利用微波辅助提取灰树花菌丝体多糖。以粗多糖的得率为考察指标,以时间、微波功率、液料比为考察因素,通过单因素实验和正交实验,确定微波辅助提取灰树花菌丝体多糖的最佳实验条件;采用硫酸-苯酚法对多糖含量进行了测定。微波辅助提取灰树花多糖正交实验优化结果为:时间6 m in,功率:200 W,料液比150:1,多糖得率为13.1%。微波辅助提取灰树花多糖与传统水提取法相比可缩短时间,提高粗糖产率,是一种有前景的多糖辅助提取方法。
目的:检测乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)对HepG2肝癌细胞迁移及β-catenin表达的影响,为深入研究HBXIP与肝细胞癌发生发展的相关性奠定基础。方法:以建立的稳定高表达HBXIP的HepG2细胞系为实验材料,Transwell实验观察HBXIP高表达对细胞迁移能力的影响;明胶酶谱分析法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性;免疫印迹实验检测MMP-9、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、p-GSK-3β、β-catenin及p-β-catenin的表达。结果:Transwell实验结果表明,HBXIP能够促进HepG2细胞的迁移能力;高表达HBXIP的肝癌细胞中,MMP-9的活性及蛋白表达水平均升高;免疫印迹结果表明HBXIP促进了β-catenin的表达,并抑制β-catenin的磷酸化;同时促进GSK-3β(Ser9)的磷酸化。结论:HBXIP与肿瘤细胞的迁移密切相关,HBXIP高表达促进肝癌细胞的迁移可能是其调控GSK-3β/β-catenin表达的结果。
