和小明 作品数:3 被引量:10 H指数:1 供职机构: 湖南农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
褐黄血蜱cystatin基因全长的克隆及原核表达研究 2018年 为了探讨褐黄血蜱体内半胱氨酸蛋白抑制剂(cystatin)蛋白及其编码基因的情况,试验基于褐黄血蜱唾液腺转录组数据库中搜索的注释为cystatin的contig_43533序列设计引物,RACE扩增其5′端和3′端,拼接获得cDNA全长,利用生物信息学软件进行分析;以饱血褐黄血蜱雌成虫全蜱总cDNA为模板,扩增cystatin-ORF,构建重组表达载体,原核表达、纯化制备cystatin重组蛋白。结果表明:褐黄血蜱cystatin cDNA全长635 bp,包含396 bp的开放阅读框架,编码一个含131个氨基酸残基的蛋白,原核表达可获得褐黄血蜱cystatin重组蛋白。说明褐黄血蜱cystatin蛋白能在大肠杆菌内以可溶性形式稳定表达。 和小明 刘磊关键词:半胱氨酸蛋白酶抑制剂 基因全长 原核表达 采用PCR-DGGE技术分析白蚁肠道内细菌种类 2016年 笔者分别在松树和桃树上采集白蚁,提取肠道细菌基因组DNA,采用PCR-DGGE技术扩增16SrDNA V3区,DGGE电泳,切胶、回收、测序。结果显示,在不同树木上采集的白蚁肠道内含有16种以上不可培养的细菌,并且松树上采集的白蚁跟桃树上采集的白蚁肠道菌群结构不同。说明不同的食物及生活环境对白蚁肠道内微生物菌群有一定影响,相关数据可以为合理利用白蚁肠道内的微生物以及防控白蚁害提供基础数据。 江涛 葛明伟 李周勉 易锦辉 俞辉 和小明关键词:白蚁 DGGE 肠道 菌群 褐黄血蜱唾液菌群结构分析 被引量:10 2016年 为了解褐黄血蜱唾液内细菌的种类和传播途径,本研究分别提取褐黄血蜱饱血、半饱血的蜱虫及其唾液细菌总DNA,以其为模板,以通用引物扩增细菌16S r DNA V3区,并对其进行序列分析。结果表明,唾液内优势菌序列分别与狡诈球菌、鞘氨醇单胞菌属、立克次体、不可培养的细菌序列高度相似。虫体的优势菌序列与葡萄球菌属、立克次体、柯克斯体属的序列相似。饱血、半饱血蜱的唾液菌群结构存在一定差异,而蜱虫与其唾液的菌群结构差异很大。本研究表明褐黄血蜱唾液含条件致病菌,有经唾液传播疾病的潜在风险。 和小明 唐欢 程天印关键词:PCR-DGGE 唾液 菌群