刘红博
- 作品数：18 被引量：3H指数：1
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- 在竞争性抑制剂保护下用针对氨基的活化聚乙二醇修饰尿酸酶的方法
- 一种在竞争性抑制剂保护下用针对氨基的活化聚乙二醇修饰尿酸酶的方法，其特征在于用黄嘌呤或氧嗪酸等竞争性抑制剂，在碱性硼酸盐或磷酸盐缓冲液中用针对氨基的活化聚乙二醇修饰尿酸酶，可用但不限于用聚乙二醇单甲醚的丁二酸活泼酯、聚乙...
- 廖飞杨晓兰张纯刘红博高昂
- 文献传递
- 一种用4-硝基-1-萘酚或其衍生物为显色团制备β-半乳糖苷酶显色底物的方法及其应用
- 一种用4-硝基-1-萘酚或其衍生物为显色团制备β-半乳糖苷酶显色底物的方法及其应用；先将β-D-吡喃半乳糖所有羟基用包括但不限于甲酸和乙酸的短链羧酸生成酯，再与HBr的甲酸或乙酸溶液反应得α-溴代半乳糖多羧酸酯，进一步在...
- 廖飞杨晓兰党纪政刘红博张奕李元丽
- 文献传递
- 测定谷胱甘肽-S-转硫酶动力学参数的变化表征其抑制剂被引量：3
- 2011年
- 目的:测定谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferases,GST)动力学参数变化,建立表征其抑制剂的方法。方法:从猪肝经阴离子交换层析和亲和层析制备GST酸性同工酶,用还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和1-氯-2,4-二硝基苯(1,-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)合成S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)为候选抑制剂,以GSH与CDNB为底物测定GST在GS-DNB作用下的米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),从而确定GS-DNB对GST的抑制常数(Ki)。结果:此GST被纯化146倍以上,活性总收率近30%。该GST对GSH和CDNB的Km分别为42μmol/L和0.86 mmol/L,属于随机双底物动力学模型。GS-DNB对CDNB竞争性Ki为(21±1)μmol/L(n=2);对GSH竞争性Ki为(17±1)μmol/L(n=2)。结论:产物GS-DNB是GST的高亲和力竞争性抑制剂;测定GST动力学参数随抑制剂浓度的变化可筛选其抑制剂。
- 张灵杨晓兰白婧廖娟刘红博廖飞
- 关键词：谷胱甘肽-S-转移酶抑制剂还原型谷胱甘肽
- 用两端带羧基的直链亲水聚合物包被纳米磁芯制备微纳米磁性材料的方法及其应用
- 一种用两端带羧基的直链亲水聚合物包被磁流体制备微纳米磁性材料的方法及其应用；具体涉及将两端为羟基或氨基的聚乙二醇或寡聚甘氨酸链与马来酸酐、琥珀酸酐反应得两端有羧基但仅有一个或两个碳碳双键的单体；用化学共沉淀法制备纳米磁芯...
- 廖飞杨晓兰龙高波蒲军刘红博李元丽
- 文献传递
- 一种用4-硝基-1-萘酚或其衍生物为显色团制备β-半乳糖苷酶显色底物的方法及其应用
- 一种用4-硝基-1-萘酚或其衍生物为显色团制备β-半乳糖苷酶显色底物的方法及其应用；先将β-D-吡喃半乳糖所有羟基用包括但不限于甲酸和乙酸的短链羧酸生成酯，再与HBr的甲酸或乙酸溶液反应得α-溴代半乳糖多羧酸酯，进一步在...
- 廖飞杨晓兰党纪政刘红博张奕李元丽
- 文献传递
- 尿酸酶突变体的高通量筛选方法
- 2015年
- 建立一种尿酸酶突变体的高通量筛选方法。将野生型苛求芽孢杆菌尿酸酶及其突变体的表达载体转入大肠杆菌,每个克隆诱导培养后超声裂解上清液为样品,全自动酶标仪测定293 nm光吸收,并分析反应启动后8～28 min的数据计算酶活性,Bradford法测定总蛋白;ROC比较用酶活性或比活性识别阳性突变体的可靠性。任2种突变体酶活性或比活性比值〉2时,ROC分析曲线下面积接近1;当酶活性或比活性仅增加50%时,分析比活性所得曲线下面积比分析酶活性更大,将ROC分析比活性提高近1倍。突变体敏感度达90%时,比活性为判断阳性突变体阈值,其相当于以起始物比活性均值加1.7倍标准差;此阈值能用于高通量筛选变体库中比活性增加1倍以上的阳性突变体。
- 廖娟刘红博高昂杨晓兰李元丽廖飞
- 关键词：尿酸酶
- 一种新型巯基显色剂、其制备方法与应用
- 一种新型巯基显色剂、其制备方法与应用，该新型巯基显色剂为5，5′-二硫双-(2-硝基苯乙酸)，用3-氯苯乙酸硝化、与二硫化钠反应制备；该显色剂与烷基硫醇或巯基反应时二硫键被还原断裂，所释放的(2-硝基-5-巯基)-苯乙酸...
- 廖飞刘霖杨晓兰刘红博王昕李元丽
- 文献传递
- 用多波长吸收单通道同步测量多种酶活性的方法
- 本发明公开了一种用多波长吸收单通道同步测量多种酶活性的方法；基于光吸收线性加和性及酶显色底物与其对应显色产物的等吸收波长，建立多波长吸收同步测量单通道同步测定多种酶活性所需显色底物组合设计原理及消除吸收光谱重叠干扰的数据...
- 廖飞杨晓兰刘红博党济政龙高波李元丽刘霖
- 联用酶反应过程分析法和终点平衡法测定酶底物量的方法
- 一种联用终点平衡法和酶反应动力学过程分析法处理酶反应过程数据测定酶底物量的方法；连续记录的酶反应曲线中相邻数据间信号变化超过仪器噪声两倍者为有效数据；测定加入少量酶液前的检测信号，校正酶液稀释效应得校正后起点信号；酶反应...
- 廖飞杨晓兰龙高波刘红博廖娟
- 文献传递
- 用4-硝基-1-萘磷酸酯为底物测定碱性磷酸酶活性
- 2013年
- 目的：合成4-硝基-1-萘磷酸酯（4-nitro-1-naphthyl phosphate,NNPP）为显色底物测定牛小肠黏膜碱性磷酸酶（alka-line phosphatase,ALP）。方法：4-硝基-1-萘酚（4-nitronaphthol,4-NNP）与三氯氧磷反应,经硅胶柱纯化制得NNPP;检测产物吸收跟踪水解过程测定初速度,双倒数法测定米氏常数（Michaelis-Menten constant,Km）。结果：ALP水解NNPP产物最大差吸收峰接近460 nm,等吸收波长接近405 nm。与p-硝基苯酚相比,在pH 6.0~7.0间4-NNP消光系数为其3倍以上,在pH 7.0以上为其2倍以上。ALP对NNPP的Km约12μmol/L而p-硝基苯基磷酸酯的Km约35μmol/L,产物磷酸相对NNPP的竞争性抑制常数接近20μmol/L。ALP催化NNPP水解效率接近水解p-硝基苯基磷酸酯的40%。结论：NNPP可用于测定ALP活性,且有望与作用于p-硝基苯酚类显色底物的其它酶联用实现单通道两种酶同步测定。
- 党济政刘红博杨宪锋杨晓兰龙高波李元丽蒲军廖飞
- 关键词：碱性磷酸酶
