凌厉
- 作品数：5 被引量：46H指数：3
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- 雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾小球足细胞病变的保护作用
- 目的 观察雷公藤多苷(Tripterygium Wilfordii Polyglycosides,TWP)对DN大鼠蛋白排泄量、肾脏病理改变及足细胞表型蛋白nephrin表达的影响,探讨TWP对糖尿病大鼠肾小球足细胞的保...
- 凌厉陈立波张长宁
- 糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9表达及意义被引量：3
- 2016年
- 目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在糖尿病肾病发生、发展中的作用。方法将60只Wistar大鼠随机分为两组,对照组24只、模型组36只,模型组一次性腹腔注射链脲佐菌素(150 mg/kg)制备糖尿病模型,成模24只;对照组注射等量的柠檬酸缓冲液。给药1、2、4、8周时,两组分别随机选择6只大鼠,取其肾组织观察病理学变化,标本行HE染色,采用免疫组化法检测肾组织MMP-9表达,计数每个肾小球内MMP-9染色阳性的足细胞(MMP-9阳性足细胞)数量。采用RT-PCR法检测肾组织TET1蛋白、活化因子蛋白1(AP-1)mRNA相对表达量。结果模型组给药1、2、4、8周时可见肾小球体积逐渐增大,基底膜逐渐增厚,毛细血管袢逐渐扩张,伴随肾小管扩张或萎缩,可见轻度纤维化。对照组给药1周时MMP-9阳性足细胞数量为(0.47±0.31)个;模型组给药1、2、4、8周时MMP-9染色阳性足细胞数量分别为(2.75±1.29)、(4.59±1.63)、(7.95±2.36)、(15.61±2.77)个,呈逐渐增高趋势,且均高于对照组,组间及组内比较P均<0.05。模型组给药后1、2、4、8周时肾组织AP-1、TET1相对表达量呈逐渐增高趋势,且均高于同时间点对照组,组间及组内比较P均<0.05。结论 MMP-9高表达参与了糖尿病肾病的发生、发展,激活AP-1、TET1基因可能是其作用机制。
- 凌厉陈立波劳国娟张长宁
- 关键词：糖尿病肾病基质金属蛋白酶9
- 雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾小球足细胞病变的保护作用被引量：10
- 2016年
- 目的探讨雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞病变及肾皮质nephrin蛋白表达的影响,为糖尿病的治疗提供实验依据。方法建立高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)诱导DN大鼠模型,按随机数字表法分为DN组13只,小剂量TWP组(每天8 mg/kg)13只和大剂量TWP组(每天16 mg/kg)14只,并以正常大鼠为对照组(n=15)。干预12周后检测大鼠24 h尿蛋白量、血肌酐值(SCr)、尿素氮(BUN)、血糖(Glu)、肾质量/体质量的变化,并以光学显微镜及电子显微镜观察肾脏组织病理改变;免疫荧光法检测肾皮质nephrin蛋白表达。用SPSS 13.0统计软件进行单因素方差分析。结果与对照组大鼠[(0.06±0.02)mg]比较,DN组大鼠24 h尿蛋白[(1.87±0.12)mg]明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),TWP干预可显著减少糖尿病大鼠尿蛋白排泄,小剂量和大剂量TWP组尿蛋白分别为(0.98±0.21)、(0.33±0.11)mg,与DN组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),此效应与TWP干预剂量相关,大剂量TWP组尿蛋白较小剂量TWP组下降更明显,差异统计学意义(P<0.05)。病理结果显示,DN组表现为肾小球体积增大,基底膜增厚,系膜基质显著增多,足细胞足突增宽、融合、细胞减少;TWP组大鼠肾小球、小管间质及足细胞病变明显减轻。免疫组化结果显示,DN组大鼠肾脏皮质nephrin蛋白表达[每个肾小球平均(2.35±1.75)个]较对照组大鼠肾脏皮质nephrin蛋白表达[每个肾小球平均(18.24±2.89)个]明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),而TWP组大鼠肾脏皮质nephrin蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.01),且小剂量TWP组[每个肾小球平均(11.34±1.56)个]与大剂量TWP组[每个肾小球平均(15.27±2.03)个]的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TWP干预可缓解DN大鼠足细胞病变,肾皮质nephrin蛋白表达上调可能在该保护机制中发挥作用。
- 凌厉陈立波劳国娟张长宁林刁珠
- 关键词：糖尿病肾病雷公藤多苷足细胞
- 肿瘤坏死因子α诱导位点特异性DNA去甲基化促进基质金属蛋白酶9的表达被引量：2
- 2016年
- 目的研究肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导位点特异性DNA去甲基化促进人表皮角质细胞基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达。方法用10ng／ml的TNF-α或2．5μmol／L的5-氮杂-2’-脱氧胞苷（DAC）联合300nmol／L的曲古菌素A（TSA）处理人表皮角质细胞株HaCaT细胞，采用实时荧光定量PCR（Real-time RT-PCR）检测各组细胞MMP9mRNA水平，采用蛋白质印迹（WesternBlot）及酶联免疫吸附法（ELISA）检测MMP9蛋白的表达水平。应用亚硫酸氢钠修饰后测序法（BSP）及甲基化敏感性高分辨率熔解曲线法（Ms-HRM）检测TNF-α干预细胞后MMP9启动子区DNA甲基化改变差异最大的CpG位点。构建不同位点甲基化的MMP9启动子一荧光素酶报告基因重组质粒，检测特异性位点的DNA甲基化状态改变对MMP9启动子转录活性的影响。结果各培养时间点。TNF-α干预组均较相应PBS对照组HaCaT细胞拘MMP9表达量升高，且差异均有统计学意义（P〈0．05）；经实时RT—PCR、蛋白质印迹和ELISA三种方法分别检测到的MMP9mRNA和蛋白表达量随干预时间的变化趋势一致，均为先升高后下降。TNF-α干预后MMP9启动子区的10个CpG位点均发生不同程度的DNA去甲基化改变，其中-36bp位点改变的差异有究计学意义（P〈0．05）。-36bp位点去甲基化后，MMP9转录活性明显提高。TNF-α干预后MMP9启动子爰的10个CpG位点均发生不同程度的DNA去甲基化改变，其中-36bp位点改变的差异有统计学意义：P〈0．05）。-36bp位点去甲基化后，MMP9转录活性明显提高。结论TNF-α通过诱导HaCa]r细胞MMP9基因启动子-36bp位点DNA去甲基化上调MMP9表达。
- 凌厉任萌黎锋杨川严励
- 关键词：DNA去甲基化肿瘤坏死因子Α金属基质蛋白酶9
- 前列地尔对糖尿病肾病患者肾血流参数及纤维化指标的影响被引量：31
- 2016年
- 目的:观察前列地尔治疗糖尿病肾病疗效及其对患者肾血流参数及纤维化指标表达的影响。方法:随机选取本院收治的80例糖尿病肾病患者为研究对象,并分为对照组40例和观察组40例,其中对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗的基础上再增加前列地尔治疗。分别对两组治疗前后的空腹血糖、肾功能相关指标血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率以及纤维化标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(ⅣC)进行检测,采用彩色多普勒超声检测于肾内段动脉收缩期峰值血流速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI)及搏动指数(PI)。结果:观察组治疗后14、28d,尿素氮和尿白蛋白排泄率均明显低于对照组,PSV、EDV快于对照组,RI和PI则低于对照组,血清MMP-9、HA、LN、PCⅢ和ⅣC水平均低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:前列地尔能改善DN患者肾血流供应,从而有效减缓纤维化发展,保护糖尿病患者的肾功能。
- 凌厉劳国娟陈立波林刁珠
- 关键词：糖尿病肾病前列地尔肾血流纤维化
