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一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途: 本发明公开了一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途。利用不相容的双质粒系统在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚基，和增强型绿色荧光蛋白、霍乱毒素A亚基、穿膜肽三种蛋白的融合蛋白EGFP-CTA2-TAT，通过PCR扩...; 王华倩周小芬林卫萍张焜王真史杜志云郑希方岩雄赵肃清黄宝华; 文献传递

一种苯并呋喃喹啉化合物作为双功能pH探针的应用: 本发明公开了一种苯并呋喃喹啉化合物作为双功能pH探针的应用，具体是一种苯并呋喃喹啉化合物作为探针在测定溶液的pH值和在检测变质牛奶中的应用；该探针制备简单、易得，并且结构稳定，用于检测溶液pH值，通过荧光分光光度计，或紫...; 张焜付成杰卢宇靖邓强王郑亚胡冬萍周小芬杜志云郑希黄宝华方岩雄; 文献传递

醛还原酶的原核表达、纯化及活性测定: 2015年; 醛还原酶(aldehyde reductase AKR1A1,EC1.1.1.2)是醛酮还原酶家族成员,能将有毒醛还原成相应的醇。构建含有组氨酸标签、肠激酶切位点与AKR1A1基因的原核重组表达载体p ET-22b-(His)6-DDDDKAKR1A1。将该质粒转化至Rosetta宿主菌中,通过对表达条件的优化,确定表达条件为0.25 mmol/L IPTG、16℃、80 r/min诱导14 h,重组蛋白以可溶形式表达。采用亲和纯化得到纯度为90%的pel B-(His)6-DDDDKAKR1A1融合蛋白。重组蛋白用肠激酶特异性剪切,经过Ni-NTA、Sephadex G-75再次纯化,得到纯度为98%的野生型AKR1A1蛋白。使用Western blotting和蛋白质序列分析对蛋白质进行鉴定。利用体外酶动学方法测定(His)6-DDDDK-AKR1A1的比活力为(41.3依0.1)U/mg、AKR1A1比活力为(79.4依0.15)U/mg。使用该蛋白建立醛还原酶抑制剂筛选方法,对已上市的13种非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)的抑制活性进行测定。结果表明奥沙普秦、酮基布洛芬、托芬那酸、氟灭酸等对AKR1A1有很高抑制作用。本研究表达纯化了高比活力的野生型醛还原酶,并应用该酶研究已上市的非甾体抗炎药对AKR1A1的抑制活性,所获得结果为非甾体抗炎药的副作用提供了参考。; 周小芬王华倩王真史林卫萍杜志云张焜; 关键词：原核表达非甾体抗炎药

不相容双质粒共表达霍乱毒素类似嵌合蛋白: 2015年; 霍乱毒素由5个B亚基(CTB)和l个A亚基(CTA)(包括CTA1和CTA2)组成。该蛋白结构可帮助有毒的CTA1分子进入细胞。本研究拟利用原核不相容双质粒共表达系统获得霍乱毒素类似嵌合蛋白,用于大分子蛋白质黏膜给药的载体研究。将CTB基因片段克隆至载体p ET-28a中,获得重组质粒p ET-28a-CTB;以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)代替有毒的CTA1,在CTA2序列N端融合穿膜肽(TAT),将EGFP-CTA2-TAT基因克隆至载体p ET-22b(+)中,获得重组质粒p ET-22b-EGFP-CTA2-TAT。利用p ET-28a-CTB和p ET-22b-EGFP-CTA2-TAT二者不同抗性,将双质粒分步转化到大肠杆菌BL21中。表达条件为0.75 mmol/L IPTG、20℃、200 r/min诱导20 h,重组嵌合蛋白能以可溶形式表达。经过Ni-NTA、Sephadex G-75纯化,Western blotting对蛋白质特异性进行鉴定,确定获得(CTB)5/EGFP-CTA2-TAT嵌合蛋白。; 周小芬林卫萍何华红李想张焜杜志云王华倩; 关键词：霍乱毒素增强型绿色荧光蛋白嵌合蛋白

原核表达醛（糖）还原酶及霍乱毒素类似嵌合蛋白的研究: 本论文主要涉及了三个蛋白的基因克隆表达及相关抑制剂筛选的研究，主要包括与糖尿病综合症及炎症相关的醛糖还原酶和醛还原酶，以及一种具有脑靶向作用的多亚基全新的霍乱毒素类似嵌合蛋白的基因克隆表达和纯化，及采用醛糖还原酶和醛还原...; 周小芬; 关键词：醛糖还原酶组氨酸标签非甾体抗炎药嵌合蛋白; 文献传递

一种苯并呋喃喹啉化合物作为双功能pH探针的应用: 本发明公开了一种苯并呋喃喹啉化合物作为双功能pH探针的应用，具体是一种苯并呋喃喹啉化合物作为探针在测定溶液的pH值和在检测变质牛奶中的应用；该探针制备简单、易得，并且结构稳定，用于检测溶液pH值，通过荧光分光光度计，或紫...; 张焜付成杰卢宇靖邓强王郑亚胡冬萍周小芬杜志云郑希黄宝华方岩雄; 文献传递

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周小芬