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王金龙
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1
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重庆医科大学附属第二医院
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相关领域:
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龚建平
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重庆医科大学附属第二医院
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重庆医科大学附属第二医院
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沉默单酰基甘油脂肪酶mRNA对肝癌大鼠的作用及机制
2015年
目的研究沉默单酰基甘油脂肪酶(MAGL)mRNA对大鼠肝癌的作用及其机制。方法 CBRH7919大鼠肝癌细胞原位移植法建立大鼠肝癌模型,建模后免疫组化检测肝癌组织及正常肝组织甲胎蛋白(AFP)表达。分为PBS液组;MAGL-shRNA质粒微泡组;空白微泡+超声辐照组;MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组(A);MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组(B);MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组(C)。每只大鼠经尾静脉注射1 ml相应试剂,并对空白微泡+超声辐照组和MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照A、B、C组的大鼠肝区给予超声辐照。前4组:免疫印迹检测大鼠肝癌组织MAGL表达,荧光定量PCR检测MAGL mRNA表达情况,ELISA检测癌组织游离脂肪酸(FFAs)。解剖并比较各组大鼠的肿瘤大小、转移情况。B组给予高脂饮食1 w后与C组一同处死,比较其肿瘤组织MAGL表达情况、FFAs含量以及肿瘤大小。结果肿瘤病理检测符合原发性肝癌。前四组:免疫印迹检测显示,MAGL-shRNA质粒微泡+超声辐照组A的MAGL蛋白表达趋势明显降低;PCR结果显示,该组MAGL-mRNA明显低于其他3组(P<0.05);ELISA显示该组FFAs含量明显低于其余各组(P<0.05);该组肿瘤平均大小及转移率明显小于其余三组(P<0.05)。后两组:高脂饮食组癌组织MAGL蛋白表达、FFAs浓度明显高于正常饮食组,且前者肿瘤明显大于后者(P<0.05)。结论沉默MAGL mRNA能够明显抑制大鼠肝癌生长;高脂饮食能够逆转MAGL沉默基因的治疗作用;MAGL作用机制可能是通过调控FFAs及下游因子实现。
王金龙
张俊勇
陈懿
王晓波
龚建平
关键词:
肝癌
超声微泡
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