目的研究蛋白质-O-甘露糖转移酶-2(PMT2)基因对酿酒酵母复制性寿命的影响。方法依据基因同源重组原理,构建PMT2基因缺失(pmt2)或基因过表达(PMT2-ox)酵母菌株;实时定量PCR验证菌株中PMT2基因转录水平;显微镜下分离和计数酵母子细胞数目,检测酵母细胞的复制性寿命。结果成功构建PMT2基因缺失或过表达酵母菌株,实时定量PCR证明PMT2 m RNA在pmt2菌株中无表达,在PMT2-ox菌株中表达上调。与野生型酵母细胞的平均寿命(约23代)比较,pmt2菌株的寿命为(25.2±8.9)代,PMT2-ox菌株的寿命为(24.1±7.3)代,寿命无明显延长(P>0.05)。结论酿酒酵母PMT2基因不参与复制性寿命的调控。
酵母作为经典的模式生物,既具有原核生物生长快、基因操作简便的特点,又具有真核生物翻译后加工修饰功能的特点,已作为衰老研究及寿命相关基因鉴定的理想研究模型。营养反应激酶雷帕霉素靶蛋白(TOR,target of rapamycin),在进化上高度保守,可通过调节细胞应激反应、自噬作用、代谢和核糖体生成及控制氮源碳源的代谢等生物过程影响细胞生命周期。近年来研究表明TOR与衰老进程关系密切,因此本文拟就TOR蛋白在酵母寿命研究中的最新进展进行综述,以期为高等生物衰老的研究提供线索。