赵杰
- 作品数：15 被引量：42H指数：5
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家级星火计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 牛瘤胃液中纤维素分解菌分离、鉴定及降解效果测定
- 2022年
- 从牛瘤胃液中分离筛选出高效纤维素降解细菌,用于玉米秸秆发酵处理。通过刚果红染色、滤纸分解速率和酶活性的测定与分析筛选菌株;形态学结合16S rDNA鉴定菌株;优化高产纤维素酶菌株的产酶发酵条件,并进行秸秆发酵处理,测定还原糖和可溶性蛋白质含量的变化。结果表明:初筛出6株具有纤维素分解能力的细菌,4株为G-菌,2株为G+菌,可分为3个属5个种,包括2株寡养单胞菌属、2株鞘氨醇杆菌属和2株短稳杆菌属;复筛得出1、2号为高产纤维素酶菌株,其最适产酶培养温度均为37℃,初始pH值分别为6.0和5.5,且均能提高玉米秸秆中还原糖和可溶性蛋白质含量,第3天达到高峰期。综合而言,从牛瘤胃液中分离筛选出6株纤维素分解细菌,其中2株高产纤维素酶菌株可用于降解玉米秸秆。
- 陈佳雯赵杰徐静茹汪洋李璐鑫曹利冉梦冯士彬李玉吴金节王希春
- 关键词：秸秆发酵
- 鸡毒支原体黏附因子MGC2的克隆及原核表达被引量：1
- 2015年
- 为表达鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)黏附基因MGC2蛋白,探索其作为诊断抗原的可能性,参考Gen Bank登录的鸡毒支原体F株MGC2基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对鸡毒支原体MGC2基因的1个位点进行定点突变,将此突变基因克隆到表达载体p ET-30a(+)中,具有正确阅读框架的重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后采用SDS-PAGE和Western blot检测。结果表明,PCR扩增的目的基因大小约为918 bp;SDS-PAGE检测重组蛋白相对分子质量约为39.6 ku;Western blot检测表明重组蛋白具有鸡毒支原体反应原性。该研究结果为鸡毒支原体抗体ELISA检测方法的建立奠定基础。
- 徐建义赵杰隋兆峰迟灵芝杨明彩韩春杨
- 关键词：鸡毒支原体原核表达WESTERNBLOT
- 芦丁对围产期湖羊瘤胃发酵、瘤胃菌群结构及抗氧化性能的影响
- 2023年
- 旨在研究饲粮中添加芦丁对围产期湖羊瘤胃发酵、瘤胃菌群结构及抗氧化性能的影响。选择30只围产期相近、体重[(62.90±2.80)kg]相似的24月龄围产期湖羊,随机分为3组,每组10个重复。芦丁在基础饲粮中的添加剂量分别为0 mg·kg^(-1)BW(CON组)、50 mg·kg^(-1)BW(Ⅰ组)和100 mg·kg^(-1)BW(Ⅱ组)。预试期7 d,正式试验期56 d。产后28 d晨饲前,每组随机选取5只羊屠宰,检测瘤胃组织形态、瘤胃发酵参数、抗氧化性能及瘤胃菌群结构。结果发现:1)各组围产期湖羊日粗饲料采食量、日干物质采食量和日中性洗涤纤维采食量差异均不显著(P>0.05);2个试验组围产期湖羊的产后体重、末体重(FBW)和平均日增重(ADG)均高于CON组,但差异不显著(P>0.05),各组产羔数量及羔羊体重无显著变化(P>0.05);2)Ⅱ组围产期湖羊瘤胃乳头长度显著高于CON组(P<0.05);3)Ⅰ组瘤胃液中谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性显著高于CON组(P<0.05);4)与CON组相比,Ⅱ组围产期湖羊瘤胃液中菌体蛋白、原虫蛋白、乙酸、丙酸、戊酸和总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度显著升高(P<0.05),微生物蛋白浓度极显著升高(P<0.01);5)CON组和Ⅰ组围产期湖羊瘤胃细菌第一优势菌门为厚壁菌门,第二优势菌门为拟杆菌门;Ⅱ组第一优势菌门为拟杆菌门,第二优势菌门为厚壁菌门。与CON组相比,Ⅱ组厚壁菌门和螺旋体门相对丰度均显著降低(P<0.05),拟杆菌门相对丰度显著升高(P<0.05)。各组围产期湖羊瘤胃细菌的优势菌属均为普雷沃菌属。与CON组相比,Ⅰ组普雷沃菌属相对丰度显著升高(P<0.05);Ⅱ组普雷沃菌属相对丰度极显著升高(P<0.01),Ⅱ组密螺旋体属相对丰度显著降低(P<0.05)。综上表明,芦丁对围产期湖羊瘤胃组织形态有改善作用,能够提高瘤胃抗氧化能力,改变瘤胃菌群结构,有效改善围产期湖羊瘤胃发酵功能。
- 熊程坤张道亮杨悦丁红研赵杰李玉王希春冯士彬赵畅汤继顺吴金节
- 关键词：芦丁瘤胃发酵
- ZEA与DON单一及联合染毒致仔猪睾丸支持细胞凋亡的影响被引量：3
- 2020年
- 为研究玉米赤霉烯酮(ZEA)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)单一与联合染毒对仔猪睾丸支持细胞凋亡的作用机理,以10μg·mL^-1 ZEA与0.2μg·mL^-1 DON对睾丸支持细胞单一与联合染毒处理24 h,采用CCK-8法检测细胞活率,电镜观察细胞超微结构变化,流式细胞术、免疫荧光检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,荧光定量PCR检测凋亡相关基因表达量。结果显示,ZEA与DON单一及联合染毒均可导致仔猪睾丸支持细胞活率下降,细胞超微结构损伤,凋亡率升高,并下调线粒体相关抗凋亡基因Bcl-2表达,上调促凋亡基因Bax、Bid以及下游凋亡相关基因Caspase-3与Caspase-9的表达量,且联合作用大于单一作用。本试验结果表明,ZEA与DON可通过线粒体途径诱导仔猪睾丸支持细胞凋亡,且联合毒性大于单一毒性,表现为亚加性效应。
- 朱雷贾北平曹利徐静茹赵杰冯士彬李玉吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇睾丸支持细胞
- 山东地区发生呼吸道性疾病的肉鸡场鸡毒支原体的分离鉴定被引量：7
- 2016年
- 为了解山东省发生呼吸道疾病的肉鸡场鸡毒支原体的感染情况,2013年至2014年从山东地区发生呼吸道疾病的商品肉鸡场采集发病鸡,记录其临床表现（发病特点、临床症状和病理变化）,并进行鸡毒支原体分离鉴定。对符合鸡毒支原体培养特性的分离株通过PCR扩增和测序加以鉴定,共分离鉴定出36株鸡毒支原体。3~20日龄肉鸡采集23场,分离出3株鸡毒支原体,分离阳性的样品疑来自鸡毒支原体单纯感染的病例;21~40日龄肉鸡采集78场,分离出33株鸡毒支原体,分离阳性的样品均来自混合感染病例。
- 隋兆峰徐建义迟灵芝赵杰杨明彩张侃吉
- 关键词：肉鸡呼吸道疾病鸡毒支原体
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导IPEC-J2细胞焦亡的内质网应激通路机制
- 2022年
- [目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯(DON)诱导仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)焦亡的分子机制。[方法]以500 ng·mL^(-1)DON和1μmol·mL^(-1)4-苯基丁酸(4-PBA,内质网应激抑制剂)单一及联合染毒IPEC-J2细胞24 h。采用CCK-8测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞生长状况;透射电镜观察细胞超微结构;Western blot和RT-qPCR测内质网应激通路和细胞焦亡关键分子的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平;流式细胞仪测定活性氧(ROS)含量。[结果]与对照组相比,DON组细胞缝隙变宽、细胞密度降低、超微结构被破坏,ROS、丙二醛(MDA)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)含量极显著升高(P<0.01),葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、内质网核信号转导蛋白1(IRE1)、转录激活因子6(ATF6)、诱导消皮素D(GSDMD)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)mRNA相对表达水平极显著升高(P<0.01),GRP78、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、ATF6、IRE1、GSDMD和Caspase-1蛋白相对表达水平极显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性极显著下降(P<0.01)。与DON组相比,DON和4-PBA联合处理组的细胞数量增多,细胞缝隙变小,细胞器形态正常,ROS、MDA、IL-1β、IL-18含量以及ATF6、Caspase-1的mRNA相对表达水平极显著下降(P<0.01),GSDMD、GRP78和IRE1的mRNA相对表达水平显著下降(P<0.05),GRP78、CHOP、ATF6、IRE1、GSDMD和Caspase-1的蛋白相对表达水平极显著降低(P<0.01),SOD、GSH-Px活性极显著上升(P<0.01)。[结论]DON可通过激活内质网应激通路诱导IPEC-J2细胞焦亡。
- 马立金鑫林佳佳陈佳雯海思娆裘知王正汪洋赵杰李玉冯士彬吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇内质网应激
- 鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及应用被引量：12
- 2015年
- 为了建立鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)套式PCR检测方法并初步将其应用于临床检测,对目前常用的5对引物(gapA-F/gapA-R、16SrRNA-F/16SrRNA-R、mgc2-F1/mgc2-R1、mgc2-F2/mgc2-R2、LP-F/LP-R)检测MG的灵敏度进行了比较,从中选出灵敏度较强的引物建立套式PCR检测方法,同时进行了特异性、敏感性及临床检测试验。结果表明,以mgc2基因设计的引物灵敏度最高,能检测出的MG的最低质量浓度为57.6pg/μL,用此引物建立的套式PCR能够扩增的基因片段的大小为300bp,与GenBank中收录的相关序列的同源性为98%,而与大肠杆菌、沙门菌、鸡滑液囊支原体均无交叉反应,能够检测出DNA的最小质量浓度为0.18fg/μL。通过对山东地区疑似MG的50只病死鸡进行检测,阳性检出率为80%。本研究建立的鸡毒支原体套式PCR具有敏感性高、特异性强等优点,可用于MG的临床诊断和分子流行病学调查。
- 赵杰徐建义隋兆峰迟灵芝杨明彩沈美艳韩春杨
- 关键词：鸡毒支原体套式PCR
- 基于线粒体途径激活JNK通路探究ZEA诱导猪ESCs凋亡的分子机制
- 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)是农产品及饲料中检出率较高的一种类雌激素样霉菌毒素。研究表明,ZEA具有生殖毒性,可损害后备母猪和成年母猪的生殖系统,导致生育能力下降,严重影响了养猪业的健康发展。目前,国内...
- 陈佳雯赵杰马立海思娆冯士彬李玉赵畅王希春
- 关键词：玉米赤霉烯酮JNK信号通路
- 玉米赤霉烯酮与脱氧雪腐镰刀菌烯醇联合染毒对雄性小鼠生殖毒性的影响及茶多酚的缓解作用被引量：5
- 2020年
- 本试验旨在研究茶多酚对玉米赤霉烯酮(ZEN)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合染毒小鼠生殖毒性损伤的缓解作用。选取8周龄雄性昆明小鼠75只[体重(40±5)g],随机分成5组,每组分别灌服生理盐水(对照组)、200 mg/kg茶多酚(Ⅰ组)、1 mg/kg ZEN+0.5 mg/kg DON(Ⅱ组)、100 mg/kg茶多酚+1 mg/kg ZEN+0.5 mg/kg DON(Ⅲ组)和200 mg/kg茶多酚+1 mg/kg ZEN+0.5 mg/kg DON(Ⅳ组),每组15只。试验期28 d。在试验第1、14、28天,从每组随机抽取5只小鼠称重采样,检测小鼠精子质量、睾丸脏器系数、睾丸组织标志酶活性、血清性激素含量及睾丸组织氧化与抗氧化指标,并制作睾丸组织切片。结果表明:1)与对照组相比,Ⅱ组小鼠睾丸脏器系数、精子活率及数量、血清性激素含量显著降低(P<0.05),睾丸组织碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05);精子畸形率、血清丙二醛(MAD)含量显著上升(P<0.05)。添加茶多酚后,小鼠的睾丸脏器系数、精子活率及数量、血清性激素含量、睾丸组织AKP、LDH、γ-GGT、CAT、SOD及GSH-Px活性显著上升(P<0.05),精子畸形率、血清MAD含量显著降低(P<0.05)。随着时间的推移,与第1天相比,Ⅰ组小鼠睾丸组织GSH-Px活性显著升高(P<0.05),Ⅱ组小鼠睾丸脏器系数、精子质量、睾丸组织标志酶活性、血清性激素含量、睾丸组织氧化与抗氧化指标均发生显著变化(P<0.05),Ⅲ组小鼠睾丸组织CAT及GSH-Px活性显著降低(P<0.05),Ⅳ组小鼠睾丸组织CAT活性显著降低(P<0.05)。2)睾丸组织病理切片显示染毒组小鼠睾丸生精小管基膜不完整,细胞排列紊乱,数量减少,体积缩小,细胞之间空泡化,管腔内精子数量减少,经茶多酚保护后得到改善。综上,茶多酚能有效改善ZEN与DON联合染毒小鼠精子质量与睾丸组织内标志酶活性,提高血清
- 曹利赵杰陈铃霞谢昕冉梦申茂玉朱雷冯士彬李玉吴金节王希春
- 关键词：茶多酚玉米赤霉烯酮脱氧雪腐镰刀菌烯醇小鼠生殖毒性
- AFB_(1)对犬肝细胞的毒性作用及NAC的保护效应被引量：1
- 2021年
- [目的]以犬原代肝细胞为模型,研究黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))对肝细胞的毒性作用以及N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对细胞损伤的保护效应.[方法]选取1~2月龄幼犬,取肝细胞培养至对数生长期,分别用0(对照),0.05,0.25,1.25,6.25,31.25μg/mL AFB_(1)和6.25μg/mL AFB_(1)+64 mmol/L NAC处理36 h后,观察细胞形态结构,检测肝功能相关指标、氧化与抗氧化功能指标及细胞凋亡相关基因cleaved-caspase-3和cleaved-caspase-9 mRNA表达量.[结果]显微观察发现,与对照组相比,0.05~6.25μg/mL AFB_(1)处理组的细胞数量减少,细胞失去饱满性,细胞凋亡、坏死情况明显;6.25μg/mL AFB_(1)+64 mmol/L NAC处理组的细胞饱满且活性良好,细胞数目增加,结构完整.与对照组相比,1.25~31.25μg/mL AFB_(1)处理组的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性均显著上升(P<0.05);0.05~31.25μg/mL AFB_(1)处理组的碱性磷酸酶(ALP)活性显著升高(P<0.05);1.25~31.25μg/mL AFB_(1)处理组的γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)活性显著降低(P<0.05),0.05~0.25μg/mL AFB_(1)处理组的γ-GGT活性显著增加(P<0.05);31.25μg/mL AFB_(1)处理组的白蛋白(ALB)质量浓度显著降低(P<0.05).与对照组相比,0.05~0.25μg/mL AFB_(1)处理组的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和丙二醇(MDA)含量显著增加(P<0.05);1.25~31.25μg/mL AFB_(1)处理组的H2O2质量浓度显著增加(P<0.05).与对照组相比,0.05~31.25μg/mL AFB_(1)处理组的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性无显著变化;0.25~31.25μg/mL AFB_(1)处理组的过氧化氢酶(CAT)活性显著降低(P<0.05).与6.25μg/mL AFB_(1)处理组相比,6.25μg/mL AFB_(1)+64 mmol/L NAC处理组的AST、ALP、r-GGT活性以及ALB、8-OHdG、MDA、H2O2水平显著降低(P<0.05),CAT和GSH-Px活性显著升高(P<0.05).6.25μg/mL AFB_(1)处理细胞的凋亡率为12%,极显著高于对照组和6.25μg/mL AFB_(1)+64 mmol/L NAC处理组.与对照组相比,0.05~6.25μg/mL AFB_(1)处理组的cleaved-caspase-3和cleaved-caspase-9 m
- 张咪赵杰徐静茹曹利冯士彬李玉阮崇美辜丽川吴金节王希春
- 关键词：黄曲霉毒素B1N-乙酰-L-半胱氨酸肝细胞毒性作用
