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一种多功能微生物培养装置: 本实用新型涉及一种多功能微生物培养装置，属于微生物培养设备应用领域。包括罐体，所述罐体上端设置有进料口，进料口上设置有端盖，所述罐体底部设置有固定板，所述固定板和支撑板连接，所述支撑板通过螺栓和固定板连接，所述支撑板上连...; 孟冬丽石如玲张紫阳孟庆杰武辉王新杨莹丽于亚楠; 文献传递

基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞相关基因功能方法的建立: 2016年; 目的建立一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞（NSCs）相关基因功能的方法。方法 RT-PCR检测鸡胚发育不同时期脊髓NSCs表面标志物;在鸡胚胚龄（E）E2.5~E3时,利用活体电转基因技术将p CAGGSGFP质粒转染到鸡胚脊髓,E6时体视荧光显微镜下筛选绿色荧光蛋白（GFP）阳性胚胎,每组至少取材5个;通过脊髓横切及open-book技术观察神经纤维投射情况;普通光学显微镜下剥离出3~5条脊髓,经胰蛋白酶消化、离心后,无血清NSCs培养基重悬获得细胞铺板,于37℃、5%CO_2细胞培养箱内培养,定时观察GFP阳性脊髓NSCs的形态变化。结果 RT-PCR结果表明,鸡胚脊髓中阳性表达NSCs表面标志物;随后的脊髓横切及open-book结果表明,GFP阳性转染侧的神经纤维能穿过底板,投射到脊髓对侧;而脊髓NSCs体外培养结果显示,GFP标记的脊髓细胞具有典型的NSCs形态,继续培养后有明显突起产生。结论本实验成功建立了一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞相关基因功能的方法。; 于亚楠刘彦礼杨慈清张必超徐振平林俊堂; 关键词：脊髓神经干细胞基因功能鸡胚

鸡胚发育过程中R-cadherin和Pax6对脊髓连合纤维投射的影响: R-cadherin和Pax6在中枢神经系统发育中扮演着重要角色。R-cadherin作为经典钙黏蛋白家族中的I型钙黏蛋白，在中枢神经系统发育过程中，影响神经元定位调控、轴突路径选择及突触连接。Pax6是一类重要的转录调...; 于亚楠; 关键词：鸡胚发育

两种真核启动子体内外转录活性比较研究被引量：1: 2015年; 启动子作为基因工程表达载体的核心组成部分,在很大程度上决定了目的基因的转录活性。为筛选出一个转录活性较高的真核启动子,以目的蛋白与增强型绿色荧光蛋白融合表达的形式,在体内外检测CMV和CAG两种真核启动子的转录活性。首先,通过常规分子生物学技术将神经钙黏着蛋白(N-cad)克隆到p CAG-MCS-EGFP质粒中(携带CAG启动子),菌落PCR、双酶切及测序验证;与p EGFP-N-cad质粒(携带CMV启动子)一起通过磷酸钙法分别转染HEK293T细胞,比较两种质粒在体外细胞水平转染目的基因效率;随后,通过已建立的鸡胚脊髓活体电转方法比较两种质粒在活体鸡胚脊髓内转录目的基因效率,冷冻切片后进行荧光强度观察;而体内外实验均应用常规Western blot和RT-PCR技术验证目的基因N-cad在蛋白及基因水平上的表达。荧光显微镜观察结果表明,CMV启动子仅能在体外细胞水平上行使其转录活性,而CAG启动子可在体内体外高效行使其转录活性,进一步的Western blot和RT-PCR结果与荧光观察结果一致。该研究结果可为体内研究目的基因功能时的载体构建提供借鉴。; 刘彦礼于亚楠杨坤林俊堂; 关键词：启动子转录活性增强型绿色荧光蛋白

视网膜钙黏蛋白在中枢神经系统发育中的作用研究现状被引量：1: 2015年; 钙黏蛋白通过介导神经系统中细胞间黏附,影响神经细胞的分选、迁移和定位以及轴突的生长和路径选择,在中枢神经系统发育中扮演重要角色。视网膜钙黏蛋白因最早在视网膜中被发现而命名,其隶属于经典钙黏蛋白家族中的I型钙黏蛋白,与其他家族成员相比,视网膜钙黏蛋白在中枢神经系统发育过程中的功能,如神经元定位调控、轴突路径选择及突触连接等在国内外尚缺乏较深入的研究。因此,本研究就视网膜钙黏蛋白的结构及其在中枢神经系统中的作用作一综述,以期为研究与之相关的人类神经性疾病提供理论依据。; 于亚楠刘彦礼徐振平林俊堂; 关键词：钙黏蛋白中枢神经系统神经疾病

三种经典钙黏蛋白分子在鸡胚脊髓发育过程中的表达模式: 2015年; 目的：揭示神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7在鸡胚脊髓发育过程中的时空表达模式。方法：取鸡胚正常发育过程 E3、E4、E5、E6、E8和 E10各时期的脊髓,原位杂交法检测神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7在鸡胚脊髓发育过程中的时空表达模式。结果：在 E3~E6时期,神经钙黏蛋白主要在神经上皮层、生皮节、脊索、顶板、底板以及背根神经节区域表达,E8~E10时期,其 mRNA 信号主要在灰质区和背根神经节；在 E3~E5时期,钙黏蛋白6主要在生皮节、顶板和底板表达,之后在顶板和底板的表达均减弱,主要在侧运动柱表达；E3~E6时期,钙黏蛋白7主要在生皮节、底板、基板背部、运动柱、背根和腹根强烈表达,E8之后其表达主要集中在灰质区和腹根。结论：神经钙黏蛋白、钙黏蛋白6与钙黏蛋白7不同的表达模式预示着它们在脊髓及其周围组织发育过程中扮演不同角色。; 李晗杨慈清乔梁张必超于亚楠林俊堂; 关键词：原位杂交

双色荧光示踪鸡胚脊髓两侧连合纤维投射研究方法的建立被引量：2: 2016年; 目的建立1种双色荧光示踪鸡胚脊髓两侧连合纤维投射的实验方法。方法鸡胚孵育至胚龄2.5-3d,通过鸡胚活体原位电转基因技术将携带有报告基因绿色荧光蛋白（GFP）的质粒（p CAGGS-GFP）准确注射到鸡胚脊髓腔,实现定时、定位活体电转基因。转染后继续孵育至6d,取GFP阳性表达的胚胎,部分做脊髓横向切片,部分利用open-book技术将脊髓展开观察连合纤维的发育情况,每组至少取3个标本。其后在脊髓非转染侧连合神经元所在之处,点状注射Di I乙醇溶液,封片后于4℃避光孵育3d,在荧光显微镜下观察脊髓连合纤维投射情况。结果脊髓横切及open-book结果显示,鸡胚脊髓GFP阳性转染侧的神经元轴突穿过底板投射到脊髓对侧;同时在open-book结果中还可观察到,转染侧轴突穿过底板后分别沿腹索和外侧索向头尾部投射;Di I标记的非转染侧连合神经元轴突也同样穿过底板投射到对侧,并在侧索白质内延伸。结论本实验成功建立了1种双色荧光示踪鸡胚脊髓两侧连合纤维投射的研究方法,为研究脊髓神经发育提供技术保障。; 于亚楠刘彦礼杨慈清张必超徐振平林俊堂; 关键词：胚胎脊髓 DI

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于亚楠