陈振银
- 作品数:9 被引量:14H指数:3
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 人钙结合蛋白S100A9基因克隆表达纯化及其对SH-SY5Y细胞作用的研究被引量:3
- 2016年
- 钙结合蛋白S100A9在许多慢性疾病中聚集并可能在一些自身免疫性如老年痴呆中发挥了重要的作用。大量的报道也表明S100A9日益获得人们的注意。通过获取足量重组人S100A9蛋白,探索其对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的作用及机制。运用全基因合成法合成人S100A9基因,构建人S100A9原核表达重组质粒p ET28a-S100A9,经单酶切法及PCR法鉴定重组质粒已构建成功。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)在18℃、25℃、37℃分别诱导表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting鉴定,结果显示18℃时蛋白大量表达于上清中,在37℃时大量表达于包涵体。采用镍亲和层析法分别纯化两种来源重组蛋白,透析后低温冻干获得蛋白粉。使用CCK-8法检测上清来源和包涵体来源的S100A9蛋白对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的增殖抑制作用。结果显示两种来源重组蛋白对SH-SY5Y细胞具有生长抑制作用,在浓度为0.05 mg/m L时即有明显抑制作用(p<0.01),且二者作用无明显差异(p<0.01)。采用AO/EB双重染色和流式细胞术初步检测S100A9对SH-SY5Y细胞的增殖抑制机理,结果显示该蛋白可促进SH-SY5Y细胞的凋亡。两种来源蛋白之间的比较也显示二者对于SH-SY5Y细胞作用无明显差异(p<0.05)。本研究成功获得足量S100A9重组蛋白,且两种来源S100A9蛋白作用于SH-SY5Y细胞的生物学效应一致。
- 叶柳李曌陈振银刘笃强廖键梅陈雄斌熊伟刘兆雨熊丽荣李晶黄琴李伟彭彦唐勇刘永刚
- 关键词:S100A9重组质粒蛋白表达SH-SY5Y
- TPDS教学在分子生物学教学中的探索与实践被引量:1
- 2015年
- 目的探讨分子生物学中以团队为核心基于问题展开讨论及分享(team problemdiscussion share,TPDS)的教学方式在医学生教学中的实践效果。方法选择2009级和2010级七年制临床医学专业学生174人为实验组,对其实施TPDS教学。2010级基础医学、2010级全科医学、2011级基础医学和2011级儿科医学共394人,实施传统教学,作为对照组。以学生考试成绩作为主要教学效果评价指标,问卷调查为辅助。采用t检验分析方法进行统计分析。结果实验组学生的分子生物学成绩得分(94.39±4.34)高于对照组得分(85.1±8.77),两组比较差异有统计学意义,P〈0.05。实验组学生问卷显示,80%以上的学生认为TPDS教学提高了其自学能力、信息搜集能力、问题解决能力等。结论TPDS的引入是教学改革的需要,旨在激发学生自主学习兴趣、培养学生独立分析和解决问题的能力、提高学生团结协作的能力。
- 龚剑萍陈振银罗忠礼
- 关键词:分子生物学医学生
- 一种自组装短肽及其在细胞三维培养中的应用
- 本发明公开了一种自组装短肽及其在细胞三维培养中的应用,该自组装短肽命名为GFS-2,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1。实验表明,本发明所述自组装短肽能够自组装形成纳米纤维支架,支撑多种细胞生长,可以在纳米生物医学领域...
- 罗忠礼岳媛媛陈振银李萌萌徐晓帆孙悦霖赵天鑫
- 新型自组装短肽对心肌梗死组织修复功能的研究
- 本论文研究新型自组装短肽构建的水凝胶纳米纤维支架对心肌细胞三维培养,心肌梗死区域组织修复以及诱导骨髓间充质细胞诱导分化为心肌样细胞功能的影响。从材料层面上,圆二色谱仪考察了自组装短肽的二级结构;原子力显微镜检测短肽自组装...
- 陈振银
- 关键词:骨髓间充质细胞心肌样细胞
- 文献传递
- 一种自组装短肽及其在细胞三维培养中的应用
- 本发明公开了一种自组装短肽及其在细胞三维培养中的应用,该自组装短肽命名为GFS‑2,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1。实验表明,本发明所述自组装短肽能够自组装形成纳米纤维支架,支撑多种细胞生长,可以在纳米生物医学领域...
- 罗忠礼岳媛媛陈振银李萌萌徐晓帆孙悦霖赵天鑫
- 文献传递
- 一种自组装短肽及其对金电极修饰的应用
- 本发明公开了一种自组装短肽及其对金电极修饰的应用,该自组装短肽的氨基酸序列为:Tyr Val Asn Lys Pro Arg Cys Cys Ala Ala Ala Ala Ala Ala。本发明所述自组装短肽能够在金电...
- 徐晓帆陈振银李润土李萌萌张慧楠罗忠礼
- 文献传递
- 自组装短肽GFS-4作为细胞三维培养及心肌梗死修复支架材料的研究被引量:5
- 2017年
- 本研究探索自组装短肽GFS-4在心肌细胞三维培养中的应用效果及其对心肌梗死区域的组织修复作用。通过圆二色谱仪分析短肽GFS-4的二级结构,原子力显微镜检测短肽GFS-4自组装的微观形态。将GFS-4自组装形成的纳米纤维支架作为心肌细胞三维培养材料,观察心肌细胞的生长状况;建立大鼠心肌梗死模型,加入水凝胶GFS-4研究其对心肌梗死修复的效果。结果发现,GFS-4自组装形成的二级结构主要为β折叠;自组装24 h后形成致密的纳米纤维支架;心肌细胞三维培养结果表明心肌细胞在GFS-4水凝胶中生长状况良好;心肌梗死体外修复实验发现,短肽GFS-4水凝胶支架可缓解心肌梗死区域组织坏死。自组装短肽GFS-4作为新的纳米支架材料,可用于细胞三维培养和心肌梗死区域组织修复。
- 陈振银岳媛媛张慧楠陈春燕刘博李雪琴文静吴书祎罗忠礼
- 自组装短肽K_2I_4K_2在PCR中提高Taq DNA聚合酶热稳定性被引量:1
- 2016年
- 目的设计自组装短肽K_2I_4K_2作为新型表面活性剂来稳定Taq DNA聚合酶,探索其对Taq DNA聚合酶在高温下的半衰期以及对PCR扩增效率的影响,探讨其在PCR中应用的可行性。方法圆二色仪检测短肽K_2I_4K_2在不同理化条件下的二级结构;原子力显微镜检测其自组装形成的纳米结构特征;紫外可见光谱检测其对Taq酶在高温下半衰期的影响;普通PCR验证其在PCR中应用的可行性;RT-q PCR检测其对Taq酶扩增效率的影响。结果短肽K_2I_4K_2在盐离子溶液中能自组装形成纳米纤维结构,且在高温下拥有稳定的二级结构;短肽K_2I_4K_2使得Taq在95℃下的半衰期增加了约1.6倍;短肽K_2I_4K_2组装24 h后大大增加了Taq酶的扩增效率。结论短肽K_2I_4K_2较为显著地增加了Taq DNA聚合酶的热稳定性,能够很好地应用于PCR反应系统中。
- 李萌萌徐晓帆陈振银张慧楠罗忠礼
- 自组装短肽水凝胶支架三维培养环境对骨髓间充质干细胞生物学特性及心肌方向分化的影响被引量:4
- 2017年
- 目的:探究短肽GFS-4自组装形成的水凝胶作为支架材料构建三维微环境对BMSCs生物学特性及向心肌细胞方向诱导分化过程的影响。方法:刚果红染色、红细胞膜裂解实验检测短肽GFS-4自组装效果及对细胞膜是否具有裂解作用;CCK8和AO/EB染色分别检测对BMSCs活性和凋亡的影响;Real-time PCR分析BMSCs诱导分化后MLC-2v、GATA-4基因表达情况。结果:GFS-4自组装后形成致密凝胶,自组装前后对细胞膜无损伤;三维培养环境细胞呈球形生长,细胞活力和凋亡速度均低于二维培养环境。三维培养组在诱导分化过程中的第5天和第7天MLC-2v、GATA-4基因表达均显著高于二维组(P<0.05)。结论:短肽GFS-4自组装水凝胶构建的三维微环境延缓了BMSCs的增殖速度和凋亡速度,并促进向心肌方向诱导分化过程中MLC-2v、GATA-4基因的表达。
- 赵正德陈振银张慧楠龚剑萍许少丹罗忠礼
- 关键词:骨髓间充质干细胞心肌分化