唐丽华
- 作品数：16 被引量：105H指数：8
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鼠伤寒沙门氏菌SL7207 SifA^-突变株的构建和鉴定被引量：12
- 2005年
- 鼠伤寒沙门氏菌SifA- 基因突变株的特点是能进入真核细胞的胞液。利用P2 2噬菌体转导技术构建了鼠伤寒沙门氏菌疫苗株SL72 0 7的SifA- 突变株SL72 0 7 ,该突变株与SL72 0 7有着相似的体外生长曲线和细胞侵袭力,SL72 0 7 在MDCK上皮细胞中的增殖能力增强,但在RAW2 6 4 7巨噬细胞中的生存能力减弱。小鼠毒力试验显示SL72 0 7 在BALB c小鼠体内毒力下降。仅SL72 0 7 在体外可向RAW2 6 4 7巨噬细胞递送真核表达质粒。SL72 0 7
- 张晓明焦新安唐丽华潘志明殷月兰刘秀梵
- 关键词：疫苗载体
- 沙门氏菌感染的免疫应答被引量：3
- 2005年
- 巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞等吞噬性细胞在对沙门氏菌感染的天然免疫应答过程中发挥着重要作用。在细菌感染的早期,这些细胞的数量增多,控制细菌的繁殖,并分泌产生细胞因子和趋化因子。感染沙门氏菌后,自然杀伤细胞、自然杀伤T细胞和TCRαβT细胞也会对感染发生迅速反应,且是γ干扰素的早期细胞来源。文章着重探讨了沙门氏菌感染天然免疫应答的细胞分子机理,为沙门氏菌病的预防控制提供新认识。
- 潘志明黄金林唐丽华焦新安
- 关键词：沙门氏菌天然免疫应答
- 携带新城疫病毒DNA疫苗鼠伤寒沙门氏菌的安全性和免疫效力试验
- 将重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)分别以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-F)对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重.将重组菌SL7207(pVAX1-F)分别以...
- 潘志明焦新安黄金林唐丽华张辉张成全刘秀梵
- 关键词：减毒沙门氏菌DNA疫苗新城疫病毒安全性免疫效力
- 文献传递
- 携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性被引量：9
- 2007年
- 根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。
- 潘志明焦新安唐丽华黄金林张辉张晓明张小荣刘秀梵
- 关键词：减毒沙门氏菌DNA疫苗新城疫病毒免疫原性
- 口服重组沙门菌诱导的免疫应答动态分析被引量：4
- 2007年
- 以融合表达绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)和OVA、LCMV NP CD8^+T细胞表位的重组减毒沙门菌SL7207(ptG2F)为免疫原,经口服途径接种BALB/c小鼠,每2周加强免疫1次,分别于第2次、第3次、第4次、第5次免疫后,以ELISPOT法分别测定免疫小鼠派伊尔氏结细胞中特异性针对OVA和LCMV NP CD8^+T细胞表位的IFN-γ分泌细胞和IL-4分泌细胞。同时,运用ELISA分别检测血清、肠黏膜中的GFP特异性抗体,分析了口服重组减毒沙门菌诱导的特异性免疫应答动态规律。实验表明SL7207(ptG2F)口服免疫BALB/c小鼠后,诱导产生了LCMV NP CD8^+T细胞表位(H-2~d)特异的细胞免疫应答。在第2次免疫后,即可检测到特异性IFN-γ分泌细胞和IL-4分泌细胞;在第3次免疫后,IFN-γ分泌细胞数量明显高于IL-4分泌细胞数。然而,在第4、5次免疫后,IFN-γ分泌细胞数和IL-4分泌细胞数相当,未见明显变化。试验中未能检测到针对OVA CD8^+T细胞表位(H-2~b)的细胞免疫应答。运用ELISA方法检测到SL7207(ptG2F)、SL7207(ptGFP)免疫组GFP特异性IgG和IgA抗体,与对照组相比较,差异显著(P<0.05)。结果表明重组减毒沙门菌口服免疫可以有效运送外源抗原至宿主免疫系统,并诱导产生特异性细胞免疫应答和黏膜免疫应答。
- 张辉焦新安潘志明胡茂志唐丽华
- 关键词：减毒沙门菌ELISPOT黏膜免疫
- 应用PCR快速检测单核细胞增生症李斯特菌的研究被引量：13
- 2003年
- 用聚合酶链式反应(PCR)扩增hly基因,检测单核细胞增生症李斯特菌的纯培养物及其模拟污染的生猪肉、水和牛奶。41株单核细胞增生症李斯特菌的PCR结果呈阳性,而其他李斯特菌,包括英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌、西尔李斯特菌、威儿李斯特菌和格氏李斯特菌以及非李斯特菌均未出现特异性片段。这表明所扩增的hly基因3′末段850bp的DNA片段对单核细胞增生症李斯特菌具有较高的特异性。PCR对单核细胞增生症李斯特菌纯培养物的检测低限达10~5cfu·mL^(-1),对16hLEB增菌培养的模拟污染生猪肉、水和牛奶的增菌培养液用PCR捡测,结果检测生猪肉低限达400cfu·kg^(-1)、水和牛奶为400cfu·L^(-1)。整个检测过程只需24h。这表明PCR法对单核细胞增生症李斯特菌的鉴定具有特异性强、灵敏度高、速度快和易操作等优点。
- 周晓辉焦新安邓云飞巢国祥殷月兰唐丽华谈娟
- 关键词：聚合酶链式反应PCR引物扩增条件
- 运送禽流感病毒DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌的实验室免疫效力研究
- 本文将带H5N1型禽流感病毒HA基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pcDNA3.1-HA)、SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG...
- 唐丽华潘志明程宁宁张晓明黄金林胡青海焦新安
- 关键词：减毒沙门氏菌禽流感病毒DNA疫苗禽流感
- 文献传递
- 作为疫苗和疫苗载体的减毒细菌被引量：11
- 2005年
- 减毒细菌不但能作为疫苗,而且已被证实是理想的疫苗载体,尤其是在研制基因工程疫苗方面显现了独特的优越性,减毒细菌作为载体可激发强烈的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫。主要就沙门氏菌、志贺氏菌、李斯特菌和BCG等细菌作为疫苗和疫苗载体的研究进展进行综述,以期为新型疫苗的研制奠定基础。
- 潘志明唐丽华黄金林焦新安
- 关键词：疫苗
- 运送禽流感病毒DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌的实验室免疫效力研究
- 将带H5N1型禽流感病毒HA基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA)、 SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pcDNA3．1-HA)、SL7207(pcDNA3．1-HA-CpG)...
- 唐丽华潘志明程宁宁张晓明黄金林胡青海焦新安
- 关键词：减毒沙门氏菌禽流感病毒DNA疫苗
- 文献传递
- 树突状细胞在沙门氏菌感染获得性免疫中的作用
- 对于沙门氏菌感染的免疫反应是天然免疫系统和获得性免疫系统共同发挥作用的结果.天然免疫系统中的许多成分以协调的方式来防御沙门氏菌的感染.其中发挥作用的细胞有吞噬性和非吞噬性的两种细胞组分,如中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细...
- 潘志明焦新安黄金林唐丽华刘秀梵
- 关键词：树突状细胞沙门氏菌感染免疫反应免疫应答
- 文献传递
