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文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇视网膜
  • 3篇网膜
  • 2篇印迹
  • 2篇印迹法
  • 2篇腺相关病毒
  • 2篇免疫
  • 2篇免疫印迹
  • 2篇免疫印迹法
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡相关
  • 1篇凋亡相关分子
  • 1篇信号
  • 1篇信号转导
  • 1篇信号转导分子
  • 1篇神经损伤
  • 1篇视神经
  • 1篇视神经损伤
  • 1篇视网膜节
  • 1篇视网膜节细胞
  • 1篇重组腺相关病...

机构

  • 3篇第二军医大学

作者

  • 3篇许家军
  • 3篇黄婷婷
  • 2篇王栋
  • 2篇张守梅
  • 1篇曹文珞
  • 1篇刘芳

传媒

  • 2篇解剖学报
  • 1篇解剖科学进展

年份

  • 1篇2017
  • 2篇2016
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
玻璃体注射腺相关病毒2和慢病毒转染大鼠视网膜的比较被引量:2
2016年
目的通过玻璃体注射重组腺相关病毒2载体(r AAV2)和慢病毒载体(LV),比较两者转染成年大鼠视网膜的异同。方法实验组大鼠60只,每组12只玻璃体内分别注射重组腺相关病毒2载体-增强绿色荧光蛋白(r AAV2-EGFP)、重组腺相关病毒2载体-神经突起素-增强绿色荧光蛋白(r AAV2-neuritin-EGFP)、慢病毒载体-红色荧光蛋白(LV-RFP)和慢病毒载体-神经突起素-红色荧光蛋白(LV-neuritin-RFP),对照组注射等量的生理盐水,4周后取材,采用免疫荧光和CTB-FITC检测2种病毒载体在视网膜中转染的细胞及转染率,然后分别采用Real-time PCR和Western blotting检测神经突起素(neuritin)在视网膜中的表达变化。结果 r AAV2能够转染约70%视网膜节细胞(RGCs),LV主要转染色素上皮细胞,RGCs转染率仅为30%;r AAV2-neuritin-EGFP组神经突起素mRNA表达约是r AAV2-EGFP组和对照组的16倍,蛋白表达约为3倍;LV-neuritin-RFP组神经突起素mRNA表达约是LVRFP组和对照组的5.5倍,蛋白表达约为1.7倍。结论 r AAV2玻璃体注射后,转染大部分RGCs且神经突起素表达量高于LV,LV主要转染色素上皮细胞,提示基因治疗眼科疾病和损伤时,涉及到转染RGCs时应采用r AAV2载体,转染色素上皮时宜采用LV载体。
黄婷婷曹文珞张守梅王栋许家军
关键词:慢病毒视网膜免疫印迹法
Pim-1基因重组腺相关病毒2载体的构建及感染大鼠视网膜
2017年
目的构建携带大鼠原癌基因Pim-1的重组腺相关病毒2载体(rAAV2-Pim-1),检测其体内感染大鼠视网膜的细胞类型及目的基因Pim-1在视网膜中的表达。方法 p AOV-CAGMINI-EGFP-2A-MCS-3FLAG载体及Pim-1基因PCR产物用Nhel酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定后回收载体及目的基因DNA并连接转化,鉴定质粒阳性克隆及测序。rAAV2-Pim-1表达质粒p AOV-CAGMINI-EGFP-2A-Pim-1-3FLAG及包装质粒p AAV-RC和辅助质粒p Helper,通过Lipofectamine 2000共转染293细胞,纯化获得高滴度的rAAV2-Pim-1。大鼠玻璃体注射rAAV2-Pim-1,用免疫荧光组织化学检测其感染视网膜的细胞类型;用Real-time PCR和Western blotting检测Pim-1在视网膜中的表达。结果rAAV2-Pim-1质粒构建成功并且核苷酸序列比对正确;质粒转染293细胞后出现绿色荧光;包装出的病毒浓缩滴度为5.7×1015vg/L。rAAV2-Pim-1组体内感染视网膜神经节细胞(RGCs)达71%,并感染少量无长突细胞,几乎不感染星形胶质细胞;Pim-1 mRNA和蛋白在视网膜中的表达约为rAAV2-EGFP组的6.61倍和2.29倍。结论成功构建rAAV2-Pim-1病毒载体,并在感染后的大鼠视网膜RGCs中过表达Pim-1。
张守梅黄婷婷王栋刘芳许家军
关键词:PIM-1视网膜免疫印迹法
视神经损伤的基因治疗
2016年
视神经损伤后会引起视网膜节细胞(RGCs)的凋亡和轴突再生困难。基因治疗是近年来治疗视神经损伤的研究焦点,有望成为有效手段之一。其中载体和靶分子是基因治疗的核心,现在应用的载体主要包括非病毒载体和病毒载体两类,选用合适的载体是基因治疗成功的基础;靶分子主要包括神经营养因子、凋亡相关分子、生长抑制因子、信号转导分子等。本文综述了视神经损伤后基因治疗的相关研究进展。
黄婷婷许家军
关键词:视神经损伤基因治疗RGCS凋亡相关分子视网膜节细胞信号转导分子
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