石永杰
- 作品数：12 被引量：18H指数：3
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IQ结构域GTP酶激活蛋白3对HepG2细胞顺铂耐药的影响被引量：3
- 2021年
- 目的探讨IQ结构域GTP酶激活蛋白3(IQ domain GTPase-activating protein 3, IQGAP3)对人肝癌HepG2细胞顺铂耐药的影响及作用机制。方法冻存HepG2细胞株,其中对照组细胞正常培养,IQGAP3组细胞转染IQGAP3,shIQGAP3组细胞转染shIQGAP3,采用Western blot法检测3组IQGAP3蛋白相对表达量。3组细胞均加入顺铂进行培养,采用MTT法检测培养第1-5天细胞存活率,采用实时荧光定量PCR法检测细胞Nanog mRNA、Oct4 mRNA、Bmi1 mRNA、c-Myc mRNA、cyclinD1 mRNA相对表达量,基因集合富集分析GO、KEGG数据库肝细胞癌样本数据中IQGAP3表达与Wnt/β-catenin通路的关系,采用Top/Fop双荧光素酶报告基因实验检测细胞β-catenin激活程度(Top/Fop比值),采用Western blot法检测细胞β-catenin核浆比例。shIQGAP3组细胞再分为shIQGAP3-氯化锂(lithium chloride, LiCl)组和shIQGAP3对照组,其中shIQGAP3对照组加入顺铂进行培养,shIQGAP3-LiCl组加入顺铂+LiCl进行培养,采用MTT法检测2组培养第1-5天细胞存活率,采用Top/Fop双荧光素酶报告基因实验检测细胞β-catenin激活程度(Top/Fop比值)。结果 IQGAP3组细胞IQGAP3蛋白相对表达量(9.13±0.42)均高于对照组(1.08±0.25)和shIQGAP3组(0.42±0.07)(P<0.05),对照组高于shIQGAP3组(P<0.05)。培养第3-5天,IQGAP3组细胞存活率均高于对照组和shIQGAP3组(P<0.05),对照组高于shIQGAP3组(P<0.05);培养第1-5天,IQGAP3组、shIQGAP3组、对照组细胞存活率均依次降低(P<0.05)。IQGAP3组细胞Nanog mRNA、Oct4 mRNA、Bmi1 mRNA、c-Myc mRNA、cyclinD1 mRNA相对表达量均高于对照组和shIQGAP3组(P<0.05),对照组高于shIQGAP3组(P<0.05)。GO、KEGG数据库肝细胞癌样本数据分析结果显示,活化的Wnt/β-catenin信号通路在IQGAP3表达上调的样本中富集(富集分数=0.497,P<0.001;富集分数=0.527,P<0.001);IQGAP3组细胞β-catenin核浆比例(3.61±0.24)和Top/Fop比值(2.61±0.29)均高于对照组(0.98±0.14、1.13±0.08)和shIQGAP3组(0.25±0.03、0.57±0.13)(P<0.05),�
- 黄思聪石永杰周强嘉红云申刚
- 关键词：肝细胞癌顺铂耐药WNT/Β-CATENIN通路HEPG2细胞
- miR-106b在肝癌细胞中激活Wnt通路被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨肝癌细胞中miR-106b对Wnt/β-catenin信号传导通路的影响。方法:改变肝癌细胞中miR-106b表达,TOP/FOP荧光素酶试验检测Wnt/β-catenin信号通路活性的变化;Real-time PCR方法检测Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的改变;Western blotting方法检测细胞核内β-catenin表达改变。结果:过表达miR-106b,肝癌细胞中TOP/FOP荧光比值显著增加,其下游6个靶基因mRNA表达量也显著上调。而抑制miR-106b,则下调荧光比值和下游靶基因的表达。同时发现,miR-106b表达,促进QGY-7703细胞核内β-catenin表达增加,而抑制miR-106b,则核内β-catenin下调。结论:miR-106b在肝癌细胞中可激活Wnt/β-catenin信号通路。
- 嘉红云黄思聪陈浩宇石永杰黄海樱邓小燕申刚
- miR-26b对HepG2细胞肿瘤干性的抑制作用被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨miR-26b对人肝癌细胞HepG2肿瘤干性的影响。方法:分别用miR-26b模拟物和抑制物瞬染HepG2细胞;体外成球实验检测HepG2细胞体外成球能力、real-time PCR检测肿瘤细胞干性基因Nanog/OCT4/BMI1/ABCG2的改变。结果:与对照组HepG2细胞对比,miR-26b过表达细胞的成球能力减弱,4种干性基因表达均下降;反之,miR-26b抑制细胞的成球能力明显增加,干性基因Nanog/OCT4/BMI1/ABCG2表达出现不同程度的上升。结论:miR-26b能降低HepG2肿瘤细胞的干性。
- 嘉红云石永杰潘嘉韵黄思聪
- 关键词：HEPG2细胞
- MiR-105抑制肝癌细胞增殖能力的实验研究被引量：7
- 2017年
- 目的探讨miR-105对人肝癌细胞增殖的影响及可能机制。方法改变QGY-7703及Hep G2两种细胞的miR-105表达,细胞克隆形成实验和软琼脂增殖试验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞仪检测细胞周期改变。结果细胞克隆形成和软琼脂增殖实验显示,过表达miR-105可抑制QGY-7703及Hep G2细胞增殖,反之抑制miR-105表达则促进细胞增殖;细胞流式检测显示miR-105过表达能促进两种癌细胞G0/G1期阻滞。结论 miR-105抑制肝癌细胞增殖,其机制与引起细胞周期阻滞有关。
- 李勇传石永杰嘉红云黄思聪
- 关键词：肝细胞癌细胞增殖细胞凋亡
- FK506、肾功能指标及单个核细胞计数判断肾移植患者尿BKV DNA阳性的价值被引量：1
- 2021年
- 目的探讨血FK506、尿素、肌酐(Cr)及单个核细胞计数判断肾移植患者尿BK病毒(BKV)DNA阳性的价值。方法检测197例肾移植患者尿BKV DNA及血FK506、尿素、Cr、淋巴细胞百分比(LYMPH%)、淋巴细胞绝对值(LYMPH#)、单核细胞百分比(MO%)、单核细胞绝对值(MO#)。以尿BKV DNA≥2.0×10^(3)拷贝/mL为BKV阳性组,<2.0×10^(3)拷贝/mL为BKV阴性组。另选取21例术后3~6个月内多次检测尿BKV DNA,并首次出现阴性转阳性的患者进行配对比较。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标判断尿BKV DNA阳性的效能。采用Pearson相关分析或Spearman相关分析评估各项指标与尿BKV DNA载量的相关性。对比21例患者首次出现尿BKV DNA由阴性转阳性时各项指标的变化。结果BKV阳性组FK506、尿素、Cr水平高于BKV阴性组(P<0.05),2个组之间LYMPH%、LYMPH#、MO%、MO#差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果显示,尿BKV DNA载量与血FK506水平呈正相关(r=0.466,P<0.001),与尿素、Cr无相关性(r值分别为0.157、0.156,P>0.05)。ROC曲线分析显示,FK506、尿素和Cr判断尿BKV DNA阳性的曲线下面积(AUC)分别为0.685、0.581、0.606,最佳临界值分别为7.05 ng/mL、7.20 mmol/L、100.5μmol/L,敏感性分别为58.3%、71.4%、83.3%,特异性分别为74.3%、46.0%、38.1%。与尿BKV DNA阴性时比较,同一患者首次出现尿BKV DNA阳性时的FK506水平明显升高(P<0.001),尿素及Cr水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论血FK506对判断肾移植术后患者尿BKV DNA阳性有一定价值。
- 黄思聪石永杰嘉红云
- 关键词：FK506肾功能指标BK病毒肾移植
- BAIAP2L1对肝细胞肝癌迁移和侵袭能力的影响
- 目的：探讨BAIAP2L1在肝癌细胞迁移、侵袭中的作用。方法：Real-time PCR、Western blot方法检测BAIAP2L1在肝癌细胞系中的表达情况;构建BAIAP2L1过表达和干扰的质粒,瞬时转染肝癌细胞...
- 石永杰周强邓小燕吴晓蔓黄思聪嘉红云
- 关键词：HCC迁移
- 干扰素α-2b对丙肝患者血清铁调素的影响
- 2017年
- 目的:探讨干扰素α-2b(IFNα-2b)对丙肝患者血清铁调素(Hepcidin)的影响及分析其可能机制。方法:(1)按3个月内曾否接受IFNα-2b治疗把37例丙肝患者归为治疗组(n=25)及未治疗组(n=12),分析2组血清Hepcidin的差异。(2)用逐渐增量(0、50、100、200、400μL)的IFNα-2b处理Hep G2及LO2细胞24 h,real-time PCR检测细胞Hepcidin、白细胞介素6(IL-6)、信号转导与转录激活子3(STAT3)的mRNA表达量,Western blot检测细胞STAT3及磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白水平,分析其变化。结果:治疗组血清Hepcidin低于未治疗组(P<0.05)。随IFNα-2b浓度增加,HepG2及LO2细胞Hepcidin mRNA表达逐渐下调(P<0.05),IL-6和STAT3的mRNA变化趋势不明显;pSTAT3蛋白水平逐步下降(P<0.05),STAT3蛋白水平不呈递减改变。结论:丙肝患者接受IFNα-2b治疗后血清Hepcidin浓度降低可能是由于IFNα-2b抑制了肝细胞Hepcidin基因表达,其机制可能与STAT3通路磷酸活化受阻有关。
- 黄思聪石永杰陈旖鹛李哲嘉红云吴晓蔓
- 关键词：丙型肝炎铁调素干扰素Α-2B
- 丝氨酸精氨酸蛋白激酶1在体外促进HepG2细胞干性的获得
- 2022年
- 目的研究丝氨酸精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)对肝癌细胞株HepG2肿瘤干性的作用。方法从GEPIA2数据库获得TCGA中关于肝细胞肝癌(LIHC)的数据,分析SRPK1表达在癌组织及正常样本的差异,以及与患者生存时间、临床分期的关系。采用TIMER数据库分析SRPK1表达与肝癌组织中浸润免疫细胞的相关性。构建SRPK1过表达和抑表达的HepG2稳转细胞株,并根据SRPK1表达差异分为SRPK1组及对照的Vector组,shRNA组及对照的Scramble组,Western blot检测4组细胞株SRPK1的蛋白水平。体外成球实验检测肿瘤细胞的成球能力,流式细胞术检测侧群(SP)细胞在细胞群中的比例。实时荧光定量PCR比较细胞肿瘤干性标记物Nanog、Oct4、CD133及Bmi1的mRNA水平。基因集合富集分析(GSEA)预测SRPK1与Wnt/β-catenin通路的相关程度。结果SRPK1表达在LIHC患者肿瘤组织中显著高于正常组织(P<0.05),在患者各个分期中表达有差异(P<0.05),高表达SRPK1患者生存率低于低表达SRPK1患者(P<0.05),肝癌组织中SRPK1与B细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突细胞的浸润水平均相关(P<0.05)。Western blot结果显示SRPK1组SRPK1蛋白相对表达量高于Vector组(P<0.01),shRNA组则低于Scramble组(P<0.01)。SRPK1组肿瘤细胞成球率(SFE)、SP细胞比例、Nanog、Oct4、CD133及Bmi1的mRNA相对表达量均高于Vector组(P<0.05),shRNA组低于Scramble组(P<0.05)。GSEA结果显示LIHC中SRPK1高表达与Wnt/β-catenin通路活化正相关(P<0.05)。结论SRPK1促进HepG2细胞肿瘤干性的获得。
- 肖绮雯肖绮雯石永杰周强黄思聪康嘉乐嘉红云
- 关键词：WNT/Β-CATENIN通路
- SRPK1激活Wnt/β-catenin通路促进肝癌细胞上皮间充质转化
- 2023年
- 目的 探讨丝氨酸精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)对肝癌细胞株HepG2上皮间充质转化(EMT)的作用。方法 通过Ualcan及TIMER 2.0数据库分析SRPK1 mRNA在肝细胞癌(LIHC)与正常样本、配对癌旁样本之间的表达差异,与生存时间、临床分期、病理分期、TP53变异、人种、性别、年龄、体重等临床资料的关系。用HPA数据库的免疫组化数据验证SRPK1蛋白在LIHC组织及正常对照间的表达差异。构建SRPK1过表达及抑表达的HepG2细胞,并根据SRPK1表达差异分为SRPK1组及对照的Vector组,shRNA组及对照的Scramble组。Western blot检测4组细胞株SRPK1的蛋白水平。Western Blot、免疫荧光检测EMT分子标记物E-cadherin、Vimentin蛋白表达差异。核浆蛋白分离比较细胞β-catenin入核程度的变化。GEPIA2数据库分析在LIHC组织中SRPK1与Wnt/β-catenin通路下游基因Twist、MYC、MMP9的相关性,Real-time PCR验证SRPK1对Twist、MYC、MMP 9表达的影响。结果 SRPK1表达在LIHC组织中表达显著高于正常对照及配对癌旁样本(P<0.05),随疾病分期及病理分级增加而增加(P<0.05),高表达SRPK1组总生存期低于低表达组(P=0.035),LIHC患者TP53突变组SRPK1表达高于非突变组(P<0.05),在不同种族、性别、年龄、体重间无差别(P>0.05)。SRPK1过表达HepG2细胞E-cadherin表达下降,Vimentin表达增加(P<0.05);抑表达细胞E-cadherin增加,Vimentin下降(P<0.05)。SRPK1在LIHC组织中分别与Twist、MYC、MMP9表达呈正相关性(P<0.05);SRPK1过表达细胞β-catenin蛋白在细胞核中表达增加(P<0.05),Twist、MYC、MMP9表达增加(P<0.05);反之,抑表达细胞β-catenin在细胞核中表达下降(P<0.05),Twist、MYC、MMP9表达减少(P<0.05)。结论 SRPK1可能通过Wnt/β-catenin通路促进HepG2细胞EMT活化。
- 石永杰陈旖鹛黄思聪嘉红云周强魏洁肖绮雯康嘉乐
- 关键词：HEPG2细胞上皮间充质转化WNT/Β-CATENIN通路
- 卵泡抑素样蛋白5对HCCLM3细胞迁移和侵袭的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨卵泡抑素样蛋白5(follistatin-like 5,FSTL5)在不同肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞株中的表达及在HCCLM3细胞迁移、侵袭中的作用。方法取对数生长期HCC细胞(SMMC-7721、HepG2、HCCLM3、MHCC97H、PLC)和永生化正常肝上皮细胞LO2,采用实时荧光定量PCR法检测FSTL5mRNA相对表达量。将对数生长期HCCLM3细胞随机分为转染组和对照组,转染组转染FSTL5的表达质粒,对照组转染空白质粒;转染24h,采用实时荧光定量PCR法检测2组HCCLM3细胞FSTL5mRNA相对表达量,划痕愈合试验检测HCCLM3细胞迁移能力,Transwell小室法检测HCCLM3细胞侵袭能力,三维培养实验检测HCCLM3细胞伪足生长情况。结果FSTL5mRNA相对表达量在SMMC-7721(0.37±0.03)、HepG2(0.43±0.03)、HCCLM3(0.19±0.02)、MHCC97H(0.28±0.02)、PLC细胞(0.35±0.01)均低于LO2细胞(1.04±0.04)(P<0.05),且在HCCLM3细胞表达量最低(P<0.05);转染24h,转染组HCCLM3细胞FSTL5mRNA相对表达量(12.04±1.42)明显高于对照组(1.00±0.25)(P<0.05),划痕愈合率[(24.7±2.4)%]、侵袭细胞数目[(11.7±2.3)%]均明显低于对照组[(86.7±3.7)%、(34.7±5.9)%](P<0.05);三维培养实验结果显示,转染组HCCLM3细胞克隆球未见伪足生成,对照组可见少量伪足生成且延展性较好。结论 HCC细胞(SMMC-7721、HepG2、HCCLM3、MHCC97H、PLC)中FSTL5表达明显降低,过表达FSTL5可抑制HCCLM3细胞迁移和侵袭。
- 谭鸿霞黄健云向蓉石永杰
- 关键词：SMMC-7721HEPG2HCCLM3MHCC97H
