程雪琴
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：湖北医药学院附属太和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 异甘草素对体外肺纤维化模型的作用及其机制被引量：7
- 2022年
- 目的观察异甘草素(ISL)对转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))诱导人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞所构建的体外肺纤维化模型的影响,探讨其作用机制。方法TGF-β_(1)刺激A549细胞发生上皮-间质转化(EMT)构建体外肺纤维化模型;加入ISL干预后,噻唑蓝(MTT)法检测TGF-β_(1)刺激A549细胞后,ISL对细胞增殖活性的影响;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测EMT相关E-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN及其相关转录因子Snail、Slug、Twist、ZEB1、ZEB2 mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN及MAPK/Erk信号通路中Erk1/2磷酸化蛋白的表达水平。结果TGF-β_(1)可使A549细胞形态由上皮细胞向成纤维细胞转变,细胞增殖及迁移能力增强(P<0.05或P<0.01);上皮细胞标志物E-cadherin表达降低,间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN表达升高;EMT相关转录因子及磷酸化Erk1/2表达升高(P<0.05或P<0.01)。而经ISL处理后,ISL能有效抑制TGF-β_(1)诱导的A549细胞的增殖、迁移及细胞形态变化(P<0.05或P<0.01);提高E-cadherin,降低N-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN、EMT相关转录因子及磷酸化Erk1/2的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论ISL通过干预MAPK/Erk信号通路,抑制TGF-β_(1)诱导的A549细胞的EMT过程,维护细胞上皮样形态,减少肺成纤维细胞的产生,有望成为治疗肺纤维化的一种潜在药物。
- 蔡风林王梅芳程雪琴袁乐永何金娟胡雯雯唐以军
- 关键词：异甘草素肺纤维化上皮-间质转化MAPK/ERK信号通路
- 姜黄素通过IL-13/STAT6信号通路抑制哮喘大鼠气道黏液高分泌被引量：5
- 2018年
- 目的 探讨姜黄素通过白介素13 （IL-13）信号通路调控哮喘大鼠气道炎症、气道杯状细胞化生和黏液分泌的作用。方法 将24只雌性清洁级SD大鼠随机分为阴性对照组、哮喘模型组、姜黄素组和地塞米松组,每组6只。采用卵蛋白致敏和激发建立哮喘大鼠模型,阴性对照组给予生理盐水,通过 HE染色及高碘酸-无色品红法染色观察大鼠肺组织的病理学改变及气道上皮杯状细胞的数量,采用酶联免疫吸附试验法测定大鼠肺泡灌洗液中 MUC5AC黏蛋白和IL-13的含量,免疫组织化学法检测大鼠气道上皮中 MUC5AC的表达。蛋白质印迹法分析大鼠肺组织中磷酸化信号转导与转录激活因子6 （p-STAT6）的表达水平。结果 与阴性对照组相比,哮喘模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,杯状细胞数量明显增加,支气管肺泡灌洗液 （BALF）中嗜酸粒细胞比例、MUC5AC及IL-13水平明显升高 （P ＆lt;0 05）,肺组织p-STAT6的表达明显增加 （P ＆lt;0 05）。与哮喘模型组相比,姜黄素组大鼠气道炎症和杯状细胞化生程度明显减轻,BALF中嗜酸粒细胞比例、MUC5AC及IL-13水平明显降低 （P ＆lt;0 05）,肺组织p-STAT6的表达明显减少 （P ＆lt;0 05）,与地塞米松组相比,差异无统计学意义 （P ＆gt;0 05）。结论 姜黄素可以抑制哮喘大鼠的气道炎症及杯状细胞化生,减少气道黏蛋白 MUC5AC的表达,其作用机制可能是通过抑制IL-13/STAT6信号通路的活性而实现的。
- 刘兴华王梅芳程雪琴唐以军
- 关键词：哮喘姜黄素白介素13
- 十堰市羊种3型布鲁菌病患一例被引量：1
- 2016年
- 患者男，59岁，2015年3月20日因畏寒、高热、腰痛，发热前腰部明显疼痛，发热时伴颈部僵硬感及右侧肩部疼痛，病程中伴有乏力、纳差、消瘦就诊于当地医院，给予头孢类抗菌药物和对症治疗，效果不佳，体温达39．8℃，于2015年3月29日转入湖北医药学院附属太和医院呼吸内科。
- 程雪琴王梅芳刘玉全熊畅刘岩刘丹唐以军
- 关键词：布鲁菌头孢类抗菌药物病患羊种肩部疼痛
- 大鼠I型肌醇三磷酸受体多种突变体的载体构建
- 2015年
- 目的构建大鼠I型肌醇三磷酸受体（IP3R1）多种突变体真核表达载体。方法以pcDNA3．0-IP3R1 WT为模板，利用重组融合的方法定点突变构建3个突变体，根据点突变的位置分别命名NG2586A、12588V、R2596A。结果构建的3个突变体，经PCR、酶切、测序，3个位点的突变完全达到预期设计。结论成功构建3个突变体，为进一步研究IP3R1对大鼠平滑肌细胞中胞浆内Ca2＋浓度的调控作用奠定基础。
- 王梅芳程雪琴封婷婷李瑞明唐以军
- 关键词：定点突变CA2+
- Pim1介导非小细胞肺癌进展的作用及机制研究
- 2023年
- 目的探讨原癌基因Pim1对小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)凋亡、增殖、侵袭和迁移功能的作用及可能存在的机制。方法收集2021年8-10月于湖北医药学院附属太和医院行肺叶切除患者的正常肺组织和非小细胞肺癌(NSCLC)组织标本,采用免疫组织化学法及Western blot检测两种组织中Pim1蛋白表达情况。CCK-8实验验证Pim1特异性抑制剂SMI-4a的最适浓度。LCC细胞分为实验组和对照组,实验组孵育50μmol/L SMI-4a,对照组孵育等体积二甲基亚砜(DMSO),Western blot检测Bcl-2、Bax、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、cleaved-caspase3、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)和磷酸化(p)-Akt表达情况,DAPI染色检测细胞凋亡,Edu试剂盒检测细胞增殖,Transwell和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力。3只C57 BL/6小鼠腹股沟注射LLC,收获肿瘤后等体积接种到12只小鼠腹股沟构建小鼠瘤荷模型,并分为实验模型和对照模型,实验模型瘤内注射SMI-4a 80 mg·kg^(-1)·d^(-1),对照模型注射等体积DMSO,15 d后处死并称取肿瘤组织质量,苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织凋亡核心变化,免疫组织化学法及Western blot检测肿瘤组织Pim1表达情况。结果与正常肺组织比较,NSCLC组织中Pim1蛋白的棕黄色染色增多,且NSCLC组织中Pim1蛋白表达水平高于正常肺组织(P<0.05)。与对照组比较,实验组Bax蛋白、cleaved-caspase3、caspase3水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,凋亡细胞数量增多,p-Akt蛋白水平降低,DNA合成和细胞增殖受到抑制,MMP2、MMP9表达水平降低,侵袭能力和细胞垂直迁移能力降低(P<0.05),细胞水平迁移能力减弱。与对照模型比较,实验模型肿瘤进展受到明显抑制,肿瘤质量更小(P<0.05),此外,肿瘤组织嗜伊红染色减少,肿瘤内部凋亡核心面积增加,凋亡核心可见较多碎裂的细胞核,凋亡核心Pim1棕黄色染色减少,且肿瘤组织Pim1表达水平降低(P<0.05)
- 魏巍任涛程雪琴刘志新王科陈森
- 关键词：LEWIS肺癌细胞增殖凋亡
