蒋韬
- 作品数：41 被引量：124H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金甘肃省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- O型口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法
- 本发明涉及一种用于对偶蹄类动物O型口蹄疫抗体水平进行快速检测的胶体金试纸条，这种试纸条的制备，以及其具体检测的方法。试纸条的底板上固定有多孔纤维材料构成的加样吸收垫、位于加样吸收垫尾端并与加样吸收垫相连的免疫金标层、和由...
- 蒋韬梁仲王超英杨亚民刘西兰陈涓张军翟国元才学鹏卫广森刘湘涛刘在新任维维智晓莹祁光宇
- 文献传递
- 口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立被引量：30
- 2008年
- 【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72and AsiaⅠ/China05抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装形成胶体金定型诊断试剂盒。【结果】本试验研制的口蹄疫定型试剂盒具有良好的灵敏度,可检测到7.8×104LD50(1﹕128倍稀释乳鼠毒)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其有较好的重复性;特异性试验证实该方法在检测口蹄疫临床症状相似病原,如猪水疱病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒时无交叉反应;试剂盒对206份已知血清型田间及实验室样品的符合率试验,O、A、AsiaⅠ型和阴性样本的符合率分别为92.45%、91.66%、92.75%、100%定型准确率94.58%。试剂盒在4℃下可保存6个月。【结论】本试验研发的口蹄疫病毒胶体金定型诊断试剂盒是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。
- 蒋韬梁仲陈涓何继军吕律马维民刘在新刘湘涛
- 关键词：胶体金免疫层析法
- 一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法
- 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定，即固定血清抗体的量，将待检抗原作系列稀释与之作用，同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原，基于阳性血清在某...
- 周广青马军武林密冯霞郭建宏何继军杨亚民蒋韬
- 文献传递
- 口蹄疫病毒核酸试纸条检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 本研究通过核酸探针与免疫层析相结合的方法,建立了一种简单、敏感、特异的检测口蹄疫病毒的方法。试验利用RT-PCR方法获得口蹄疫病毒3D核苷酸片段,在引物中设计了灵敏度高、特异性好的核酸探针——生物素和地高辛,使扩增产物结合探针。利用胶体金的放大原理将链霉亲和素与金颗粒形成胶体金混合物,从而与RT-PCR产物中的生物素探针结合。硝酸纤维素膜上端标记生物素化山羊抗兔IgG作为指控条带,下端标记抗地高辛抗体以捕获RT-PCR产物中的地高辛探针。组装金标试纸条,检测RT-PCR产物,结果表明该核酸试纸条可以检测到0.3×10^-3-3×10^-3μg/μL,敏感性高于琼脂糖凝胶电泳,两种方法的符合率高,核酸试纸条检测方法是一种敏感性高、成本低且费时短的新型检测方法。该方法为口蹄疫病毒检测提供了一种新的思路。
- 龚真莉蒋韬祁淑芸陈国栋刘艳红李勇
- 关键词：口蹄疫病毒3D基因生物素探针
- 口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条诊断方法的建立被引量：4
- 2012年
- 为了兽医基层工作人员能够快速诊断口蹄疫病原,与其他传染病做鉴别诊断,有必要建立一种快速、简便区分它们的胶体金免疫层析方法。本试验采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金。将纯化的Asia 1/China/05流行毒株12S偶联抗原的兔抗体制备免疫胶体金,喷免疫胶体金于玻璃纤维制成金标垫。将纯化A/AF72流行株12S偶联抗原的兔抗体和适量O/China/99流行毒株12S偶联抗原的兔抗体混合固定于硝酸纤维素膜上作为检测带。将羊抗兔抗体固定在硝酸纤维素膜的不同区域作为质控带,并组装成口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条。利用其对阴性参考样品、各型阳性参考样品、已知背景的田间样品进行检测。灵敏度试验结果显示:建立的试纸条方法敏感性高、可检测到病毒最低含量为0.98×104 LD50;特异性试验显示:在检测与口蹄疫临床症状相似病原———猪水泡病病毒(SVDV)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)抗原时无交叉反应;重复性试验显示:不同批次间、同一批次内检测结果完全一致;符合性试验显示:检测国家口蹄疫参考实验室已确定口蹄疫病毒血清型的样品90份,阳性符合率、阴性符合率分别为96.70%、100%。本试验研发的口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,适合国内流行的口蹄疫病原的鉴别诊断。
- 任维维梁仲智晓莹祁光宇刘湘涛才学鹏蒋韬
- 关键词：口蹄疫病毒偶联通用型
- 一种用于塞内卡病毒抗原检测的双抗夹心ELISA试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于塞内卡病毒抗原检测的双抗夹心ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括塞内卡病毒豚鼠抗IgG包被的酶标板以及HRP标记的塞内卡病毒兔抗IgG。本发明使用HRP标记兔抗IgG，替代传统ELISA中的一抗...
- 郑海学田宏杨帆石正旺刘华南张克山朱紫祥李丹刘永杰何继军郭建宏蒋韬刘湘涛
- 文献传递
- 一种猪囊虫病金标快速诊断试剂
- 本发明涉及一种用于检测猪囊虫病(Cysticercosis)的快速诊断试剂以及这种快速诊断试剂的制备方法。本发明的这种诊断试剂是一种胶体金检测试纸条。本发明所用的猪囊虫抗原采用了人工克隆制备的猪带绦虫重组抗原，所用的抗猪...
- 才学鹏张少华李克生蒋韬景志忠骆学农袁改玲郑亚东贾万忠郭爱疆窦永喜
- 文献传递
- 一种基于p30蛋白单域抗体的非洲猪瘟病毒管式化学发光免疫分析检测试剂盒及应用
- 本发明提供了一种基于p30蛋白单域抗体的非洲猪瘟病毒管式化学发光免疫分析检测试剂盒及其应用，属于体外诊断产品技术领域。本发明提供的试剂盒包括磁微粒混悬液、酶标抗体、稀释液、校准品、质控品、浓缩洗涤液和发光底物。本发明所述...
- 杨吉飞林密包艳芳殷宏何莉刘志杰李涛善关贵全潘晓乐赵亚茹蒋韬李昕孙燕燕杨光
- 胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒含量方法的建立被引量：3
- 2014年
- 采用胶体金为标记物制备了快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫层析试纸条,拟合检测曲线,用金标分析仪进行定量检测。应用实验室与田间的样品检测证实其有较好的敏感性和特异性。对Asia 1型FM—DV抗原定量检测可以在15 min内完成,灵敏度为0.78μg·mL^(-1),线性范围在0.78~7.84μg·mL^(-1);变异系数在0.2%~5%;回收率在91%~102%,证明定量检测、准确度高。结果表明,本研究建立的定量检测Asia 1型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析方法能简便、廉价、快速、灵敏、特异、准确地定量检测样品中的Asia 1型口蹄疫病毒。
- 朱玉婵林密孙燕燕孙继国蒋韬
- 关键词：ASIA胶体金
- 基于表面等离子体共振(SPR)技术实时分析RGD基序与整联蛋白的相互作用被引量：2
- 2021年
- 旨在研究口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)结构蛋白VP1上的RGD(Arg-Gly-Asp)基序与宿主细胞表面受体整联蛋白的结合特异性,作者应用基于表面等离子共振技术(SPR)的Biacore 3000系统实时研究RGD基序分别与猪源整联蛋白α_vβ_6胞外区结构域、α_v亚基胞外区结构域和β_6亚基胞外区结构域的亲和力。首先通过结合试验筛选与RGD基序有结合的整联蛋白结构域,再对有结合的整联蛋白与RGD基序开展动力学分析。结果显示,合成的RGD基序与猪源整联蛋白α_vβ_6胞外区结构域有结合,结合动力学常数K_a、K_d、K_D分别为42.3 M~(-1)s~(-1)、3.1×10~(-4)s~(-1)和7.33×10~(-6)M;与整联蛋白α_v亚基胞外区结构域之间亦有结合,结合动力学常数K_a、K_d、K_D分别为21.8 M~(-1)s~(-1)、2.13×10~(-4)s~(-1)和9.79×10~(-5)M;与β_6亚基胞外区结构域几乎没有结合。综上表明,RGD与整联蛋白α_vβ_6胞外区结构域的结合比与整联蛋白α_v亚基胞外区结构域之间的结合快且亲和力强。本研究将为进一步探讨FMDV与宿主细胞表面受体的相互作用提供参考。
- 李鹏飞龚真莉杜晓华蒋韬
- 关键词：FMDV表面等离子体共振整联蛋白动力学
