刘建凯
- 作品数：111 被引量：54H指数：3
- 供职机构：北京民海生物科技有限公司更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程理学更多>>
- 一种目的蛋白的纯化方法
- 本发明涉及蛋白质纯化，具体公开了一种目的蛋白的纯化方法，即一种从包含目的蛋白和至少一种污染物的混合物中纯化目的蛋白的方法。在对所述混合物进行匀浆破碎后，无需使用切向流过滤和滤器死端过滤，仅先后进行阴离子交换层析步骤和阳离...
- 孟夏萌张静飞郭林刘建东刘建凯郑海发
- 文献传递
- 不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解方法
- 本发明提供针对不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解方法，包括：向不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水溶液中加入过氧化氢溶液与无机盐溶液对多糖进行水解，于50℃‑80℃反应3‑5小时，反应结束后，将含有不同大小多糖水解片段的反应...
- 任涛杨朝晖庞强安建峰缪凯陈旭刘建凯
- 文献传递
- Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗宿主细胞DNA残留量检测方法研究
- 2017年
- 目的 建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。方法 提取Vero细胞基因组DNA，制备地高辛标记探针。比较样品不同处理方式的检测差异。对建立的残留DNA检测方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证。结果 Vero 细胞基因组DNA的质量浓度为295 μg/ml，260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.88。探针灵敏度达到0.01 pg/μl。采用苯酚抽提方式处理DNA参考品，检测灵敏度为1 ng；而用碘化钠处理DNA参考品，灵敏度达到10 pg。特异性检测表明，探针与非同源DNA无杂交。灵敏度和稳定性检测结果显示，探针于–70 ℃保存9个月，灵敏度仍为10 pg。 结论 建立了Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。采用碘化钠提取DNA，回收率高，操作简单，适用于Vero细胞的残留DNA检测。
- 任玉莹刘建凯尹珊珊徐颖之邓海清殷建齐邢盛宇张艳红高宇皎郝倩刘杨
- 关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗灭活VERO细胞
- 柯萨奇病毒A16型毒株及其应用
- 本发明涉及生物技术领域，具体公开了柯萨奇病毒A16型毒株及其应用。本发明的柯萨奇病毒A16型毒株，其P1结构蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该毒株型内和型间交叉性良好、遗传稳定，可作为柯萨奇病毒A16型血清...
- 张改梅刘建凯梁祁潘红星张黎赵丽丽谢学超陈磊马廷涛顾美荣
- 五价口服轮状病毒活疫苗稳定剂的初步优化被引量：2
- 2016年
- 目的优化五价口服轮状病毒活疫苗的稳定剂配方。方法采用正交试验,以疫苗37℃放置1周的病毒滴度为检测指标,分别对A组(含蔗糖、琥珀酸钠、琥珀酸和谷氨酸钠)、B组(含蔗糖、柠檬酸钠、柠檬酸和山梨醇)、C组(含甘露醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和蔗糖)稳定剂配方进行优化。结果 A组稳定剂配方最佳组合为40%蔗糖、0.2 mol/L琥珀酸钠、0.01 mol/L琥珀酸、0.05 mol/L谷氨酸钠;B组稳定剂配方最佳组合为40%蔗糖、0.1 mol/L柠檬酸钠、0.005 mol/L柠檬酸、1%山梨醇;C组稳定剂配方最佳组合为40%蔗糖、0.1 mol/L磷酸氢二钠、0.005 mol/L磷酸二氢钠、0.5%甘露醇。结论 3种稳定剂的最佳配方均对五价口服轮状病毒活疫苗具有较好的稳定作用。
- 张改梅殷建齐尹珊珊朱芮波甘建辉肖坚胡光楠刘建凯
- 关键词：口服轮状病毒活疫苗稳定剂
- 重组肠道病毒71型疫苗的免疫原性和保护效果研究被引量：3
- 2018年
- 目的评价重组肠道病毒71型(EV-A71)疫苗的免疫原性和保护效果.方法将重组EV-A71疫苗按0、14d程序免疫BALB/c小鼠,采用微量细胞病变法测定一针免疫、二针免疫14d后的EV-A71中和抗体效价,应用酶联免疫吸附法测定二针免疫14d后小鼠脾单个核细胞分泌的细胞因子水平.乳鼠颅内攻击EV-A71病毒,同时将疫苗免疫后小鼠血清通过腹腔注射乳鼠,计算乳鼠生存率及半数动物保护性抗体水平.结果重组EV-A71疫苗一针免疫小鼠后诱导产生的EV-A71中和抗体阳转率即达100%,二针免疫小鼠后诱导产生的EV-A71中和抗体效价显著高于一针免疫(P=0.000),疫苗可诱导小鼠产生Th1和Th2类细胞因子应答.乳鼠颅内攻击20μl原倍EV-A71/M6病毒,同时将疫苗免疫小鼠血清160、40、10、2.5、0.625和0.15625U分别经腹腔注射乳鼠,连续观察22d,乳鼠生存率分别为100%、100%、70%、20%、0和0,对照组乳鼠于第8天全部死亡,采用Reed-Muench法计算平均半数动物保护中和抗体效价(ED50)为5.59U.结论重组EV-A71疫苗可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答,并可保护乳鼠免受EV-A71病毒感染.
- 顾美荣高帆张改梅肖霞李国顺陈磊郭林肖海峰刘建凯毛群颖郑海发
- 关键词：手足口病肠道病毒71型疫苗免疫原性体液免疫细胞免疫
- 重组肠道病毒71型疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法的建立被引量：3
- 2018年
- 目的建立重组肠道病毒71型疫苗(EV-A71)(汉逊酵母)抗原含量测定方法,用于重组EV-A71(汉逊酵母)疫苗的质量控制.方法以抗EV-A71(汉逊酵母)多克隆抗体为包被抗体,经辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的抗EV-A71单克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),确定定量限度及最佳定量范围,并对该方法的准确度、精密度和特异性进行方法学验证.结果线性范围为5~80U/ml,线性和平行性良好.定量下限为5U/ml,检测不同浓度的EV-A71国家抗原标准品,回收率在88%~115%,准确度良好;重复性和中间精密度测定,其变异系数均小于15%;与重组柯萨奇病毒A16、甲型肝炎灭活疫苗(HAV)、冻干水痘减毒活疫苗(VZV)、Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)、五价口服轮状病毒减毒活疫苗(RV)等疫苗、Tris缓冲液、PBS缓冲液、破碎液、汉逊酵母宿主蛋白(HCP)均无交叉反应,其专属性良好.结论建立了重组EV-A71疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法并进行了初步验证,为疫苗研制中抗原含量的质控提供了可靠的检测手段.
- 张改梅陈磊高帆姚昕李国顺顾美荣毛群颖刘建凯郑海发
- 关键词：疫苗汉逊酵母抗原含量
- 一种抗柯萨奇病毒A10型的单克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明涉及抗体技术领域，具体涉及一种抗柯萨奇病毒A10型的单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明的抗体或其抗原结合片段的重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3具有如SEQ ID NO.1‑3所示的氨基酸序列，轻链互补决...
- 张改梅高帆李国顺陈磊赵丽丽谢学超马廷涛顾美荣刘建凯
- 一种包含稳定剂的Exendin注射剂药物配方
- Exendin是从蜥蜴类动物唾液中分离得到的天然降血糖多肽物质，本发明涉及一种稳定的Exendin液体制剂配方，用于糖尿病治疗。本发明尤其涉及一种含有能显著提高Exendin稳定性的配方，延长液体形态的Exendin制剂...
- 郑海发刘建凯阮承迈
- 文献传递
- 一种吸附无细胞百白破-脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种吸附无细胞百白破‑脊髓灰质炎‑b型流感嗜血杆菌联合疫苗及其制备方法。本发明提供的联合疫苗包括无细胞百日咳抗原、白喉抗原、破伤风抗原、灭活的脊髓灰质炎病毒和b型流感嗜血杆菌抗原；所述脊髓灰质炎病毒为Sabi...
- 王婷婷庞强齐世博刘建凯郑海发
- 文献传递
