杨朝晖
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 改良ATMT转化技术在深绿木霉基因敲除中的应用被引量：2
- 2015年
- 木霉菌是环境中具有重要经济价值的丝状真菌之一。高效率的基因敲除技术是深入研究木霉菌功能的必要手段。研究改进了传统的农杆菌介导的遗传转化技术（ATMT）,成功构建深绿木霉T23中碳代谢抑制因子cre1基因敲除突变株。首先查找深绿木霉全基因组序列,比对并扩增cre1基因侧翼序列,以改造后的p1300qh质粒为骨架构建cre1敲除载体p C1300qh：cre1-up∷hyg∷cre1-down,转化到农杆菌AGL-1。通过优化ATMT转化中木霉菌分生孢子浓度,改良培养方式和延长诱导转化时间等参数,获得最佳转化条件：木霉菌分生孢子浓度为8×10~6,筛选培养基改为IM培养基,诱导转化时间延长,成功筛选到可能的转化子10个。最后,经鉴定有1个转化子为cre1敲除转化子,9个为T-DNA随机插入。因此,为深绿木霉菌基因功能研究提供了可借鉴的高效便捷的遗传转化方法。
- 周于聪谢秋瑾宋凯杨朝晖陈捷李雅乾
