杨欢欢
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：安徽农业大学茶与食品科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 家蚕吡哆醛激酶基因干扰降低转氨酶基因的转录表达被引量：2
- 2015年
- 【目的】维生素B_6在氨基酸代谢中是多种酶的辅酶,维持氨基酸代谢的正常运行。磷酸吡哆醛（pyridoxal-5＇-phosphate,PLP）是维生素B_6的主要辅酶形式,吡哆醛激酶（pyridoxal kinase,PLK）是PLP的重要生成酶,本研究试图明确PLK基因与PLP依赖酶之间转录水平的调节关系。【方法】本研究采用RNA干扰（RNA interference,RNAi）方法对家蚕Bombyx mori的PLK基因进行干扰,通过体外合成PLK基因的3个干扰片段（siRNA1,siRNA2和siRNA3）,将siRNA从体腔注入5龄第3天的家蚕幼虫体内诱导RNAi。利用荧光定量PCR测定不同干扰片段、不同时间点及不同组织中PLK基因表达量的变化;并测定家蚕体内磷酸丝氨酸转氨酶（phosphoserine aminotransferase,Ser B）和天门冬氨酸氨基转移酶（asparate aminotransferase,AST）基因的表达量。【结果】注射干扰片段后48 h干扰效果达到最佳。3个干扰片段干扰效果从高到低依次为siRNA1,siRNA2和siRNA3。RNAi效果最好的是中肠组织,其PLK基因的相对表达量下降了55%。RNA干扰PLK基因后,后部丝腺中Ser B和AST基因相对表达量分别下降了90%和29%。【结论】本研究通过RNAi实现了家蚕PLK基因干扰,并进一步证明了家蚕PLK基因和Ser B基因及AST基因存在联动调节关系。
- 姚丽丽杨欢欢张剑韵黄龙全
- 关键词：家蚕吡哆醛激酶SIRNA转氨酶
- 外源激素处理后家蚕吡哆醛激酶和磷酸吡哆醇氧化酶转录水平的变化
- 2015年
- 【目的】研究家蚕Bombyx mori经蜕皮激素（20-hydroxyecdysone,20-E）和保幼激素类似物（juvenile hormone analogue,JHA）处理后引起吡哆醛激酶（pyridoxal kinase,PLK）和磷酸吡哆醇氧化酶（pyridoxine-5＇-phosphate oxidase,PNPO）的转录水平变化,为进一步研究激素对蚕体营养代谢等工作奠定基础。【方法】以20-E和JHA分别喂食不同发育时期（5龄第1,3和5天）的家蚕幼虫,以喂食蒸馏水的家蚕为对照,采用实时荧光定量PCR（realtime quantitative PCR）方法在处理后24和48 h对各组幼虫后部丝腺中PLP合成酶PLK和PNPO的转录水平进行分析。【结果】5龄第1天幼虫经20-E处理24和48 h后,PLK和PNPO的转录水平出现上调且与对照的差异达到极显著（P〈0.01）;5龄第3天幼虫经20-E处理,PLK的转录水平在48 h出现下调且与对照的差异达到显著（P〈0.05）,PNPO的转录水平在24和48 h均出现上调且与对照的差异达到极显著（P〈0.01）;5龄第5天幼虫经20-E处理后PLK和PNPO的转录水平无变化。5龄第1天幼虫经JHA处理后PLK和PNPO的转录水平未受到影响;5龄第3天幼虫经JHA处理后,PLK的转录水平在48 h出现显著下调且与对照的差异达到显著（P〈0.05）,PNPO的转录水平在24和48 h后均出现显著下调且与对照的差异达到极显著（P〈0.05）;5龄第5天幼虫经JHA处理24和48 h后,PLK和PNPO的转录水平出现下调且与对照的差异达到极显著（P〈0.01）。【结论】20-E和JHA显著影响家蚕5龄幼虫PLK和PNPO的转录水平,20-E提高5龄前期家蚕PLK和PNPO的转录水平,JHA降低5龄后期它们的转录水平,为深入研究激素对VB_6的调控奠定基础。
- 杨欢欢姚丽丽张剑韵黄龙全
- 关键词：家蚕保幼激素类似物吡哆醛激酶磷酸吡哆醇氧化酶转录水平
