宫路路
- 作品数：16 被引量：36H指数：4
- 供职机构：遵义医药高等专科学校更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省教育厅高等学校人文社会科学研究项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学文化科学更多>>
- 华南忍冬总酚酸提取工艺优化及体外抗氧化活性研究被引量：5
- 2020年
- 以华南忍冬为原料,采用微波辅助提取华南忍冬总酚酸,在单因素实验基础上,结合Box-Behnken响应面设计,探讨乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间和微波功率对总酚酸含量的影响,优化华南忍冬总酚酸最佳提取工艺条件,并通过DPPH自由基清除作用和铁离子还原能力来评价华南忍冬总酚酸提取物的抗氧化活性。结果表明最佳提取工艺条件为乙醇浓度80%、液料比12∶1 mL/g、提取温度70℃、提取时间30 min、微波功率400 W,总酚酸含量达到59.45±0.13 mg/g,与模型预测值57.76 mg/g相近。提取物DPPH自由基清除率IC50值为21.26μg/mL,铁离子还原能力EC50值为39.37μg/mL。本试验表明华南忍冬总酚酸提取物具有较好的抗氧化活性,为华南忍冬综合研究提供理论依据。
- 李洁宫路路王刚崔霖芸刘亮柳陈坚
- 关键词：总酚酸响应面抗氧化活性
- 短乳杆菌来源重组β-半乳糖苷酶初步分离纯化与酶学特性研究
- 2020年
- 将实验室克隆得到的E.coli BL21/p ET28a-bgaB-18重组菌株在IPTG的诱导下进行表达,对其表达的β-半乳糖苷酶性质进行研究.首先,通过离心收取重组菌菌体;其次,通过超声破碎菌体细胞,再用镍柱对重组蛋白质进行亲和层析;最后,收集层析液,再利用紫外分光光度计测定重组β-半乳糖苷酶活性,并研究其酶学性质.结果表明:该酶的最适反应温度为37℃,最适pH值为7.5;在温度30~50℃、pH 6.0~8.0范围内酶稳定性较好;Mg^2+、Mn^2+为其激活剂,Cu^2+为其抑制剂;测得K m=0.816 mmol/L,V max=45.87 mmol/(L·min).
- 李洁宫路路柳陈坚崔霖芸张宁
- 关键词：Β-半乳糖苷酶分离纯化酶学性质
- 丹江镇辣椒红酸汤细菌菌群多样性分析及抗食源性致病菌乳酸菌筛选被引量：4
- 2022年
- 以贵州丹江镇传统辣椒红酸汤为研究对象,采用Illumina MiSeq高通量测序技术进行细菌菌群多样性分析,结合微生物纯培养技术和双层平板法从中分离优势乳酸菌,通过分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并筛选抗食源性致病菌乳酸菌。结果表明,辣椒红酸汤样品中的优势细菌门为厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria);优势细菌属为乳杆菌属(Lactobacillus)。从辣椒红酸汤样品中共分离得到17株乳酸菌,经鉴定,11株为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、3株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、1株为副干酪乳杆菌亚种(Lactobacillus paracasei subsp.)、1株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、1株为乳酸杆菌(Lactobacillus sp.),其中4株乳酸菌具有较好的产酸和抑菌性能,且干酪乳杆菌ST7-14的抑菌能力最好,对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)ST2-1和阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ST2-6的抑菌圈直径分别为37.0 mm和31.5 mm。
- 宫路路赵志敏杨颜王若曦李洁
- 关键词：高通量测序乳酸菌抑菌
- 生物化学课程教学探索
- 2018年
- 生物化学是连接生命科学和医学的基础学科,是医学院校学生必修课程之一。生物化学课程内容复杂多变,学生学习困难,教师教学亦有诸多挑战,如何找到一个合适的教学方法或者手段,是不断追求的目标。本文归纳总结了一些常见且特色鲜明的生物化学教学方法,希望对生物化学教学以及教学改革起到一个抛砖引玉的作用。
- 宫路路崔霖芸李洁
- 关键词：生物化学高等教育教学方法生化教学
- A型肉毒毒素轻链的原核表达、纯化及活性鉴定被引量：4
- 2015年
- 目的:在大肠杆菌中表达、纯化A型肉毒毒素轻链(Bo NT/A LC),研究其生物学活性。方法:根据Gen Bank中报道的Bo NT/A LC基因序列设计特异引物,从肉毒梭菌中扩增Bo NT/A LC基因片段,构建重组大肠杆菌p ET-32a Bo NT/A LC/BL21(DE3)Rosetta,IPTG诱导目的蛋白高效表达,表达产物经Ni螯合亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定目的蛋白,并利用相应底物对纯化产物进行生物活性分析和酶活动力学测定。结果与结论:构建了重组大肠杆菌p ET-32a Bo NT/A LC/BL21(DE3)Rosetta,原核表达获得高水平可溶性重组Bo NT/A LC,纯化得到纯度较高的蛋白质,重组Bo NT/A LC的酶活略高于A型肉毒毒素全毒素,可作为试剂用于Bo NT/A LC抑制剂高通量体外检测方法研究。
- 罗森齐芬芳宫路路刘昊李涛王慧
- 关键词：原核表达
- 元基因组学研究
- 2023年
- 人体肠道内定值着多种多样的微生物,这些微生物对人体健康影响很大。研究发现,健康人群与患病人群在肠道微生物群落组成上存在着差异性。元基因组学研究的出现,为找出这些差异提供了可能。元基因组学研究微生物群落结构组成不需要将微生物个体分离出来,而是作为一个整体进行元基因组测序研究。通过对元基因组测序数据分析,得到微生物群落结构,为疾病诊断提供依据。
- 宫路路李洁
- 关键词：肠道微生物基因组学疾病诊断
- 硒多糖抗肝细胞癌效应与硫氧还蛋白1的关系被引量：2
- 2020年
- 目的探讨硒多糖抗肝细胞癌(HCC)效应与硫氧还蛋白(Trx)-1的关系。方法设置0、50、100、200和400μg/ml共计5组浓度梯度,利用MTT细胞毒活性检测法在细胞水平研究硒多糖对HepG2细胞活力的影响;在分子水平,使用Western印迹检测硒多糖对HepG2细胞内Trx-1表达的影响,并进一步检测凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达。结果硒多糖200μg/ml、400μg/ml组的细胞活力较其他浓度显著下降(P<0.05),显著抑制HepG2细胞活性;200μg/ml、400μg/ml组的硒多糖处理使HepG2细胞Trx-1表达量显著降低(P<0.01);凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达量分别在200μg/ml及100μg/ml时开始显著变化(P<0.05)。结论硒多糖可能是通过下调Trx-1的表达诱导HepG2细胞发生凋亡从而抑制HepG2细胞的生长。
- 张宁邱佳张安龑宫路路
- 关键词：肝细胞癌硒多糖细胞凋亡
- 凯里酸汤研究现状分析被引量：5
- 2020年
- 凯里酸汤有着地方特色,其特有的风味和营养价值功能,越来越得到人们的喜爱和认同。本文对近年来凯里酸汤的国内研究状况做一综述,以期给参与贵州酸汤研究的科技工作者提供参考。
- 李洁宫路路陈芳勇张宁崔霖芸
- 关键词：微生物有机酸抗氧化
- 凯里红酸汤细菌群落多样性分析及其优势乳酸菌筛选被引量：4
- 2022年
- 文章将高通量测序技术和微生物纯培养技术结合,有目的地筛选凯里红酸汤中优势微生物,为纯菌种红酸汤发酵研究储备发酵菌种。高通量测序结果表明,在门分类水平上,ST9和ST10样品中主要优势菌门为厚壁菌门(分别占比86.16%、92.81%);ST22样品中优势菌门为变形杆菌门(54.81%)和厚壁菌门(39.77%)。在属分类水平上,3个样品细菌群落多样性各有差异。ST9和ST10样品优势菌属为乳酸杆菌属(Lactobacillus,分别占比42.00%、83.50%);ST22样品细菌多样性高且各菌属比例分散,分别为假单胞菌属(Pseudomonas,16.27%)、芽孢杆菌属(Bacillus,16.73%)、Aeribacillus(5.50%)等。在高通量测序分析指导下,利用乳酸菌纯培养技术,从3个样品中分离得到29株优势菌。ST9样品中分离得到12株菌,分别是Lactobacillus plantarum 2株,Weissella minorgene 1株,Bacillus velezensis 1株,Bacillus cereus 1株,Bacillus subtilis 1株,Bacillus sp.6株,其中芽孢杆菌居多,达9株。ST10样品中分离得到14株菌,其中乳酸菌12株,分别是Lactobacillus plantarum 11株,Lactobacillus pentosus 1株;2株病原菌,分别是Staphylococcus haemolyticus和Streptococcus pneumoniae。ST22样品中分离得到3株芽孢杆菌,分别是Bacillus velezensis 2株,Bacillus sp.1株。样品中乳酸菌和芽孢杆菌为可培养优势菌,与高通量测序结果基本一致。从分离得到的病原菌来看,传统发酵酸汤存在一定食品安全风险。分离得到的细菌可为红酸汤纯菌种发酵提供备选菌株,为其工业化生产奠定基础。
- 宫路路李晓然陈芳勇王若曦李洁
- 关键词：高通量测序细菌多样性
- 凯里地区辣椒酸细菌群落多样性及其乳酸菌分离鉴定被引量：5
- 2021年
- 利用Illumina MiSeq高通量测序技术对凯里地区辣椒酸中细菌群落多样性进行研究,并结合传统纯培养技术对样品中乳酸菌进行分离鉴定。结果显示,样品中优势细菌门为厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria),相对含量分别为77.9%和19.59%;优势细菌属为乳酸杆菌(Lactobacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacterales)、Lelliottia、芽孢杆菌属(Bacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)和寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),相对含量分别为72.02%、5.59%、3.97%、5.30%、1.64%、1.07%和1.02%。同时,采用纯培养技术从辣椒酸中分离出了43株细菌,其中34株被鉴定为乳酸杆菌,6株为芽孢杆菌,3株为葡萄球菌。由此可见,乳酸杆菌为凯里地区辣椒酸中的优势细菌,且主要为植物乳杆菌;同时分离出了葡萄球菌,提示传统发酵辣椒酸存在一定的食品安全风险,应引起重视。
- 李洁崔霖芸陈芳勇宫路路
- 关键词：高通量测序细菌多样性乳酸菌
