郑巍
- 作品数:2 被引量:4H指数:2
- 供职机构:四川大学化学工程学院更多>>
- 相关领域:理学更多>>
- 基于流动注射光度法的吸光度/留存时间比自动测定过氧化物酶活性方法被引量:2
- 2015年
- 本研究给出了流动注射分光光度系统(FI-SP)测定酶活性浓度(Ec)的通用公式Ec=kΔA/Δt;Δt是在酶促反应线性响应区域内试样塞的平均留存时间;ΔA为平均留存时间处对应的吸光度;k=n V/(εv L),V为样品注入点到流通池入口之间的管路总容积,n为酶底物与产物的反应摩尔比,ε为产物的摩尔吸收系数,v为注入的酶液体积,L为流通池光程;FI-SP系统确定后k为常数。在此基础上,将H2O2/过氧化物酶(POD)/愈创木酚(GA)反应体系导入FI-SP系统,建立了一种无需标准曲线的POD活性快速准确测定的新方法。此方法优化后的条件:载流磷酸盐缓冲液浓度为0.05 mol/L(p H 5.5),进样体积为40μL,反应盘管长度200 cm,1.5 mmol/L H2O2,3.5 mmol/L GA,0.4 mol/L HCl(清洗液),检测波长470 nm,产物的摩尔吸光系数为0.0125 L(μmol·cm)。本方法的重现性RSD〈0.38%(n=11),分析速度为40样/h,测定范围为450~7260 U/L,检出限为89 U/L。在优化条件及60℃下,用本方法测定了多种白萝卜中POD活性,结果与动力学曲线法完全相同。
- 李永生郑巍高秀峰
- 关键词:流动注射分析过氧化物酶愈创木酚
- 流动注射-分光光度法测定萝卜中过氧化物酶的活性被引量:2
- 2016年
- 采用流动注射-分光光度法测定萝卜中过氧化物酶的活性。优化的试验条件如下:①反应温度为60℃;②载流为pH 5.5的0.05mol·L^-1磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液;③采样体积为40μL;④反应盘管长度为200cm;⑤反应试剂为1.5mmol·L^-1过氧化氢,3.5mmol·L^-1愈创木酚的混合液。2-愈创木酚的表观摩尔吸光率为0.012 5L·μmol-1·cm^-1。辣根过氧化物酶的线性范围为454~7 265 U·L^-1,检出限(3s/k)为7 U·L^-1。方法的加标回收率在94.2%~107%之间。对500,2 500U·L^-1的辣根过氧化物酶标准溶液连续测定11次,测定值的相对标准偏差小于0.62%。
- 郑巍李永生赵炀高秀峰
- 关键词:分光光度法流动注射过氧化物酶萝卜