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类弹性蛋白标签在大肠杆菌周质空间中表达研究被引量：2: 2016年; 旨在研究类弹性蛋白[I]_(40)(elastin-like polypeptide[I]_(40),ELP[I]_(40))在大肠杆菌周质空间的表达。构建表达载体pIG6LH/ELP[I]_(40)及pIG6LH/ELP[I]_(40)+Trx,分别将构建的表达载体转化入表达宿主菌E.coli BLR(DE3),IPTG诱导表达,采用可逆相变循环(Inverse transition cycling,ITC)技术纯化蛋白。测定ELP[I]_(40)及ELP[I]_(40)+Trx蛋白相变温度(T_t),检测ELP[I]_(40)、ELP[I]_(40)+Trx蛋白浓度及NaCl对相变温度的影响。结果显示,经3轮ITC纯化得到了ELP[I]_(40)、ELP[I]_(40)+Trx蛋白。分别测定ELP[I]_(40)和ELP[I]_(40)+Trx在10、25、50、75和100μmol/L浓度下的T_t,其T_t依次为31.5℃、29℃、27℃、26℃、25℃和31.8℃、29.5℃、27.5℃、26℃、25.5℃;测定了不同浓度的NaCl对T_t影响,在ELP[I]_(40)和ELP[I]_(40)+Trx终浓度为25μmol/L,NaCl浓度为0.25、0.5、0.75、1.00和1.25 mol/L时,分别使ELP[I]_(40)的T_t由29℃降至24.5℃、22℃、19℃、15℃和11.5℃,使ELP[I]_(40)+Trx的T_t由29.5℃降至25℃、23℃、20.2℃、15.5℃和11.8℃。在大肠杆菌周质空间表达的ELP[I]_(40)与胞内表达的具有相同的理化性质,ELP可作为在大肠杆菌周质空间表达的蛋白质分离纯化标签。; 李晶泉林衡丁宁左晓雪史晋萍徐永平冷春玲杨春光; 关键词：硫氧还蛋白大肠杆菌分离纯化

一种金黄色葡萄球菌特异性鸡卵黄免疫球蛋白可变区单链抗体及用途: 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌特异性鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)可变区单链抗体，所述特异性鸡卵黄免疫球蛋白可变区抗体具有SEQ ID NO：2核苷酸序列，和SEQ IDNO：1所示的氨基酸序列。该单链抗体对金黄色葡萄球菌具...; 徐永平李晶泉李晓宇李媛王丽丽李淑英; 文献传递

一种金黄色葡萄球菌特异性鸡卵黄免疫球蛋白可变区单链抗体及用途: 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌特异性鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)可变区单链抗体，所述特异性鸡卵黄免疫球蛋白可变区抗体具有SEQ ID NO：2核苷酸序列，和SEQ IDNO：1所示的氨基酸序列。该单链抗体对金黄色葡萄球菌具...; 徐永平李晶泉李晓宇李媛王丽丽李淑英

抗金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的原核表达及蛋白纯化被引量：1: 2016年; 旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,(1)成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的重组质粒p Cold I-scFv,质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中;(2)经过诱导表达后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中;(3)使用4 mol/L尿素成功地将包涵体变性溶出;(4)通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白;(5)间接ELISA鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤,最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白。; 李晶泉徐永平王熙涛李媛王丽丽李晓宇; 关键词：可溶性表达包涵体蛋白纯化蛋白复性

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李晶泉