张艳红
- 作品数：25 被引量：41H指数：3
- 供职机构：河南科技学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学文化科学更多>>
- 绵羊Nectin 4基因的克隆与表达
- 2016年
- 采用巢式PCR方法获得未见报道的绵羊Nectin4基因。根据GenBank上登录的牛的Nectin4mRNA序列信息设计并合成10对引物;从绵羊肺支气管组织中提取总RNA,采用随机引物和Oligo(dT)将其反转录为cDNA;利用巢式PCR原理和PCR引物错配导致非特异反应的特点,改变常规PCR反应条件,将10对引物分为2组,通过两轮PCR即获得大小片段相符的片段;TA克隆后测序证实已成功获得绵羊Nectin4基因的完整ORF,证明本方法可作为一种获取未知基因的方法,较RACE等其他传统技术有明显优势;构建了重组表达质粒pCMV-Myc-Nectin 4,在CHO细胞的细胞质中获得高效表达,经Western-blot分析,表达的Nectin 4蛋白的大小与预期符合。绵羊Nectin4基因的成功扩增为后续对其在病毒入侵中的功能进行研究奠定了基础。
- 王秋霞郭利亚陈蕾窦永喜欧长波余燕张艳红马金友刘兴友才学鹏
- 关键词：蛋白质表达
- IBDV感染对雏鸡法氏囊纤维增生及TGF-β1、MMP-9表达的影响
- 2019年
- 试验通过Masson染色、免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等方法研究雏鸡感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)过程中法氏囊内纤维形成、转化生长因子β-1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及分布规律,探讨雏鸡IBDV感染后TGF-β1和MMP-9的表达变化与纤维增生之间的相互关系。结果表明:雏鸡IBDV感染后,法氏囊内黏膜下层、滤泡周围的固有层纤维大量增生,在感染后4 d(4 dpi)达到最高,随后逐渐减少。同时,法氏囊内TGF-β1的蛋白表达水平逐渐增高至7 dpi达到最大值,且3～7 dpi显著高于对照组(P<0.05)。TGF-β1基因转录水平呈现先增高后降低趋势,且2～5 dpi均显著高于对照组,4 dpi达到最高。MMP-9的蛋白表达和基因转录均呈现先增高后降低的趋势。蛋白表达水平在4 dpi最高,且在1～4 dpi显著高于对照组(P<0.05),基因转录水平在2～7 dpi显著高于对照组且在5 dpi时最高(P<0.05)。结论:雏鸡IBDV感染导致法氏囊中纤维增生和TGF-β1、MMP-9的表达基本一致,提示TGF-β1和MMP-9可能对IBDV感染雏鸡法氏囊中纤维的发生、发展发挥一定作用。
- 裴辰辰徐之勇余燕王秋霞欧长波张艳红李任峰马金友
- 关键词：TGF-Β1法氏囊纤维形成雏鸡
- 猪囊尾蚴API基因原核表达条件的优化被引量：1
- 2017年
- 【目的】获得猪囊尾蚴凋亡蛋白酶抑制剂(API)基因在大肠杆菌中的最佳表达条件,为API功能研究奠定基础。【方法】以表达载体pEGX-4T-1、pET-30a及猪囊尾蚴API基因的原核表达载体pEGX-4T-1/API-Flag、pET-30a/API为材料,对影响API蛋白表达的载体(pEGX-4T-1、pET-30a)、温度(25,30,37℃)、诱导时间(2,4,6,8h)、IPTG终浓度(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mmol/L)和卡那霉素终浓度(100,200,300,400mmol/L)等条件进行优化,筛选重组蛋白最佳的表达条件。对在最佳条件下获取的目的蛋白进行超声处理,4℃、10 000r/min离心分别收集上清液和沉淀,对目的蛋白进行可溶性分析;SDS-PAGE后,将目的蛋白条带转印至硝酸纤维素膜上,与抗His标签抗体共孵育,检测目的蛋白的反应原性。【结果】当选择pET系列载体(pET-30a)时,API表达量高于其在pGEX系列(pGEX-4T-1)中的表达量。API融合蛋白最佳表达条件为:在含200mmol/L卡那霉素的LB培养基上于37℃培养3h后,加入终浓度为0.4mmol/L的IPTG,再于30℃诱导培养6h。SDS-PAGE结果表明,pET-30a/API融合蛋白分子质量约为53ku,与预期蛋白分子质量一致。Western-blot检测结果显示,重组蛋白pET-30a/API能够识别特异性抗体,显示获得了大量表达正确的目的蛋白。【结论】确定了API基因的最佳表达条件,获得了较大表达量的API融合蛋白。
- 苏文强胡鑫宇王秋霞欧长波郭爱疆李辉骆学农余燕张艳红姜金庆刘兴友马金友王松才学鹏
- 关键词：猪囊尾蚴原核表达
- Ghrelin及其相关基因mRNA在海兰褐蛋鸡不同产蛋阶段的表达变化被引量：3
- 2017年
- 本文旨在探讨海兰褐蛋鸡Ghrelin、Ghrelin受体(GHSR)和Ghrelin酰基转移酶(GOAT)在产蛋周期不同阶段的表达变化规律,为通过诱导Ghrelin表达促进蛋鸡卵泡生长发育以提高产蛋率及延长产蛋周期提供理论依据。应用ELISA检测蛋鸡产蛋周期血浆和卵巢Ghrelin含量,实时定量PCR检测腺胃与卵巢Ghrelin、GHSR和GOAT表达变化。结果表明:不同产蛋阶段外周血Ghrelin的含量和腺胃中Ghrelin、GHSR和GOAT mRNA的表达变化不明显;产蛋高峰期卵巢中Ghrelin mRNA表达水平比产蛋前期升高98.2%(P<0.05),而产蛋后期Ghrelin表达水平比产蛋高峰期有所下降(P>0.05);GHSR和GOAT的表达模式和Ghrelin基本一致,均表现为产蛋高峰期表达量最高,产蛋后期略有下降,产蛋高峰期GHSR和GOAT mRNA表达水平显著高于产蛋前期和产蛋后期(P<0.05),但产蛋前期和后期差异不显著(P>0.05)。推测海兰褐蛋鸡卵巢中Ghrelin、GHSR和GOAT的转录表达水平与产蛋周期具有一定的相关性。
- 胡善明李家俊孙浩赵莹马金友张艳红余燕
- 关键词：GHRELIN产蛋周期海兰褐蛋鸡
- IBDV感染雏鸡不同组织Mx基因的分布研究
- 2017年
- 为了探究传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染雏鸡后抗病毒基因Mx在其体内不同组织的表达变化,试验以IBDV感染3天(22日龄)的SPF蛋鸡为研究对象,应用实时荧光定量PCR方法,检测了IBDV感染组雏鸡与对照组雏鸡法氏囊、盲肠扁桃体、脾脏、胸腺、肝脏、腺胃、十二指肠、卵巢等组织中Mx mRNA和IBDV VP2 mRNA表达水平。结果表明:IBDV感染雏鸡3 d后,Mx mRNA在盲肠扁桃体中表达水平最高,显著高于其他组织(P<0.05);其次为法氏囊和肝脏;卵巢表达量最低(P<0.05)。IBDV感染组雏鸡各组织Mx mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。IBDV感染雏鸡3 d后,IBDV VP2 mRNA在法氏囊中的表达量最高(P<0.05),脾脏次之,其他被检组织无统计学差异(P>0.05)。说明雏鸡感染IBDV 3 d后,IBDV载量在免疫器官较非免疫器官高;抗病毒基因Mx转录表达水平相对都比较高,其转录表达水平与器官的病毒载量没有明显的相关性。
- 刘婷宇马艺源陶换李家俊孙浩胡善明张艳红余燕马金友
- 关键词：MX基因VP2
- 原儿茶酸在提高畜禽免疫功能中的应用
- 本发明公开了原儿茶酸的新用途，即在促进畜禽免疫功能方面，特别是维持畜禽外周血CD4+/CD8+T细胞动态平衡、调节细胞因子分泌等方面的新应用。本发明评价了原儿茶酸对家禽免疫功能，特别是对T细胞分化的影响，按照每公斤体重2...
- 欧长波王秋霞余燕张艳红姜金庆姚四新崔艳红马金友胡建和刘兴友
- 文献传递
- 不同传染性法氏囊病病毒株感染对CCL19-CCR7轴系表达量的影响
- 2022年
- 为了解不同毒株传染性法氏囊病病毒(IBDV)对CC类趋化因子配体CCL19及其受体CCR7基因表达量的影响,探明趋化因子在IBDV致病中的作用,本试验分别用经典毒株CJ801和本地分离毒株HN-1对SPF鸡进行攻毒,攻毒成功后取法氏囊提取总RNA,反转录后荧光定量分析,检测CCL19-CCR7轴系基因mRNA表达水平的差异。结果显示,经典毒株CJ801攻毒后,趋化因子CCL19及其受体CCR7基因mRNA表达量均于1d时达峰值,3d时显著下降低;而本地分离毒株HN-1攻毒后,趋化因子CCL19及其受体CCR7基因mRNA表达量于1d、3d和5d逐步上升。结果表明,在IBDV经典毒株CJ801和本地分离毒株HN-1感染过程中,CCL19及其受体CCR7基因表达量差异显著,其对T细胞迁移和IBDV复制的影响机制有待进一步探索。
- 王秋霞张新楚富茗王明明王芳卢浪魏小兵余燕张艳红马金友姜金庆欧长波刘兴友
- 关键词：趋化因子趋化因子受体CCL19CCR7表达量
- 一种利用ghrelin促进新生雏鸡免疫器官发育的方法及应用
- 本发明公开了一种利用ghrelin促进新生雏鸡免疫器官发育的方法及应用，其中方法具体是通过在受精蛋开始孵化的第五天至第十五天之间向卵白内注射至少一次ghrelin溶液。本发明实施方法简单，能显著提高鸡胚出壳时法氏囊指数、...
- 余燕张艳红马金友祝勇莫海珍
- 文献传递
- LPS对肉鸡不同组织lncRNA表达的影响
- 2022年
- 【目的】探讨长链非编码RNA (lncRNA)在脂多糖(LPS)诱导的肉鸡系统性炎症反应中的表达情况及与促炎细胞因子白介素1β(IL-1β)和白介素6 (IL-6)基因表达的相关性。【方法】选取21日龄Ross肉鸡10只,随机平均分为LPS组和对照组(CK),分别腹腔注射0.5 mg/kg LPS及相应体积生理盐水,于处理后2 h采集肌肉、肝脏及脾脏组织备用。以β-actin为内参基因,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测3种组织样品中IL-1β、IL-6 mRNA的相对表达量。依据已报道的数据,选择肉鸡14个高表达lncRNA,采用RT-qPCR检测其相对表达量,并分析其与IL-1β和IL-6基因mRNA表达量的相关性。【结果】LPS处理后2 h,肉鸡各组织中IL-1β和IL-6基因mRNA表达量均极显著高于CK组。与CK组相比,LPS组肉鸡肌肉中lnc0035、lnc0181和TCO873的相对表达量显著或极显著升高,lnc0119和lnc0151的相对表达量显著或极显著降低;肝脏中lnc0035、lnc0181、lnc0202、TCO354、TCO873和pouBW1的相对表达量显著或极显著升高,lnc0119、lnc0151、TCO501和lncDHCR24的相对表达量显著或极显著降低;脾脏中lnc0181、lnc0202、TCO619和TCO873的相对表达量显著升高,lnc0035、lnc0119、lnc0128和lncDHCR24的相对表达量显著或极显著降低。lnc0035、lnc0119、lnc0181、TCO873 4种lncRNA在3种组织中的表达量与IL-1β、IL-6 mRNA表达量的相关性分析结果显示,肌肉中,除lnc0035与IL-6 mRNA表达量无显著相关性外,其他3个lncRNA均与IL-1β和IL-6 mRNA的表达量呈显著或极显著相关;肝脏中,lnc0035、TCO873与IL-1β和IL-6的mRNA表达量均呈显著正相关;脾脏中,TC0873表达与IL-1β和IL-6的mRNA表达量呈极显著正相关,其余3个lncRNA均与IL-6 mRNA表达量呈显著或极显著相关。【结论】LPS能诱导肉鸡不同组织中多个lncRNA的表达产生差异,且lncRNA的表达与促炎细胞因子的IL-1β和IL-6基因表达存在显著或极显著相关性,提示lncRNA可能参与了LPS诱导的全身性炎症
- 陈燕涛赵坤祖良鹏景梦娜张艳红郭锋
- 关键词：长链非编码RNA肉鸡促炎细胞因子基因表达
- 一种解淀粉芽孢杆菌LL-2及其应用
- 本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种解淀粉芽孢杆菌LL‑2及其应用。本发明从艾草种植地土壤中分离纯化，并且鉴定得到一种可用于发酵的益生菌，具体为解淀粉芽孢杆菌LL‑2。该菌株和黑曲霉用于艾草发酵时，对于艾草多糖和艾草黄...
- 王秋霞卢浪马景周魏小兵李鹏李凌薇刘兴友余燕张艳红
