杨艳梅
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 细胞色素C氧化酶亚基Cox4的克隆及高效表达被引量:1
- 2018年
- Cox4是电子传递链上复合体Ⅳ的1个关键亚基,实现Cox4的高效表达以及制备其抗体,对于线粒体功能研究至关重要。根据裂殖酵母序列信息数据库(S.pombe_Gene DB)中cox4的基因序列(登录号:SPAC1296.02)设计引物,以粟酒裂殖酵母的c DNA序列为模板,通过PCR扩增技术得到目标蛋白的基因,然后通过克隆构建到含有T7强启动子的表达载体p ET-28a(+)上,并将其转入大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)中实现重组工程菌株的构建。结果表明,通过一系列条件优化实现了对重组工程菌株中Cox4的高效表达,并纯化得到大量相应蛋白,最后以纯化的蛋白为抗原成功制备了Cox4抗体。Cox4抗体的成功制备为粟酒裂殖酵母中线粒体功能研究奠定了基础。
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- 关键词:线粒体粟酒裂殖酵母细胞色素C氧化酶
- 粟酒裂殖酵母Trz2参与线粒体RNA加工和细胞凋亡的功能研究
- 线粒体是真核生物细胞中一种重要的细胞器。最近的研究表明,线粒体的功能失调与多种疾病相关,如艾滋病、神经退行性疾病和癌症。粟酒裂殖酵母是一种优秀的研究线粒体遗传学和分子生物学的模式生物,并为研究各种细胞器和核-线粒体的相互...
- 杨艳梅
- 关键词:生物细胞细胞凋亡线粒体结构基因表达
- 文献传递
- 粟酒裂殖酵母线粒体及线粒体RNA的提取被引量:1
- 2016年
- 粟酒裂殖酵母是一个研究线粒体生物合成的优秀的真核生物模型。本研究利用差速和蔗糖梯度离心法获得了粟酒裂殖酵母线粒体。用BCA法检测了线粒体蛋白浓度,用Western-blot和电子显微镜检测了线粒体纯度以及完整度。以纯化获得的线粒体进行RNAs提取,得到包括t RNA和小RNA在内的线粒体RNA,并用电泳和定量PCR检测了线粒体RNAs的纯度和完整度。结果表明,我们得到了高质量的粟酒裂殖酵母线粒体和线粒体RNAs。线粒体和线粒体RNA制备方法为研究蛋白靶标、蛋白定位和线粒体RNA加工提供了技术工具。
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- 关键词:粟酒裂殖酵母线粒体RNA
- Loss of ppr3,ppr4,ppr6 or ppr10 perturbs iron homeostasis and leads to apoptotic cell death in Schizosaccharomycespombe
- Pentatricopeptide repeat(PPR)proteins characterized by tandem arrays of a degenerate 35-amino-acid repeat belo...
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- 粟酒裂殖酵母Sls1在线粒体中的功能研究
- 2016年
- 线粒体是真核生物中非常重要的细胞器之一,它参与ATP的合成以及物质代谢、细胞凋亡等多种生理过程。在研究线粒体功能时,粟酒裂殖酵母是一种很好的模式生物。在本文中,我们研究了与线粒体相关的蛋白Sls1的功能。在非发酵型培养基上,Δsls1突变菌株的生长出现缺陷。Western-Blot实验表明,在Δsls1菌株中,线粒体编码蛋白的水平也出现了剧烈的降低。敲除sls1影响了线粒体编码蛋白Cox1的合成。我们的研究表明Sls1是一个与线粒体功能密切相关的蛋白,它的其中一个功能是维持了线粒体编码蛋白的正常水平,并且参与了线粒体编码蛋白Cox1的合成。
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- 关键词:线粒体粟酒裂殖酵母