任超超
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- LC3蛋白敲除A549细胞系的构建及其对流感病毒复制的影响
- 2022年
- 微管相关蛋白1轻链3(LC3)是一种在流感病毒感染过程中被病毒M2蛋白招募至细胞膜处聚集的宿主细胞自噬相关蛋白。为了解其在流感病毒感染过程中行使的功能,利用CRISPR/Cas9技术构建LC3蛋白缺失细胞系,用以观察病毒生长复制的差异。设计sgRNA并插入至核心载体LentiCRISPRv2中,与辅助质粒共同转染293T细胞行慢病毒的包装。包装完成后用以感染A549细胞并进行嘌呤霉素压力筛选,对存活细胞的LC3蛋白含量进行检测,结果显示具有嘌呤抗性的细胞中未检测到LC3蛋白条带,LC3敲除细胞系构建成功。运用核染色法对比敲除细胞和正常细胞的细胞活性,发现缺失LC3蛋白细胞活性小幅度下降。流感病毒感染两种细胞绘制生长曲线,缺少LC3蛋白的条件下病毒复制水平下降。本研究构建的LC3蛋白缺失细胞系能够为将来研究LC3蛋白在细胞自噬与病毒感染过程中发挥功能,以及分子机制的研究提供了良好的细胞模型。
- 陆晨阳包旦奇马天馨牛世奇张婷任超超李雪松杨健美滕巧泱李泽君刘芹防
- 关键词：流感病毒
- 表达Renilla Luciferase重组流感病毒的构建及生物学特性研究
- 2018年
- 本研究构建了表达Renilla Luciferase的重组流感病毒,并运用Luciferase报告基因检测系统对该病毒的生物学特性进行了研究。研究发现该病毒复制时能稳定表达Renilla Luciferase,添加磷酸奥斯他韦抑制病毒复制后Luciferase表达量明显低,而且表达量与磷酸奥司他韦浓度成反比。结果表明检测Luciferase表达量可以直接反应病毒的复制,将该重组病毒与Luciferase报告基因系统运用到抗流感药物的大规模筛选中,可为抗流感药物的筛选提供一种快速且灵敏的检测方法。
- 宿鑫任超超周洁文闫丽萍闫丽萍
- 关键词：流感病毒LUCIFERASE生物学特性
- 表达外源基因的重组流感病毒及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种表达外源基因的重组流感病毒，该重组流感病毒是在PR8流感病毒的HA基因包装信号序列中插入外源基因的重组病毒。本发明还公开了一种上述重组流感病毒的制备方法和应用。本发明表达外源基因的重组流感病毒，不仅能用于...
- 李泽君闫丽萍任超超
- 文献传递
- 两株H1N1亚型猪流感病毒NS1蛋白抑制Ⅰ型IFN功能比较被引量：2
- 2021年
- 本研究分离得到两株猪源H1N1流感病毒,通过进化树分析发现分别是欧亚类禽H1N1猪流感病毒和类鸭源H1N1猪流感病毒,为了研究两株毒株的NS1蛋白对Ⅰ型IFN产生的抑制能力,分别构建了2个毒株的NS1基因的真核表达载体,将NS1真核表达质粒、Ⅰ型IFN报告质粒与干扰素刺激质粒RIG-I共转染293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测Ⅰ型IFN激活水平。结果显示:欧亚类禽H1N1猪流感病毒NS1蛋白对人源细胞干扰素的拮抗作用明显强于类鸭源H1N1猪流感病毒;2种NS1蛋白对RIG-I与TBK-1激活的IFN-I抑制能力存在显著的差别,但是对IRF-3激活的IFN-I抑制能力没有显著差别。本研究结果初步揭示了欧亚类禽与类鸭源H1N1猪流感病毒抑制IFN-I能力的差异,及H1N1禽流感适应猪群的潜在分子机制。
- 张婷陆晨阳任超超包旦奇陈鸿军李雪松杨健美滕巧泱李泽君刘芹防
- 关键词：猪流感病毒NS1蛋白
- 添加CpG ODN佐剂对鸭坦布苏弱毒活疫苗免疫效果影响研究被引量：4
- 2022年
- 鸭坦布苏病毒是一种黄病毒科黄病毒属单股正链RNA病毒,可造成蛋鸭、种鸭产蛋下降,给养鸭业造成巨大经济损失的重要疾病。目前,坦布苏弱毒活疫苗是临床上有效预防该病的重要手段之一。CpG ODN作为疫苗佐剂被证实能够有效提高疫苗的免疫效果,但其对弱毒活疫苗的是否具有免疫增强的效果尚不清楚。本研究选择鸭坦布苏弱毒活疫苗FX2010-180P,以CpG ODN为免疫佐剂,在鸭体内进行免疫以及攻毒保护实验。通过检测鸭体内抗体水平、免疫保护率、组织切片来进行免疫效果的评估。结果显示,FX2010-180P免疫组鸭子在免疫后3~4 d即可产生特异性抗体,而添加CpG ODN疫苗佐剂组,免疫鸭的抗体产生时间滞后于未添加组。攻毒保护实验结果显示,两种方式免疫方式都可以保护鸭子不受坦布苏病毒野毒的感染。本研究结果显示添加CpG ODN对鸭坦布苏FX2010-180P弱毒活疫苗并不具有免疫增强的效果。
- 陆晨阳张婷任超超包旦奇马天馨牛世奇李雪松杨建美滕巧泱李泽君刘芹防
- 关键词：疫苗免疫佐剂
- 利用反向遗传技术构建细胞高适应性的H9N2流感病毒被引量：1
- 2014年
- H9N2亚型禽流感病毒通常在鸡胚上增值性能高,但在细胞上增值能力差。为了获得在细胞上高效表达H9N2亚型禽流感HA和NA抗原的疫苗株,通过反向遗传操作技术将A/Chicken/Shanghai/441/2009(H9N2,SH441)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/34(H1N1,PR8)的6个内部基因进行人工重组,拯救并获得了1株禽流感重组病毒441-PR8,并对它的生物学特性进行了研究。结果表明,重组病毒441-PR8株在细胞上的增殖能力明显高于野生毒株SH441,该重组病毒有望成为H9N2亚型禽流感疫苗研制的候选毒株。
- 任超超滕巧泱申伟霞李雪松李国新杨健美闫丽萍李泽君
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型H1N1亚型反向遗传操作重组病毒
- 蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较研究被引量：2
- 2018年
- 为比较新发蝙蝠流感病毒H17N10亚型与禽流感病毒H9N2亚型的M蛋白(包括M1和M2蛋白)的免疫原性,分别构建两种亚型流感病毒M1、M2的原核表达载体和真核表达载体,利用前期反向遗传学技术拯救获得两种重组病毒感染MDCK细胞,并分别与相应的单抗或多抗进行免疫印迹和免疫荧光鉴定。结果显示,两种亚型病毒的M1蛋白的原核表达产物均与M1多抗反应,均不与2株M1单抗反应;拯救的两种重组病毒感染细胞后及其M1蛋白的真核表达产物均与M1的单抗5F2反应,不与单抗3G8及M1的多抗反应,两种亚型的结果一致;而两种亚型的M2蛋白通过与单抗和多抗反应,出现了不一致的结果,M2的单抗仅与蝙蝠流感病毒M2的原核表达产物反应,不与H9N2禽流感病毒M2的原核表达产物反应,M2的多抗则反之;且M2的多抗仅与H9N2禽流感M2的真核表达产物以及拯救病毒反应,均不与蝙蝠流感病毒M2的真核表达产物及拯救病毒反应。本研究证实这两种亚型流感病毒的M2蛋白之间确实存在免疫原性的差异,并且筛选到了可以区分蝙蝠流感病毒和禽流感病毒的M2抗体,为进一步研究流感病毒M蛋白相关的生物学机制提供了基础。
- 黄敏刘宸瑞滕巧泱刘芹防李雪松陈鸿军车广胜任超超崔宏锐闫大为周伟光李泽君杨健美
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒M蛋白免疫原性
