胞质疏松,染色质分布不均匀,核明显固缩、破裂、溶解,细胞空泡化明显,FJB染色提示神经元变性增多;与H组相比,HHA组细胞损伤、神经元变性和凋亡程度显著改善。与C组相比,H组血红蛋白、红细胞计数、红细胞压积和中性粒细胞百分比显著升高,血氧饱和度、血氧分压显著降低(P<0.05);与H组相比,HHA组血红蛋白、红细胞和红细胞压积进一步升高,但中性粒细胞百分比显著降低,血氧饱和度、血氧分压显著升高(P<0.05)。与C组相比,H组氧解离曲线发生右移;与H组相比,HHA组氧解离曲线发生右移。与C组相比,H组脑组织MDA含量和AQP4蛋白表达显著升高(P<0.05);与H组相比,HHA组MDA含量和AQP4蛋白表达显著降低,HSP70蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论热习服可以有效预防大鼠高原脑水肿的发生,其机制与提高氧气供应、减轻氧化应激、改善细胞损伤等有关。
- 柯贤锋何根林董华平吴刚吴刚吴刚徐刚徐刚张二龙陈建
- 关键词：热习服高原脑水肿
- 高原边防驻营区及野外驻训部队军人体格健康状况的研究被引量：5
- 2017年
- 目的调查高原低氧环境对军人身体指标的影响,以及高原驻训期间军人体格指标的变化,为保障人员体格强健提供参考依据。方法根据《军队营养调查与评价方法》(GJB 1636A-2016)和《中国人民解放军战士身体发育测量及评价》(GJB 1102-91)的方法对驻高原4000~4600 m营区及4300 m野外驻训部队官兵进行体格指标的检测,并根据标准对相关结果进行评价。结果与10年前阿里地区驻训部队人员指标相比,其BMI、上臂肌围、皮褶厚度、体脂含量均增加且接近平原值。4000和4600 m海拔两个单位人员的体格指标无显著差异。野外驻训部队人员上臂肌围显著高于驻营区部队,且BMI、皮褶厚度和体脂含量显著低于驻营区部队。与驻营区部队相比,驻训部队BMI和上臂肌围的构成比无显著差异,而体脂含量偏低的人员比例显著高于驻营区部队,体脂含量正常和偏胖人员比例显著低于驻营区部队。结论驻高原地区军人体格指标不受海拔影响,而随着营养膳食保障力量的提高,军人身体指标得到改善,体内蛋白质和脂肪储备增加。野外驻训部队与驻营区部队军人相比,其肌肉含量更高,体脂更低,体格更健硕。
- 刘璐徐刚张二龙陈莉李鹏刘显胜高钰琪
- 关键词：军事人员体成分
- 缺氧诱导线粒体DNA释放后激活cGAS-STING通路促进肺动脉平滑肌细胞增殖被引量：2
- 2022年
- 目的探究线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)释放在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary arterial smooth muscle cells,RPASMCs)增殖中的作用及可能机制。方法①1%O_(2)缺氧处理RPASMCs分3组(n=3):常氧组、缺氧24 h组、缺氧48 h组。②环孢素A(CsA)抑制线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)分为3组(n=3):常氧组、缺氧48 h组、缺氧48 h+CsA处理组。③siRNA敲低干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)表达分为3组(n=3):常氧+NC组、缺氧48 h+NC组、缺氧48 h+si-STING组。④采用CCK-8检测细胞增殖,RT-qPCR、Western blot检测环状GMP-AMP合酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)、STING、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的基因与蛋白表达,qPCR检测细胞质mtDNA释放,ELISA检测细胞培养上清中CXC趋化因子配体10(C-X-C motif chemokine ligand 10,CXCL10)水平。结果缺氧可诱导RPASMCs释放mtDNA(P<0.01),显著上调cGAS、STING、PCNA的表达(P<0.05),并增强CXCL10的分泌(P<0.01),进而促进RPASMCs增殖(0.44±0.02 vs 0.72±0.03)(P<0.05)。抑制MPTP可阻断mtDNA释放(P<0.01),显著下调cGAS、STING、PCNA的表达(P<0.01),降低CXCL10的分泌水平(P<0.01),并显著抑制缺氧诱导的RPASMCs增殖(0.74±0.12 vs 0.43±0.06)(P<0.01)。敲低STING可显著下调PCNA的表达(P<0.05),降低CXCL10的分泌水平(P<0.01),并显著抑制缺氧诱导的RPASMCs增殖(0.68±0.03 vs 0.58±0.01)(P<0.01)。结论缺氧可诱导平滑肌细胞释放mtDNA,介导缺氧诱导的平滑肌细胞增殖,其机制可能与cGAS-STING通路的激活有关。
- 韦汉南陈德伟张二龙高钰琪
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞缺氧
- TLR9-JNK信号通路调控缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖被引量：4
- 2021年
- 目的研究Toll样受体-9(toll-like receptor 9,TLR9)在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells,RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法采用MTT、Western blot、PCR法检测RPASMCs的相对增殖水平、蛋白表达水平、mRNA转录水平。①3%O_(2),36 h处理RPASMCs,构建缺氧诱导RPASMCs增殖的细胞模型,检测细胞相对增殖水平、TLR9、磷酸化c-jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun N-terminal kinase,p-JNK)蛋白表达水平。②缺氧条件下分别使用小干扰RNA序列(small interfering RNA sequence,siRNA)或20μmol/L TLR9激动剂ODN 1826敲低或活化TLR9,检测RPASMCs的细胞增殖水平和c-jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平。③缺氧时使用5μmol/L JNK抑制剂SP600125处理RPASMCs,检测缺氧条件下细胞相对增殖水平。④缺氧时复合使用20μmol/L TLR9激动剂ODN 1826和5μmol/L JNK抑制剂SP600125处理RPASMCs,检测RPASMCs的JNK磷酸化水平和相对增殖水平。结果缺氧组RPASMCs的相对增殖水平[(1.30±0.07),P<0.01]以及TLR9蛋白水平[(1.70±0.22),P<0.05]和JNK磷酸化[(1.83±0.18),P<0.01]都显著高于常氧组。敲低TLR9显著抑制缺氧诱导的RPASMC增殖[(0.64±0.09),P<0.01]并减少JNK磷酸化[(0.49±0.01),P<0.001]。TLR9激动剂显著促进RPASMCs增殖[(2.01±0.08),P<0.001]且增加JNK的磷酸化[(2.11±0.33),P<0.01]。JNK抑制剂抑制RPASMCs增殖[(0.70±0.06),P<0.05]。与缺氧+TLR9激动剂组相比,缺氧+TLR9激动剂+JNK抑制剂组RPASMCs JNK磷酸化[(0.82±0.14)vs(1.59±0.30),P<0.001]和相对增殖水平[(1.08±0.05)vs(1.35±0.02),P<0.001]都显著降低。结论缺氧时TLR9通过激活JNK通路促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。
- 吴启建张二龙孙滨达徐刚黄缄高钰琪
- 关键词：TOLL样受体-9大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧
- 七甲川花菁类荧光小分子IR-780对肿瘤细胞的靶向特性及机制研究
- 研究背景 肿瘤作为严重威胁人类健康的重大疾病之一,历年来一直是人类医学研究中的重点和难点。尽管近年来关于肿瘤的生物学基础和临床治疗研究取得了显著的进展,但是由于仍然缺乏高特异性的早期诊断方法和有效的治疗措施,当前肿瘤病...
- 张二龙
- 关键词：恶性肿瘤靶向治疗近红外荧光成像
- 文献传递
- 7种不同组织来源细胞缺氧损伤效应评价被引量：2
- 2019年
- 目的观察缺氧条件下7种不同类型细胞损伤程度,筛选对缺氧损伤敏感的细胞模型。方法选择CCD 841 CoN、GES-1、HUVEC、HEB、HEK-293、HBE和L02等7种不同组织来源的细胞,利用低氧工作站构建不同缺氧浓度(5%O_2和1%O_2)细胞缺氧模型,使用CCK-8和LDH方法检测细胞增殖及损伤情况。并用红景天(0.625μmol/L、2.5 mmol/L)和丁苯酞(1、2μmol/L)于缺氧开始时处理细胞,观察是否可改善缺氧细胞损伤。结果与21%O_2相比,1%O_2处理24 h时,HEB细胞增殖能力显著降低(P<0.05);与21%O_2相比,5%O_2与1%O_2处理24 h HEB、HUVEC、HBE、HEK-293、CCD 841 CoN、GES-1和L02细胞其上清中LDH酶活力均显著升高(P<0.05,P<0.01);在HEB细胞中,红景天(2.5 mmol/L)和丁苯酞(1μmol/L)处理可显著逆转低氧诱导的细胞增殖和细胞活力降低(P<0.05);红景天(2.5 mmol/L)和丁苯酞(1μmol/L)处理可显著逆转低氧诱导的LDH酶活力升高(P<0.05,P<0.01)。结论 HEB细胞对缺氧最为敏感,是较好的抗缺氧损伤药物效应研究细胞的模型。
- 冯岚陈德伟高文祥陈建徐刚鄂国基吴庆孙滨达何姝张二龙高钰琪
- 关键词：缺氧组织细胞细胞增殖LDH
- Nogo-B/Nogo-B receptor在低氧肺血管重构和逆转中的作用及机制研究
- 目的：以细胞增殖、凋亡失衡,及细胞外基质沉积为特征的肺血管重构是低氧性肺动脉高压发生的中心环节.有关低氧引起肺血管重构及复氧后的逆转机制尚不清楚.Nogo-B/Nogo-B receptor在调节细胞增殖、凋亡中具有重要...
- 阳一栋徐刚冯岚张二龙高钰琪
- 关键词：凋亡
- 高海拔地区驻营区及野外驻训士兵头发矿物元素含量分析
- 2017年
- 目的研究分析常驻高海拔地区士兵在驻营区及野外驻训期间其头发中矿物元素含量的变化。方法采用称量法调查海拔4600m、4030m、3800m高原驻营区士兵膳食中Zn、Fe、Cu、Ca、Mg和Mn等元素的摄入量,并根据《军人营养素供给量》和《中国居民膳食营养参考摄入量》进行评价。采用火焰原子吸收光谱法检测上述驻营区士兵以及海拔4300m野外驻训士兵头发中Zn、Fe、Cu、Ca、Mg、Mn和Cr的含量。结果高原驻营区部队士兵膳食Fe、Cu、Mg和Mn的摄入量充足,分别达到标准的103.7%、275.0%、81.1%和162.2%,而膳食Ca和Zn的摄入量不足,仅为军标的69.5%和77.8%。不同海拔驻营区士兵头发中Zn、Fe、Cu、Ca、Mg、Mn和Cr的含量差异无统计学意义。驻营区士兵头发中Fe和Zn的含量为边缘缺乏,Cu、Ca、Mg、Mn和Cr 5个元素的含量为充足。野外驻训士兵头发中Fe和Zn的含量为边缘缺乏,Mg的含量为中度缺乏,Cu、Ca、Mn和Cr 4个元素的含量为充足;野外驻训士兵头发中Mg的含量明显低于驻营区士兵(P<0.001)。结论长期处于高原低氧环境下,机体对Zn和Fe的需要量增加,而膳食Zn和Fe的摄入量还不能满足机体需求。野外驻训士兵Mg缺乏,应增加蔬菜摄入,必要时服用营养补充剂。
- 刘璐徐刚张二龙李鹏鄂国基高钰琪
- 关键词：矿物元素
