刘小花
- 作品数：12 被引量：25H指数：3
- 供职机构：第三军医大学基础部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在人乳腺癌中的表达及其意义被引量：14
- 2012年
- 目的:探讨HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在人乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法,检测术前未使用放疗、化疗及激素治疗的69例乳腺癌组织中HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin的表达情况。采用RT-PCR方法检测乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin mRNA的表达情况。结果:免疫组化结果表明:在69例乳腺癌组织中,HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin的阳性率分别为71.01%、42.03%、43.48%和50.72%。HIF-1α、Slug和E-cad-herin的表达对于TNM分期和腋淋巴结转移有显著性差异(P<0.05);MT的表达对于TNM分期有显著性差异(P<0.05)。在69例乳腺癌组织标本中HIF-1α与MT表达呈显著正相关(r=0.285,P<0.05),MT与Slug呈显著正相关(r=0.379,P<0.01),Slug与E-cadherin呈显著负相关(r=-0.422,P<0.01)。RT-PCR半定量结果显示:HIF-1α、MT、Slug和E-cadherinmRNA在人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中均有表达,但在恶性程度更高的MDA-MB-231细胞中HIF-1α、MT、Slug表达较高,而E-cadherin表达较低,差异具有显著性(P<0.05)。结论:HIF-1α、MT、Slug和E-cadherin在乳腺癌中的表达情况可作为监测乳腺癌发展的指标。
- 龙方懿印国兵刘智敏杨俊艳贾朝莉刘小花董超然王旎
- 关键词：乳腺癌HIF-1ΑMTSLUGE-CADHERIN
- CDCA在C57BL/6小鼠中上调肝脏成纤维细胞生长因子21表达及其效应
- 2012年
- 目的研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)的激活对C57BL/6小鼠肝脏中纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)基因表达的影响。方法将18只3～4周龄C57BL/6小鼠随机分为3组,分别使用不同浓度鹅脱氧胆酸(chenodeoxy cholic acid,CDCA,0、10 mg/kg和50 mg/kg)给小鼠灌胃7 d,处死后分别提取小鼠肝脏总RNA和总蛋白,采用RT-PCR法和Western blot法检测各组小鼠FGF21RNA和蛋白表达水平的变化;同时用酶法测定检测小鼠血甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及血糖(GLU)变化。结果 C57BL/6小鼠肝脏中FGF21 RNA和蛋白的表达水平呈CDCA剂量依赖型增高;小鼠血脂及血糖测定结果显示:TG,TC和血糖随CDCA浓度的升高而下降。结论 CDCA可上调C57BL/6小鼠肝脏中FGF21的表达并导致血TG、TC及GLU下降。
- 刘小花王永超李良鹏彭家和江渝刘智敏
- 关键词：法尼酯X受体成纤维细胞生长因子21鹅脱氧胆酸
- 两种分离人血浆载脂蛋白M方法研究
- 郭冬妹刘小花彭家和杨星勇江渝
- 低氧诱导因子-1α促进人甲状腺未分化癌FRO细胞侵袭转移的分子机制
- 2014年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)对人甲状腺未分化癌FRO细胞侵袭转移的影响,并探讨其分子机制。方法用5%O2的低氧培养箱培养FRO细胞不同时间(0、2、4、8、12 h),倒置显微镜下观察细胞形态的变化,Western blot法检测细胞中上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白HIF-1α、Snail、E-cadherin、Vimentin、MMP2的表达;另设FRO细胞常氧组、HIF-1α特异性抑制剂3-(5’-羟甲基-2’-呋喃基)-1-苯甲基吲哚(YC-1)+常氧组、YC-1+低氧组、常氧+HIF-1α激活剂氯化钴(CoCl2)组,采用Western blot法检测各组细胞中HIF-1α和EMT相关蛋白的表达,Transwell侵袭和迁移试验检测各组细胞的侵袭和迁移能力。结果随着低氧培养时间的延长,FRO细胞逐渐发生间质样改变,低氧12 hHIF-1α、Snail、Vimentin、MMP2蛋白的表达量较0 h显著升高(P<0.01),上皮细胞特征性蛋白E-cadherin的表达持续降低(P<0.01)。YC-1+低氧组与低氧组比较,HIF-1α、Snail、Vimentin、MMP2蛋白的表达量显著降低(P<0.01),E-cadherin蛋白的表达量显著升高(P<0.05)。低氧组和常氧+CoCl2组与常氧组比较,HIF-1α蛋白的表达量显著升高(P<0.01);常氧+CoCl2组与常氧组比较,Snail、Vimentin、MMP2蛋白的表达量显著升高(P<0.01),E-cadherin蛋白的表达量显著降低(P<0.01);常氧+CoCl2组与低氧组比较,HIF-1α、Snail、Vimentin蛋白的表达量显著升高(P<0.01),E-cadherin蛋白的表达量显著降低(P<0.01),MMP2蛋白的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。低氧组和常氧+CoCl2组的穿膜细胞数和迁移细胞数均较常氧组显著增多(P<0.01)。结论低氧使FRO细胞中HIF-1α高表达,HIF-1α可上调Snail、Vimentin和MMP2的表达,下调E-cadherin的表达,对FRO细胞的侵袭转移具有促进作用。
- 杨俊艳王旎刘智敏董超然刘小花
- 关键词：低氧诱导因子-1Α甲状腺癌未分化癌SNAIL
- 低氧对分化型甲状腺癌KAT和WRO细胞上皮间质转化的影响
- 2012年
- 目的探讨低氧对分化型甲状腺癌KAT、WRO细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以氯化钴(CoCl2)模拟细胞低氧微环境,采用MTT法检测细胞的增殖活力,筛选CoCl2的最适作用浓度;倒置显微镜观察低氧下细胞的形态特征;Western blot检测低氧0、3、6、12 h后KAT和WRO细胞中HIF-1a蛋白的表达及低氧6 h后KAT和WRO细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 CoCl2最适作用浓度为150μmol/L,低氧使KAT和WRO细胞逐渐获得了间质细胞的形态特征。低氧6 h后,KAT和WRO细胞中HIF-1a蛋白的表达达峰值,与低氧0 h组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。低氧组KAT细胞中E-cadherin蛋白的表达水平明显低于正常组(P<0.01),Vimentin蛋白的表达水平与正常组相比,差异无统计学意义(P>0.05);低氧组WRO细胞中E-cadherin蛋白的表达水平明显低于正常组(P<0.01),Vimentin蛋白的表达水平明显高于正常组(P<0.01)。结论 HIF-1a可能通过下调E-cadherin、上调Vimentin而促进分化型甲状腺癌细胞KAT和WRO发生上皮间质转化,使其获得侵袭、转移潜能。
- 贾朝莉刘智敏曾得康杨俊艳龙方懿刘小花
- 关键词：甲状腺癌分化型低氧诱导因子上皮间质转化E-钙黏蛋白波形蛋白
- 低氧诱导因子-1α、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E在人乳腺癌组织中的表达及其意义被引量：3
- 2012年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(Hgpoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E(E-cadherin)在人乳腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测术前未接受过放疗、化疗及激素治疗的69名患者乳腺癌组织标本中HIF-1α、Twist和E-cadherin的表达,并分析三者表达的相关性。结果在69份乳腺癌组织标本中,HIF-1α、Twist和E-cadherin的阳性表达率分别为71.01%(49/69)、57.97%(40/69)和50.72%(35/69);HIF-1α、Twist和E-cadherin的阳性表达率与TNM分期和腋淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),与患者年龄、肿瘤大小和病理类型无关(P>0.05)。HIF-1α与Twist的表达呈显著正相关(r=0.286,P<0.05),Twist与E-cadherin的表达呈显著负相关(r=-0.371,P<0.01)。结论 HIF-1α、Twist和E-cadherin在乳腺癌中的表达情况可作为监测乳腺癌发展的指标。
- 龙方懿印国兵刘智敏吴婷婷贾朝莉杨俊艳刘小花
- 关键词：乳腺癌低氧诱导因子TWIST
- 人cidec基因启动子的克隆及PPARγ上调其活性大小比较研究
- 2015年
- 人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C(Cell death-inducing DNA fragmentation factor 45-like c,cidec)可调节脂肪代谢,与动脉粥样硬化有密切联系,研究显示该因子表达受到过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferatoractivated receptor gamma,PPARγ)的调节,但其中的表达机制还不清楚。从人肝癌细胞HepG2中扩增cidec基因启动子不同长短片段,分别克隆到虫荧光素酶报告基因载体中;cidec基因启动子片段重组报告基因质粒转染HepG2细胞,经PPARγ激动剂罗格列酮(Rosiglitazone,ROZ)处理后,检测荧光素酶活性。结果发现,cidec基因启动子(-1 800^+150bp)加ROZ前后均无明显变化,而cidec基因启动子(-2 289^+150bp)质粒荧光素酶活性明显增加,且加ROZ后活性显著升高(p<0.05)。这表明激活PPARγ可能通过cidec基因启动子的-2 289^-1 800bp区域PPARγ结合元件而上调该基因转录活性。
- 郭冬妹刘小花彭家和杨星勇江渝
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ罗格列酮启动子
- 低氧诱导因子-1α和上皮间质转化相关蛋白在甲状腺滤泡状癌组织中的表达及其临床意义被引量：1
- 2012年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和上皮间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)相关蛋白在甲状腺滤泡状癌(Follicular thyroid carcinoma,FTC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测42份FTC组织中HIF-1α、锌指转录因子(Snail)、波形蛋白(Vimentin)和钙黏蛋白E(E-cadherin)的表达;MTT法检测不同浓度CoCl2对FTC WRO细胞增殖活力的影响;RT-PCR法检测不同浓度CoCl2对WRO细胞HIF-1α基因mRNA转录水平的影响;免疫荧光法观察150μmol/L CoCl2处理24 h的WRO细胞中HIF-1α蛋白的核定位;Western blot检测150μmol/LCoCl2处理不同时间对WRO细胞中HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白表达的影响;Transwell小室试验检测150μmol/LCoCl2处理24 h对WRO细胞中侵袭及迁移能力的影响。结果在42份FTC组织中,HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达与多项临床指标相关,且4者表达显著相关(P<0.05);CoCl2可抑制WRO细胞的增殖活力;随着CoCl2浓度的增高,WRO细胞中HIF-1α基因mRNA的转录水平先增高然后趋于平稳;150μmol/L CoCl2处理24 h的WRO细胞内HIF-1α蛋白发生核转位;CoCl2处理的WRO细胞中随着HIF-1α蛋白表达的增多,Snail和Vimentin蛋白的表达逐渐增多,E-cadherin蛋白的表达逐渐减少(P<0.05);150μmol/L CoCl2处理24 h后,侵袭、迁移细胞数目较对照组明显增加。结论 HIF-1α能够通过上调Snail与Vimentin的表达,下调E-cadherin的表达,进而促进FTC EMT的发生。
- 龙方懿杨俊艳刘智敏贾朝莉刘小花董超然王旎
- 关键词：低氧诱导因子-1Α甲状腺滤泡状癌上皮间质转化
- LXR对胆固醇稳态影响的研究进展被引量：6
- 2013年
- 胆固醇是细胞膜的重要组成部分,构成生命的基本分子之一,也是胆汁酸和类固醇激素合成的底物,其代谢平衡受到诸多因素的精密调节。虽然胆固醇是细胞和人体生理功能所必需的,但血清总胆固醇增高可导致2型糖尿病、高胆固醇血症以及动脉粥样硬化等疾病。肝X受体(LXR)是一种重要的细胞核受体,是配体依赖的转录因子,包含LXRα和LXRβ两种亚型,LXRα在肝脏、小肠、巨噬细胞、脂肪组织中均有表达,而LXRβ有着广泛的表达。LXR与视黄醇类X受体结合后,形成异二聚体,刺激靶基因的表达。激活的LXR通过调节肠道对饮食胆固醇的吸收、肝脏对胆固醇的合成和降解以及胆汁酸的代谢,控制着胆固醇稳态。此外,LXR还参与调节脂肪形成、糖代谢、巨噬细胞的天然免疫和炎症反应等生理活动。因此,LXRs有望成为治疗动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏等疾病的药物靶点。
- 叶航羊王菲刘小花郭冬妹江渝
- 关键词：LXR胆固醇代谢
- 核受体FXR下调载脂蛋白M表达的分子机制
- 研究背景：动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是威胁人类健康的常见的心脑血管疾病，在东西方人群中都有较高的发病率。而脂代谢异常是AS发生的重要原因，其发病机制目前尚未完全阐明。法尼酯X受体(Farneso...
- 刘小花
- 关键词：动脉粥样硬化法尼酯X受体载脂蛋白M分子调控
