秦晓东 作品数:13 被引量:21 H指数:3 供职机构: 敦化市动物检疫站 更多>> 相关领域: 农业科学 文化科学 更多>>
熊源粪肠球菌EfaA基因的原核表达及多克隆抗体的制备 <正>为了检测熊源粪肠球菌心内膜炎抗原(EfaA)基因,并制备更有针对性的地区性抗体,本试验根据NCBI登录(登录号:U03756)的粪肠球菌EfaA基因序列,合成了1对扩增全部CDS区(938 bp)的PCR引物。克隆... 秦晓东 楚熹橦 孙福亮 鲁承文献传递 熊源粪肠球菌的分离鉴定及其EfaA基因表达蛋白的小鼠免疫 粪肠球菌(E.faecalis)是革兰氏阳性致病菌,其血清型为D型,可引起人类的多种疾病,包括败血症,尿路感染,心内膜炎和脑膜炎等,粪肠球菌所致疾病占人体肠道球菌感染的80-90%。粪肠球菌同时也是动物机体内常驻菌,其能... 秦晓东关键词:粪肠球菌 小鼠免疫 文献传递 东北黑熊粪肠球菌的分离鉴定及药敏分析 被引量:4 2017年 为了分离、鉴定黑熊粪肠球菌延边株,以及预防粪肠球菌在该区养熊业的流行,试验利用死亡黑熊为试验材料,无菌采集病料并分离病原体进行培养,应用革兰氏染色镜检、生化反应及AMOSPCR分子生物学方法进行初步鉴定,对分离得到的菌株进行豚鼠毒力试验和药物敏感试验。结果表明:分离得到的菌株为革兰氏阳性双球菌,经生化试验和PCR鉴定为粪肠球菌,该菌对豚鼠的最小致死量为5.4×10~7cfu/500μL,对头孢唑啉、万古霉素、磷霉素、青霉素、链霉素、庆大霉素较为敏感,对磺胺甲氧嘧啶耐药。 秦晓东 向碧琪 鲁承 王振亮 孙福亮关键词:粪肠球菌 药敏试验 东北黑熊源粪肠球菌EfaA基因原核表达载体构建及生物信息学分析 引言粪肠球菌(Enterococcus faecalis)属肠球菌属,起初命名为粪链球菌,1984年由Schleifer和Kilpper Boilg将其转入新成立的肠球菌属。粪肠球菌已经成为医院内感染的第二大病原,但在动... 秦晓东 楚熹橦 向碧琪 鲁承 孙福亮文献传递 延边地区圈养黑熊链球菌病的诊断及防治 2016年 链球菌病主要是由β溶血性链球菌引起的多种人兽共患病的总称。动物链球菌病中主要以猪、马、牛、羊较为常见。近年来,有报道指出,牦牛、水貂、兔和鱼类也会发生链球菌病。链球菌病的在临床表现中存在多样性,其病理变化过程通常为化脓创和菌血症,有的仅引起局限性的感染。 鲁文花 秦晓东 孙福亮 王振亮 李美兰 金昌范 鲁承关键词:链球菌病 菌血症 人兽共患病 链球菌感染 东北黑熊粪肠球菌PCR检测方法的建立及应用 被引量:3 2016年 为建立一种基于细菌16S r DNA的粪肠球菌PCR检测方法,用于快速检测东北黑熊粪肠球菌感染病例,通过死亡黑熊脏器中提纯的粪肠球菌测序结果与NCBI中的粪肠球菌16S r DNA序列(登录号:NZ_AJXO01000024.1)的比对,设计了1对特异性PCR引物,并对PCR反应条件、敏感性和特异性进行了测定。结果表明,扩增条带与预期的产物大小一致,经过测序结果分析,证明该条带为目的条带,其他种属的菌株未见条带;并且当引物工作剂量为0.2 L、酶工作剂量为0.15 L就可以扩增出清晰的目的条带,该方法的最小检出量为86 CFU;通过对13头份来自延边熊场的患病(4头)和健康(9头)黑熊粪便检测,患病样本检验结果均为PCR阳性,表明该特异性PCR诊断方法能简易、快捷地检测粪肠球菌,为进一步建立黑熊粪肠球菌病的诊断方法提供理论依据,同时也为黑熊疾病的防治奠定了临床基础。 向碧琪 秦晓东 鲁承 孙福亮关键词:粪肠球菌 PCR 红曲霉素——中药合生元对京红鸡免疫的影响 被引量:2 2016年 用红曲霉素——中药合生元作为饲料添加剂对京红鸡进行30天喂养试验,于喂养试验结束后测定京红鸡的血液指标和脏器系数并对京红鸡的法氏囊和脾脏进行组织学检查。结果表明,试验组京红鸡的血液指标以及脏器系数与空白组有差异,法氏囊细胞凋零时间延长。试验证明在饲料添加剂中添加适量红曲霉素可以增强京红鸡的免疫能力。 耿亚娜 秦晓东 胡彦博 刘超 梁晚枫关键词:免疫能力 熊源粪肠球菌EfaA基因的原核表达 被引量:2 2018年 试验旨在构建EfaA基因的原核表达质粒,并对其进行表达。根据GenBank中粪肠球菌EfaA基因序列(登录号:U03756)设计合成1对引物,利用PCR法扩增、克隆EfaA基因,并进行生物信息学分析,将EfaA基因亚克隆于pGEX-4T-1原核表达载体,构建pGEX-4T-EfaA原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达,筛选最佳诱导时间并分析其表达蛋白的生物学特征。结果发现,试验成功获得大小为873bp的粪肠球菌EfaA基因。经IPTG诱导后,获得分子质量约为59ku的EfaA重组蛋白,以37℃、0.5 mmol/L IPTG诱导6h表达量最大。经Western blotting分析发现,具有较好的反应原性。本试验成功构建原核表达质粒pGEX-4T-EfaA,并在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中成功表达。 楚熹橦 秦晓东 鲁承 孙福亮关键词:黑熊 粪肠球菌 原核表达 利用微卫星血液DNA标记分析延边圈养黑熊遗传多态性 2015年 为了掌握圈养黑熊的相关遗传信息,试验采用微卫星血液DNA标记法研究圈养黑熊的遗传多态性,试验选择延边地区3个熊场175头圈养黑熊,对其进行遗传多态性检测,计算其等位基因频率、多态信息含量(PIC)等。结果表明:圈养黑熊的6个微卫星座位总共检测到39个等位基因,每个位点的等位基因数量为4.000~8.000个,每个微卫星的平均位点为6.500个,基因频率分布在0—1之间;6个微卫星基因座的平均PIC为0.5717,且PIC值在0.4534—0.7422之间,廷边3个黑熊养殖群体的平均PIC均高于0.5,表明6个微卫星标记均具有高度多态性,因此可以分析圈养黑熊的遗传多态性。 秦晓东 高建伟 鲁承 孙福亮关键词:微卫星 多态性 大熊猫犬瘟热研究进展 被引量:6 2016年 由农业部最新公布的动物疫病病种名录可知犬瘟热属于三类动物疫病。在犬所患的各种疾病中,犬瘟热无论是传染强度,病情的严重程度,还是死亡率都可列为榜首。不仅如此,大熊猫对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)也有高度易感性,并且犬瘟热已经成为威胁大熊猫种群数量和生命安全的第一大烈性传染病。至今为止,对于该病的防治措施除定期进行免疫接种外,全球范围内尚无特异性治疗方法。因而对于大熊猫而言,早期诊断和有效预防该病显得尤为重要。现将国内外大熊猫犬瘟热的临床诊断和疫苗免疫现状综述如下。 胡彦博 秦晓东 梁晚枫关键词:大熊猫 犬瘟热 疫苗