于萍
- 作品数：27 被引量：177H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划动物营养学国家重点实验室开放课题基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程理学更多>>
- 宏基因组学方法分析奶牛瘤胃尿素分解菌的多样性被引量：6
- 2010年
- 利用脲酶保守序列ureC引物和细菌16S rDNA通用引物PCR扩增并测序,揭示奶牛瘤胃尿素分解菌的多样性。提取本研究室前期鉴定的16个脲酶克隆的质粒,利用脲酶保守序列ureC引物和细菌16S rDNA通用引物进行PCR扩增,将PCR产物连接到pMD19-T载体,转化E.coliJM109,挑取阳性克隆测序。利用Blast程序将序列与GenBank和RDP数据库进行比对,并使用Mega 4.0软件构建系统发育树。4个脲酶克隆含有脲酶保守序列ureC,系统发育树分析表明,U1、U5、U13和U15分别属于Firmicutes、ε-Proteobacteria、β-Proteobacteria和Actinobacteria;7个脲酶克隆含有16S rDNA,经过建树分析,U1、U3、U7、U10、U11、U12和U14分别属于Staphylococcus、Shigella、Bacillus、Acinetobacter、Achromobacter、未培养微生物和Bacillales。实验结果显示,奶牛瘤胃微生物脲酶基因和尿素分解菌具有多样性的特点。
- 赵圣国王加启刘开朗李旦于萍
- 关键词：脲酶多样性宏基因组学RDNA
- 基于甲病毒复制子的犬瘟热核酸疫苗的构建及表达性研究
- 2013年
- 本试验利用T-A克隆技术,构建克隆载体pEASY-Blunt-F,BamHⅠ酶切pEASY-Blunt-F,回收F基因,将其克隆至pSCA1真核表达载体中,获得重组质粒pSCA1-F。经DNA测序、限制性内切酶分析和PCR鉴定,结果表明重组质粒pSCA1-F成功构建。通过间接免疫荧光试验和Western blotting证实F基因在转染细胞中表达。此外,细胞凋亡的检测结果表明,pSCA1-F能引起转染的细胞发生凋亡。
- 孙建涛侯绍华于萍朱鸿飞梁欠郝志明
- 关键词：核酸疫苗犬瘟热病毒F基因
- 体外法添加苹果酸与饱和脂肪酸对瘤胃功能菌群数量的影响被引量：4
- 2009年
- 本试验在添加饱和脂肪酸即硬脂酸(Stearic acid,SA)的基础上添加不同水平的苹果酸(Malic acid,MA),采用体外法对瘤胃微生物进行培养,通过实时定量(Real-time)PCR方法检测在添加脂肪酸和苹果酸后,对瘤胃功能微生物如纤毛虫、产甲烷菌,纤维分解细菌、氢化细菌以及脂肪分解菌的数量的影响。实验结果表明,添加硬脂酸后对脂解厌氧弧杆菌(Anaerovibrio lipolytica)和产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)数量产生了显著影响,脂解厌氧弧杆菌数量减少了95.8%(P<0.001),产琥珀酸丝状杆菌数量增加了52.5%(P<0.05)。添加苹果酸后,添加5mmol/L MA处理组的脂解厌氧弧杆菌数量减少了91.2%(P<0.001),添加10mmol/L MA处理组,减少了94.8%(P<0.001),而MA10组比MA5组的该菌数量减少了41.3%(P<0.05)。本研究结论是硬脂酸和苹果酸分别对瘤胃部分微生物产生了显著的影响。二者对瘤胃微生物的互作影响并不显著。
- 李旦王加启卜登攀刘亮刘开朗赵圣国于萍
- 关键词：苹果酸
- 日粮中添加鱼油后肉牛瘤胃细菌区系的变化被引量：4
- 2008年
- 目的:研究肉牛日粮中添加2%鱼油后瘤胃细菌区系的变化。方法:分别于添加鱼油前后取瘤胃液提取总DNA,根据细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA基因序列,分别构建2个16S rDNA基因文库;从每个文库中各随机挑取384个克隆,对阳性克隆用HhaⅠ进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析、聚类,取各RFLP类群中的代表克隆进行16S rDNA序列测定,构建系统发育树,研究细菌区系多样性的变化。结果:添加鱼油前、后,文库的RFLP图谱分别可以分成74和41个RFLP类群;添加鱼油前后的优势菌群均为噬纤维菌-屈挠杆菌-拟杆菌(CFB)和低(G+C)含量的革兰阳性菌(LGCGPB),但添加鱼油后文库中LGCGPB比例降低,而且未检测到纤维菌门细菌;有50%～60%的测定序列与GenBank数据库中的序列相似性高于97%,90%以上为未培养的细菌;添加鱼油后瘤胃细菌的多样性减少。结论:日粮添加鱼油后CFB比例增高但多样性下降,LGCGPB、纤维杆菌比例下降,这一结果为调控瘤胃发酵提供了依据。
- 贺云霞王加启于萍卜登攀刘仕军魏宏阳
- 关键词：瘤胃细菌RDNA限制性片段长度多态性鱼油
- 环境微生物群落结构与功能多样性研究方法被引量：39
- 2010年
- 微生物群落的结构及群落内种间相互作用是影响其生态功能的决定性因素。尽管微生物群落是地球生物化学循环的主要驱动者,但是由于传统的微生物培养方法只能分离约1%10%的环境微生物,对复杂的环境微生物群落结构和功能多样性了解甚少。元基因组学、单细胞分析和群落遗传学等方法的出现,及其与微生物学的交叉融合,使得人们能够从微生物群落组成、物种功能、种间相互作用和预测模型等方面分析微生物群落。重点综述了元基因组学、单细胞分析和群落遗传学等方法及其在环境微生物群落结构和功能多样性中的应用进展。
- 刘开朗王加启卜登攀李旦于萍赵圣国
- 关键词：群落生态学种间相互作用鲁棒性
- 胃肠道微生态的分子生物学技术研究进展被引量：1
- 2008年
- 哺乳动物胃肠道中的小型生物群被赋予高种群密度、广泛的多样性及相互作用的复杂性等特性,它们在宿主营养、生理和免疫等方面起着主要作用。作者综述了研究动物胃肠道微生物的现代分子生物学技术的原理及应用,并展望随着分子生物学技术的飞速发展,对胃肠道微生物的研究将会更加深入,从而为指导实践提供可靠的理论依据。
- 于萍王加启卜登攀贺云霞魏宏阳周凌云刘卉
- 关键词：微生物生态学分子技术
- 乳及乳制品中IgG含量检测方法概述
- 牛奶中免疫球蛋白具有良好的免疫保护功能,被越来越多的添加到乳制品中,这样的乳制品常常按IgG含量来定价,因此,寻求可靠的IgG检测方法越来越重要。本文就目前国际常用的检测方法进行阐述,包括分离层析法、电泳分离法、免疫学方...
- 赵圣国王加启刘开朗董晓丽李旦于萍
- 关键词：IGG乳制品
- 文献传递
- 奶牛瘤胃微生物元基因组文库中脂肪酶的筛选与酶学性质被引量：9
- 2009年
- 利用含有三油酸甘油酯的脂肪酶选择性筛选培养基,从奶牛瘤胃微生物元基因组文库15360个克隆中,筛选得到了18个脂肪酶阳性克隆,其插入片段大约为60kb,并且各个克隆的插入片段各不一样。利用p-NPP法对脂肪酶克隆的脂肪酶活性分析,表明均具有大小不等的脂肪酶活性。底物特异性分析表明Lipase6、Lipase7和Lipase8分别对C16底物(对硝基苯棕榈酸酯)、C12底物(对硝基苯月桂酸酯)和C16底物(对硝基苯棕榈酸酯)水解能力最强。Lipase6、Lipase7、Lipase8的脂肪酶最适pH为7.5;Lipase8的脂肪酶活性半衰期随反应温度的升高而缩短,70oC时能达到30min。本研究所筛选的脂肪酶具有不同的底物特异性和较好的热稳定性,这对于工业化生产具有一定的应用潜力。
- 赵圣国王加启刘开朗朱雅新卜登攀李旦于萍
- 关键词：瘤胃微生物脂肪酶底物特异性最适PH
- T-RFLP技术及其在动物胃肠道微生物群落多样性研究中的应用被引量：3
- 2008年
- 随着分子生物学技术的飞速发展,越来越多的新兴研究手段应用于胃肠道微生态系统的研究之中。介绍了末端限制性片段长度多态性技术(T-RFLP)的基本原理、操作流程和优缺点,并总结了该技术在动物胃肠道微生态研究中的应用现状。
- 于萍王加启卜登攀邓露芳刘开朗
- 关键词：微生物多样性
- DGGE技术及其在瘤胃微生物多样性研究中的应用被引量：1
- 2008年
- 基于可靠性强、重现性高、方便快捷等优点,变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术已经成为微生物群落多样性和动态分析的强有力工具。本文在阐述PCR-DGGE原理及流程的的基础上,对DGGE技术在瘤胃微生物多样性研究中的具体应用及其局限性与改进方法进行了全面阐述。
- 奚晓琦王加启卜登攀栾广春于萍刘开朗魏宏阳周凌云
- 关键词：变性梯度凝胶电泳
