刘正杰
- 作品数：74 被引量：131H指数：5
- 供职机构：云南农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 芦笋茎尖遗传转化体系的建立与优化被引量：4
- 2020年
- 通过优化根癌农杆菌EHA105(含有pBI121表达载体)介导的茎尖遗传转化条件,包括抑菌抗生素类型及浓度、农杆菌浓度、侵染时间、共培养时间、卡那霉素浓度等影响因素,建立芦笋品种‘达宝利’遗传转化体系。以0.1~0.3 cm长的芦笋茎尖为转化受体,用MS液体培养基(MS+蔗糖3%+乙酰丁香酮150μmol·L-1)悬浮菌体至OD 600为0.6,侵染茎尖15 min,20℃避光共培养4 d;抗性茎尖在筛选培养基(1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1+KT 0.1 mg·L^-1+嘧啶醇0.5 mg·L^-1+羧苄青霉素200 mg·L^-1+卡那霉素50 mg·L^-1)上诱导长芽与生根,可获得抗性植株,经PCR、GUS组织化学染色和qRT-PCR检测,获得阳性植株。
- 张园刘正杰刘正杰林春袁加红王入毛自朝毛自朝
- 关键词：芦笋茎尖参数优化GUSQRT-PCR
- 一种藜麦组培苗无菌条件下的结籽培育方法
- 本发明公开了一种藜麦组培苗无菌条件下的结籽培育方法，包括如下步骤：藜麦种子消毒处理接种于1/2MS+0.5mg/L CCC的培养基上制备实生苗，获得藜麦无菌实生苗；切割藜麦无菌实生苗进行不定芽增殖培养；将增殖的不定芽转入...
- 董玉梅林春毛自朝刘正杰张玉敏袁加红
- 文献传递
- 一种叉角厉蝽产卵装置
- 本发明公开了一种叉角厉蝽产卵装置，包括中空的产卵箱，产卵箱的前后两端均开设有多条进出孔，进出孔的大小刚好仅够叉角厉蝽成虫进入，产卵箱的上端向下开设有沿其长度方向设置的条形插孔，还包括与条形插孔形状相配合的连接板，连接板的...
- 李兴玉刘正杰柴云霞毛自朝林春陈岗丁以纾胡小东高熹赵金燕沈晓静王文伦吴子云何文德胡杨丁从凯
- 芦笋皂苷合成相关糖基转移酶基因克隆及原核表达分析
- 2024年
- 【目的】克隆芦笋(Asparagus officinalis)甾醇糖基转移酶基因AoSGT1,分析其潜在催化活性,为解析芦笋皂苷合成途径及代谢调控机制提供科学依据。【方法】基于芦笋转录组数据设计特异性引物,扩增AoSGT1基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),经测序验证获得目标基因序列并进行生物信息学分析;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RTqPCR)测定各组织基因表达量;构建pGEX-4T-3-AoSGT1原核表达载体,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(De3),随后诱导实现重组蛋白表达。【结果】AoSGT1长1800 bp,编码599个氨基酸,其相对分子质量为66.72 kD,属于亲水性蛋白,无跨膜域和信号肽。系统发育结果表明,AoSGT1与盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis)Dz3GT_(2)有较高同源性,同属UGT80B1亚家族。多序列比对揭示了该蛋白序列包含甾醇糖基转移酶保守结构域PSBD Box和PSPG Box,预示其具有对甾体化合物3β-OH位点潜在糖基化活性。RT-qPCR结果显示,AoSGT1在芦笋根中高表达,而在茎和花中低表达。此外,SDS-PAGE结果表明,目标蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,其大小与预测值相符。【结论】成功克隆AoSGT1基因,并确认其在芦笋中呈现组织特异性表达,推测其可能参与芦笋甾体皂苷生物合成。同时,成功在大肠杆菌中实现了目标蛋白的异源表达。
- 钟匀林春刘正杰董陈文华毛自朝李兴玉
- 关键词：芦笋甾体皂苷RT-QPCR原核表达
- 一种烤烟与藜麦套作的种植方法
- 本发明涉及一种烤烟与藜麦套作的种植方法，属于藜麦种植技术领域，本发明包括种植地块的整理、烤烟种植管理、藜麦幼苗的培养、藜麦与烤烟的套作、套种后藜麦的田间管理，本发明将烟草种植、藜麦种植和土壤保护有机结合起来，充分利用烟区...
- 林春刘正杰吴慧琳袁加红杨承欣李小怡杨沅陽毛自朝
- 项目式教学法在“细胞工程”实践教学中的应用被引量：4
- 2020年
- 项目式教学主要是指教师作为引导者,辅助学生实施一个完整项目而进行的一项教学活动。随着国内教学体制改革的发展,项目式教学法在很多高校中得到了应用。针对“细胞工程”课程传统教学存在的问题,结合学生和课程体系的特点,对该课程实践教学采用项目教学法,提出了“细胞工程”采用项目式教学的必要性及基本实践流程,从采用项目式教学的案例中可以看出,项目式教学能明显提高学生的学习兴趣和综合能力。
- 刘正杰董玉梅林春
- 关键词：项目式教学细胞工程
- 一种藜麦漂浮育苗的方法
- 一种藜麦漂浮育苗的方法，该方法包括以下基质选配，浸种处理，漂浮育苗管理；在漂浮育苗管理中包括清水培育至种子生长到4叶期；之后养液培育2‑3次，每次营养液培育7天；培育后的幼苗可直接移栽到大田。本方法育苗繁殖快、育苗周期短...
- 林春高兰吴慧琳刘正杰何丽杨承欣杨沅阳李小怡
- 文献传递
- 彩色马铃薯StDof2转录因子的克隆与序列分析被引量：2
- 2018年
- 植物中的Dof家族蛋白一类调控各种生物学过程基因表达的转录因子,进而参与对植物生理生化代谢与生长发育及抗逆性等。本研究基于同源克隆技术从彩色马铃薯‘黑金刚’中获得了Dof转录因子StDof2编码基因的全长序列,进化分析发现该基因编码的氨基酸序列与棉花Dof1亲缘关系最近。进一步通过体外酵母单杂实验,发现验证转录因子具备转录激活活性,且活性位点位于蛋白的C端。为验证该基因的功能,构建了该基因的植物表达载体pBIDof2,为后续分析该基因的功能提供了研究依据。
- 张园林春林春毛自朝毛自朝
- 关键词：转录因子克隆转录激活
- 一种防止藜麦倒伏的方法
- 本发明涉及一种防止藜麦倒伏的方法，属于藜麦种植技术领域。本发明方法主要包括如下：种植前：对种子进行处理；田间管理：显穗期至开花期：喷施磷钾肥，在藜麦显穗期至开花期对叶面喷施2‑3次磷钾肥；显序期至盛花期：每隔7天对藜麦叶...
- 苏友波董玉梅刘正杰林春毛自朝林彤
- 藜麦的驯化栽培与遗传育种被引量：34
- 2019年
- 藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)起源于南美洲提提喀喀湖区,是苋科(Amaranthaceae)藜属(Chenopodium)一年生作物。因其营养全面且对多种非生物逆境胁迫具有抗性,被认为是尚未被充分开发且具有高应用潜力的作物,深受育种学家的关注。近年来,随着人们对健康的关注和高品质生活的追求,对藜麦的需求量急剧增加,加之藜麦能有效缓解全球粮食安全,对其栽培与育种等研究已成为热点。为了加深对藜麦的认识和推动其产业的发展,本文结合本课题组多年来对源于安第斯山藜麦种质资源的收集、评价与利用的实践,从藜麦营养价值与应用、起源与分布、遗传研究、品种选育进展及发展趋势等方面进行了总结,以期为我国藜麦新品种(系)的培育与栽培、产业可持续发展、贫困地区人群增收及新增我国粮食生产途径等方面提供参考信息。
- 林春刘正杰董玉梅Michel Vales毛自朝
- 关键词：驯化栽培遗传育种
