高以明
- 作品数：17 被引量：51H指数：4
- 供职机构：南京出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划江苏省教育厅指导性计划项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 一株鸵鸟胚源新城疫病毒生物学特征和遗传发生分析被引量：3
- 2009年
- 从死亡的鸵鸟胚胎中分离到1株新城疫病毒毒株,经毒力检测为强毒株,鸡胚平均死亡时间为45h,IVPI为2.90,IPCI为1.88。RT-PCR扩增出融合蛋白(F)基因,测定核苷酸序列并进行遗传发生分析和酶切位点分析。对基因编码的氨基酸序列进行了推导,该毒株的蛋白酶裂解激活位点附近的氨基酸序列为112R(K)RQKR↓F117,为强毒特征序列,然而该毒株并未引起该鸵鸟群发病。根据绘制的系统进化发生树和F基因上3种限制性内切酶(RE)位点分布,确定该毒株均为基因Ⅶ型。该病毒与在我国鸡群、鹅群同期流行的毒株有很高的同源性。
- 焦库华高以明张敬友王水明柯家法李超美朱雪良张扬严继宁黄立业任晓进吴艳涛刘文博
- 关键词：鸵鸟新城疫病毒遗传发生树
- 应用PCR技术对鸡毒支原体感染鸡病原的检测被引量：3
- 2002年
- 应用已建立的检测MG和MS的PCR方法 ,对人工接种鸡毒支原体后 2～ 2 0天的SPF鸡气管棉拭样品和气管、肺、肝、脾、胸肌、腿肌等器官和组织进行了检测 ;对现场采集的样品同样作PCR检测。结果表明 ,上述人工样品均检测到病原 ,以气管棉拭样品检出最多 ;现场样品PCR阳性检出率为 10 .2 8% ,分离培养的阳性率为 2 .8% ,阳性符合率为 10 0 %。
- 高以明甘军纪李建朱秉权孟书霞彭大新
- 关键词：PCR技术病原检测
- 11型鸭疫里默氏杆菌分离鉴定及致病性研究被引量：9
- 2009年
- 从江苏某免疫鸭场的病死鸭中分离出1株细菌,经形态特性、生化试验、PCR扩增和血清型鉴定,证明该菌为血清11型的鸭疫里默氏杆菌(RA)。人工感染试验显示,106CFU/mL RA经肌肉注射后可导致鸭发病死亡,病死鸭的多个脏器组织均可分离到细菌,而滴鼻接种引起症状所需的细菌剂量为108CFU/mL;对106CFU/mL细菌肌肉注射致死鸭的脏器进行细菌计数,以法氏囊的含菌量最高;病理学变化涉及心、肝、脾、肺、胰、脑、肠粘膜和法氏囊。结果表明,江苏地区存在新的RA血清型,法氏囊是该细菌感染的一个重要靶器官。
- 云水丽杨勇王小波卢焱炜高崧吴艳涛高以明彭大新刘秀梵
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌血清型法氏囊
- 不同动物源新城疫病毒感染不同种属细胞的病变观察被引量：3
- 2009年
- 用10株不同动物源的新城疫病毒F48E8,LaSota、LaSota-GFP、ZJ1、ZJ1-GFP、JS-4-05-Go、GX-1-05-Ch、JS-1-07-Os、JS-1-07-Du、JS-1-07-Pi等毒株分别感染鸡胚、鹅胚、鸭胚成纤维细胞、PK-15、Dulac、FK81、MDCK、Vero、Hela多种不同动物来源的传代细胞系,通过对病毒感染细胞后病变的观察、ZJ1-GFP及LaSota-GFP两个病毒感染细胞后细胞中绿色荧光蛋白指示的病变,了解不同的毒株对不同细胞感染性的差别。结果表明,不同毒力、不同动物源的新城疫病毒致不同种属细胞病变的作用不同,产生病变的时间有差异,强毒F48E8等毒株感染细胞后48～72h可以引起几种禽源成纤维细胞全部裂解,而哺乳动物来源的细胞在60～120h细胞发生病变,且病变也不如禽源成纤维细胞严重,出现了细胞的圆缩。弱毒株在胰酶处理后感染细胞,72h以后出现明显细胞病变,引起的哺乳动物细胞病变不明显。受试毒株的动物种属来源与细胞的致病性没有明显相关性。
- 高以明张敬友王水明柯家法李超美朱雪良张扬严继宁黄立业任晓进吴艳涛刘文博
- 关键词：新城疫病毒绿色荧光蛋白
- 用探针杂交法检测鸡毒支原体和滑液囊支原体被引量：3
- 2003年
- 根据鸡毒支原体(MG)和滑液囊支原体(MS)的16SrRNA基因序列,设计并合成了探针MG和MS共同目的基因,跨幅为580bp的一对引物。用这对引物对2个标准的MG和1个标准的MS菌株DNA模板进行聚合酶链反应(PCR),结果得到了预期大小约580bp的PCR产物。回收纯化琼脂糖电泳凝胶中的MG扩增产物克隆至T载体中,DIG随机引物法合成核酸探针,斑点杂交试验对MG和MS均呈阳性,检测灵敏度分别为2ng和3ng,其它对照菌(毒)株为阴性。
- 高以明李建朱秉权彭大新甘军纪孟书霞
- 关键词：鸡毒支原体滑液囊支原体
- 禽流感、新城疫病毒双重PCR快速检测及禽流感HA亚型分型鉴定方法的建立及应用研究
- 高以明薛峰王维志吴艳涛高崧张睿段宏安
- 通过对NDV NP基因和AIV M基因序列进行同源性分析，自行设计了两对特异性引物，分别建立并优化了检测禽流感病毒和新城疫病毒的RT-PCR检测方法。试验表明,建立的方法敏感性高、特异性强。在建立单一RT-PCR检测方法...
- 关键词：
- 关键词：新城疫病毒禽流感病毒
- 2株鸽源新城疫病毒的毒力鉴定和基因型分析
- 2011年
- 2008年从临床鸽病例中分离到2株新城疫病毒毒株,经测定,鸡胚平均死亡时间(MDT)分别为48h和46h,8周龄SPF鸡静脉接种指数(IVPI)分别为2.88和2.91,一日龄雏鸡脑内接种指数(IPCI)分别为1.88和1.89,按照OIE推荐的标准均为强毒株。RT-PCR扩增出融合蛋白(F)基因片段,测序,推导的氨基酸序列中蛋白酶裂解位点附近的氨基酸序列均符合强毒特征序列。根据F蛋白的部分基因序列绘制的系统进化发生树和F基因片段中3种限制性内切酶(RE)位点分布判定这2个毒株均为基因Ⅶc型。
- 高以明张敬友王水明柯家法李超美朱雪良张扬严继宁黄立业任晓进吴艳涛刘文博
- 关键词：新城疫病毒毒力遗传发生树基因型
- 应用单抗酶联免疫吸附试验快速检测进口鱼粉中的沙门氏菌被引量：2
- 2000年
- 顾炳泉李建张如宽文其乙高逢结焦新安高以明
- 关键词：进口鱼粉沙门氏菌饲料
- 检测莱克多巴胺胶体金免疫层析试验的建立被引量：8
- 2009年
- 采用混合酸酐法制备莱克多巴胺-OVA偶联抗原,胶体金标记莱克多巴胺单克隆抗体,建立了检测莱克多巴胺的胶体金免疫层析试验。该试验具有较好的敏感性和特异性,最低可检测10ng/mL的莱克多巴胺,而与克伦特罗和沙丁醇胺无交叉反应。胶体金免疫层析试验对尿液和饲料样品中莱克多巴胺的最低检测量分别为10ng/mL和0.01mg/kg。
- 高以明吴艳涛王寿利张小荣薛峰陆承平
- 关键词：莱克多巴胺胶体金
- 鸭疫里氏杆菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 为快速检测鸭疫里氏杆菌,以纯化的兔抗1型鸭疫里氏杆菌抗体作为捕获抗体,以纯化的鸭疫里氏杆菌单克隆抗体作为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA方法。最佳的方案为用184ng/孔纯化的多抗包被过夜,100mL/L小牛血清37℃封闭2h,检测抗原、单抗、酶标抗体均为37℃作用1h,显色20min后终止反应,D450nm值高于0.330且P/N>2.1判定为阳性。该方法特异性强,与禽源巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌无交叉反应,最低检测剂量为104 CFU/mL。与传统细菌分离方法相比,该方法的敏感性为100%,符合率为85.2%。本研究首次建立了检测鸭疫里氏杆菌的双抗体夹心ELISA方法,且特异、敏感。
- 陈素娟陈冰李鑫高以明彭大新刘秀梵
- 关键词：鸭疫里氏杆菌单克隆抗体双抗体夹心ELISA
