杨玉莹
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：浙江工业大学生物与环境工程学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 一种不对称水解(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯的新酯酶基因的克隆表达和酶学性质研究被引量：1
- 2016年
- 本文将来自反硝化无色杆菌Achromobacterdenitrificans1104的酯酶基因EHest,转化大肠杆菌中,成功表达了具有不对称水解农药甲霜灵的中间体(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯(MAP)活性的酯酶EHesterase。用重组酯酶EHesterase催化MAP的水解,底物浓度50 g/L,反应1h的转化率29.5%,产物(R-酸)的eep是85.1%。该酶的最适反应pH和温度分别为9.0和50℃,在50℃以下和pH5~9之间具有较好的稳定性。该酶水解MAP的米氏动力学参数Vm、Km分别是0.733 g/(L·min)和7.49 g/L。加入10%DMSO对酶EHesterase的立体选择性和催化速度有一定的促进作用。Cu^(2+)、Fe^(3+)对酶活有明显抑制作用。该酶水解MAP的活性与水解p-对硝基苯乙酸酯的活性数量级相当,是水解橄榄油活性的333倍。
- 董剑鸣张利坤卢亚南姚星超杨玉莹陆跃乐张朝晖
- 关键词：酯酶克隆表达酶学性质
- 碳酸酐酶在多孔玻璃上的固定化及性质研究被引量：2
- 2015年
- 将牛碳酸酐酶共价固定到多孔玻璃CPG上,拟应用于烟道气中CO2的强化吸收。多孔玻璃经过烷基化和戊二醛活化后,与酶共价结合。以p-硝基苯乙酸酯水解活力来表示碳酸酐酶的活性,在最优固定化pH=8.0下,固定化酶的活力为1.32U/g CPG,固定化酶载量为14.7mg/g CPG,固定化效率因子为0.334。测得固定化酶的米氏动力学参数k2和Km的值分别是258min-1和259×10-4 mol/L,分别是游离酶的61.7%和2.23倍。以pH=7.85和40℃时的酶活作为比较标准,当pH>7.85和T>40℃时,固定化酶的性质优于游离酶。在pH=10和40℃下,固定化酶的活性似乎不稳定,在7天内下降为原来的37%。然而,以压力法测得的CO2水合活力表示酶的活性,在上述条件下,固定化酶却很稳定,活性在21天内几乎没有变化,表明酯酶活力法测定酶活不能用来评估CPG-固定化碳酸酐酶的稳定性。
- 张朝晖杨玉莹
- 关键词：固定化多孔玻璃
