王秋萍
- 作品数：9 被引量：34H指数：4
- 供职机构：甘肃中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌钾离子通道蛋白和细胞因子的影响被引量：6
- 2018年
- 背景:研究表明,骨髓间充质干细胞移植可以有效改善心肌梗死后的心功能,移植后的骨髓间充质干细胞可能对心肌电生理有一定影响,但目前相关的研究甚少。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌钾离子电压门控通道蛋白和心肌梗死相关细胞因子的影响,为进一步探索骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死引起心律失常的相关机制提供研究基础。方法:将40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、细胞培养液组和骨髓间充质干细胞组。通过冠状动脉左前降支结扎建立心肌梗死模型,并于建模成功15-20 min后在梗死区周围采用四点法注射100μL骨髓间充质干细胞悬液(含1×10~6个骨髓间充质干细胞)和100μL细胞培养液。细胞移植4周后获取心脏标本,采用苏木精-伊红染色观察梗死心肌组织病理形态并计算梗死面积,采用Westernn blot检测钾离子电压门控通道蛋白Kv1.2和Kv1.5和心肌细胞特异性蛋白cTnT的表达,利用免疫组化方法检测梗死区心肌细胞凋亡因子Caspase-3、自噬因子Bcl-2和一氧化氮及超氧化物歧化酶的表达。结果与结论:(1)与模型组相比,骨髓间充质干细胞组心肌梗死面积减小(P<0.05),cTnT、Kv1.5和超氧化物歧化酶表达水平均提高(P<0.05),Caspase-3、Bcl-2和Kv1.2表达水平均降低(P<0.05);(2)与细胞培养液组比较,骨髓间充质干细胞组心肌梗死面积减小(P<0.05),cTnT、Kv1.5和超氧化物歧化酶表达水平均提高(P<0.05),Caspase-3、Bcl-2和Kv1.2表达水平均降低(P<0.05);(3)结果提示,骨髓间充质干细胞移植提高了心肌抗氧化能力,减少了细胞凋亡和自噬,促进钾离子通道蛋白Kv1.5的表达。
- 胡继宏赵静苗王秋萍贾佳路娟金华侯茜
- 关键词：骨髓间质干细胞移植
- 组织激肽释放酶1转染骨髓间充质干细胞的病毒感染复数选择
- 2015年
- 背景:血管舒缓素即组织激肽释放酶1,是组织激肽释放酶-激肽系统重要组成部分之一。有研究表明血管舒缓素通过促进血管新生,抑制心肌炎症产生等发挥其对心血管系统的保护作用,但并未从干细胞诱导分化方面进行探讨。目的:实验利用已构建的腺病毒载体,将其携带的血管舒缓素基因转染到大鼠骨髓间充质干细胞上,观察其是否成功转染及转染率如何。方法:以腺病毒作为载体,将目的基因血管舒缓素转染到大鼠骨髓间充质干细胞上,并采用荧光显微镜、四甲基偶氮唑盐法和流式细胞技术观察病毒对细胞的转染效果,以确定最佳的病毒感染复数。结果与结论:荧光显微镜下观察到腺病毒携带的血管舒缓素目的基因成功转染到大鼠骨髓间充质干细胞上;流式细胞仪结果显示转染率跟病毒感染复数值的大小有关系,当病毒感染复数为150时,转染率为80.8%;四甲基偶氮唑盐法结果提示,病毒感染复数为200时,细胞生长受到明显的抑制。结果证实,腺病毒介导的血管舒缓素能成功转染到大鼠骨髓间充质干细胞上,且最佳的病毒感染复数为150。
- 贾佳靳利梅赵翊晏丽路娟王秋萍赵静苗胡继宏
- 关键词：绿色荧光蛋白质类血管舒缓素心肌样细胞四甲基偶氮唑盐法
- 黄芪甲苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究被引量：10
- 2017年
- 目的探讨黄芪甲苷(AST)诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的作用。方法对第2代BMSCs进行传代培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度AST在24、48、72 h时对BMSCs的增殖作用。取第4代BMSCs分为BMSCs组、5-氮杂胞苷组(5-AZA组)和AST组,5-AZA组和AST组分别加入浓度为10μmol/L的5-AZA和浓度为100μmol/L的AST诱导液进行诱导,采用荧光倒置相差显微镜观察诱导后各组细胞的形态变化。通过Real-time q PCR法检测诱导后各组结蛋白(Desmin)、α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、肌钙蛋白I(cTnI)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测各组肌钙蛋白T(cTnT)表达水平。结果 100μmol/L AST亚组孔72 h时BMSCs增殖情况好于24、48 h时及其他浓度AST亚组孔各时间点(P<0.05)。荧光倒置相差显微镜观察显示AST体外诱导SD大鼠BMSCs形态分化类似心肌样细胞。5-AZA组、AST组Desmin、α-SCA、cTnI mRNA表达水平表达高于BMSCs组(P<0.05),且AST组以上蛋白mRNA表达水平高于5-AZA组(P<0.05)。与BMSCs组组比较,5-AZA组和AST组cTnT表达水平升高(P<0.05);与5-AZA组比较,AST组cTnT表达水平下降(P<0.05)。结论浓度为100μmol/L的AST作用72 h时能够在体外诱导BMSCs向心肌样细胞分化,但分化效果弱于5-AZA。
- 赵静苗胡继宏王秋萍
- 关键词：骨髓间充质干细胞黄芪甲苷
- 含组织激肽释放酶1表达载体诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化被引量：3
- 2017年
- 目的探讨组织激肽释放酶1(KLK1)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法选取2015年3—7月购买的大鼠BMSCs,将大鼠BMSC细胞分为3组即正常组、组织激肽释放酶1组、5-Aza组。采用RT-PCR分别对诱导培养后的大鼠BMSCs进行心肌细胞特异性蛋白Actin、c-Tn I和Desmin的检测,并用Western blot免疫印迹分析c-Tn T蛋白表达量。结果 RT-PCR检测显示,5-Aza诱导的BMSCs(1.964±0.805)在心肌特异性蛋白Actin RNA、c-Tn I RNA和Desmin RNA的表达均高于空白组(1.000±0.000)(P<0.05),KLK1诱导组(2.633±0.582)以上蛋白的RNA表达量又显著高于5-Aza诱导组(P<0.05)。Western blot结果显示,5-Aza诱导组c-Tn T蛋白的表达(0.799±0.101)高于空白组(0.112±0.001)(P<0.001),KLK1诱导组(1.294±0.134)显著高于5-Aza组。差异有统计学意义(P<0.001)。结论 5-Aza能有效使BMSCs向心肌样细胞诱导分化,KLK1也能诱导BMSCs向心肌样细胞分化。KLK1较5-Aza诱导的BMSCs在心肌细胞特异性蛋白RNA表达,心肌特异性蛋白T表达其心肌特异性更为突出。
- 王秋萍赵静苗贾佳路娟胡继宏
- 关键词：骨髓间充质干细胞肌动蛋白结蛋白
- 黄芪主要活性成分及其提取物对鼠骨髓间充质干细胞增殖作用的影响被引量：11
- 2016年
- 目的研究黄芪注射液、黄芪甲苷及黄芪多糖对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖的影响。方法将黄芪注射液、黄芪甲苷及黄芪多糖添加入大鼠BMSC培养基中,并利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测培养不同时间(24,48,72h)后的细胞活性。结果 MTT法检测结果显示0.05g/ml浓度的黄芪注射液、100μmol/L的黄芪甲苷及1mg/ml的黄芪多糖后,大鼠BMSC的细胞活性均明显高于未添加组(P<0.05)。结论适宜浓度的黄芪注射液、黄芪甲苷和黄芪多糖可显著促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖。
- 胡继宏路娟赵翊靳利梅晏丽贾佳王秋萍赵静苗
- 关键词：黄芪注射液黄芪甲苷BMSCMTT
- 黄芪注射液联合骨髓间充质干细胞对心梗模型大鼠在IL-3、IL-6、Caspase-3以及VEGF表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:研究黄芪注射液联合骨髓间充质干细胞对心梗模型大鼠在IL-3、IL-6、Caspase-3以及VEGF表达的影响。方法:采用结扎左冠脉法造心梗模型大鼠,造模成功后,干细胞组在心尖部注射骨髓间充质干细胞,黄芪组注射黄芪注射液,以及联合干预大鼠模型,对比各组实验动物在IL-3、IL-6、Caspase-3以及VEGF表达的影响。结果:ELISA检测血清IL-3,正常组较模型组高表达,黄芪组及黄芪联合BMSCs组较模型组表达升高(P<0.05);IL-6检测结果为正常组较模型组低表达,黄芪组以及黄芪联合BMSCs组表达低于模型组(P<0.05);Caspase-3的结果为正常组较模型组低表达,黄芪组以及黄芪联合BMSCs组表达低于模型组(P<0.05);VEGF检测结果,正常组与模型组比较低表达,黄芪组及黄芪联合BMSCs组与模型组比较表达升高(P<0.05)。结论:黄芪注射液对心梗模型大鼠IL-3、VEGF促进表达作用较突出,黄芪注射液联合BMSCs在Caspase-3、IL-6抑制表达作用较明显。
- 王秋萍赵静苗胡继宏
- 关键词：黄芪注射液骨髓间充质干细胞
- 多种癌细胞Nesprin 1蛋白的表达
- 2016年
- 目的通过比较Nesprin 1在不同癌细胞中的表达程度,为Nesprin 1与多种癌细胞之间的关系做初步探讨。方法采用Western blotting方法检测Nesprin 1在人宫颈癌细胞(Hela)、人肺癌细胞(H-125)、人乳腺癌细胞(HCC-1937)、人膀胱癌细胞(5637)、人肝癌细胞(Hep G2)、人胃癌细胞(BGC-823)、人结肠癌细胞(HCT 116)、人食管癌细胞(Eca-109)、小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(Raw 2647)等癌细胞当中的表达。结果各癌细胞组GAPDH均有表达,Nesprin 1各组表达量不同,从强到弱顺序为HCC-1937>H-125>HCT116=Eca-109>RAW2647>BGC-823>Hep G2>Hela>5637,其中人膀胱癌细胞5637的表达不明显。结论 Nesprin 1蛋白可在多种癌细胞中表达,膀胱癌细胞中表达不明显。
- 胡继宏贾佳路娟王秋萍赵静苗侯茜
- 关键词：NESPRIN癌症肝癌HELA
- KLK1基因转染BMSCs联合黄芪对急性心肌梗死模型大鼠心肌梗死面积及炎症因子和血管内皮生长因子的影响
- 目的：KLK1基因转染的BMSCs联合黄芪对急性心肌梗死大鼠的心肌梗死面积及炎性因子和血管内皮生长因子的影响 方法： 1、动物选择和随机化分组：健康成年SPF级Wistar大鼠雄性(体重180±20g)，随机抽取20...
- 王秋萍
- 关键词：急性心肌梗死
- 文献传递
- 低氧下血管内皮细胞生长因子转染人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞的分化被引量：7
- 2017年
- 背景:已有研究发现血管内皮细胞生长因子可诱导骨髓间充质干细胞分化为内皮细胞,但在机体损伤的低氧环境下,血管内皮细胞生长因子基因是否可促进骨髓间充质干细胞定向诱导分化为血管内皮样细胞?目的:观察低氧环境下,经血管内皮细胞生长因子诱导的人骨髓间充质干细胞是否能够向血管内皮样细胞分化。方法:在含体积分数5%O2环境中,将第3代人骨髓间充质干细胞分组培养,对照组以常规培养基培养,实验组以含血管内皮细胞生长因子载体的腺病毒诱导液培养。培养2周后,进行形态学观察及表面相关分子检测,ELISA检测细胞培养上清液中血管内皮细胞生长因子及内皮型一氧化氮合成酶因子水平,RT-PCR和Western blotting检测内皮素和前列环素蛋白表达。结果与结论:(1)对照组细胞数量较多,呈拥挤状,排列不齐,呈纤维样生长;实验组细胞多呈三角形或多边形,集落状生长,呈铺路石子样;(2)对照组CD31为阴性表达,CD105为阳性表达且阳性率为99.7%,表明细胞仍呈现骨髓间充质干细胞的表型。实验组CD31表达明显上升,阳性率为30.33%;CD105表达下降,阳性率为58.11%,呈现典型的内皮细胞表型;(3)与对照组比较,实验组内皮素、血管内皮细胞生长因子及内皮型一氧化氮合成酶表达增高(P<0.01),前列环素表达降低(P<0.01);(4)结果表明在低氧环境下,血管内皮细胞生长因子具有促使人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞分化的能力。
- 胡继宏贾佳路娟王秋萍赵静苗靳利梅李金娟
- 关键词：干细胞血管内皮生长因子类骨髓干细胞骨髓间充质干细胞内皮型一氧化氮合成酶前列环素
