唐新
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 一种提高家蚕产丝量的方法
- 本发明公开了提高家蚕产丝量的方法，通过亮氨酸处理家蚕或在家蚕后部丝腺过量表达BmSLC7A5基因，激活mTORC1信号通路，调节蛋白质翻译过程，促进蚕丝蛋白合成，该方法处理的家蚕或转基因家蚕具有很好的经济性状，吐丝量提高...
- 赵萍唐新夏庆友
- 文献传递
- 家蚕丝氨酸蛋白酶BmSP141的表达特征及对饥饿的响应被引量：4
- 2016年
- 【目的】分析家蚕(Bombyx mori)丝氨酸蛋白酶基因BmSP141序列信息,明确其时空表达模式,结合饥饿与重新喂食处理对其表达的影响,探究该基因在家蚕中的功能。【方法】对家蚕丝氨酸蛋白酶基因BmSP141进行T-A克隆,得到其编码区核苷酸序列;应用生物信息学在线网站对该基因编码区推导的氨基酸序列、分子量、结构域等信息进行分析;利用Clustal X1.8和MEGA5.02软件对BmSP141与其他物种的丝氨酸蛋白酶进行多序列比对和系统发生树分析;构建原核表达载体p28-BmSP141,并转化到Rosetta(DE3)菌株中诱导表达,利用镍柱亲和层析纯化重组蛋白。利用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR方法对其组织和时期表达特征进行分析;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)技术,分别分析BmSP141蛋白在家蚕5龄第3天各组织的表达情况和5龄幼虫中肠的表达变化;通过免疫荧光定位分析BmSP141蛋白在4龄幼虫中肠的分布情况;利用实时荧光定量PCR和Western blot方法对饥饿处理和再喂食后BmSP141的表达情况进行分析。【结果】BmSP141编码含有292个氨基酸的蛋白,其中第1—17位氨基酸为信号肽,其成熟体蛋白预测分子量为25.9 k D,等电点为7.8。同源序列比对表明,BmSP141与烟芽夜蛾丝氨酸蛋白酶和蓓带夜蛾丝氨酸蛋白酶序列同源性较高,分别达到62%和63%。这些同源序列具有保守的催化三联体,与活性相关的基序也很保守,但与胰凝乳蛋白酶保守的底物特异性位点相比,BmSP141的底物特异性位点发生改变。在16和37℃条件下诱导后,重组蛋白均以包涵体形式表达,经镍柱亲和层析纯化后得到了较纯的重组蛋白,并用该蛋白制备了效价较高的多克隆抗体。组织和时期表达特征分析表明,该基因主要在家蚕幼虫的中肠组织特异性表达,且在幼虫起蚕到食桑期表达逐渐增加,但眠期表达下降,蛹期和成虫期表达水平较低。Western blot分析也表�
- 刘华伟李游山唐新张晓璐赵萍
- 关键词：家蚕丝氨酸蛋白酶中肠饥饿
- 利用氨基酸转运蛋白及mTORC1信号通路提高家蚕产丝效率
- 经过几千年的人工驯化，家蚕(Bombyx mori)成为了一种具有重要经济价值的昆虫。蚕丝是家蚕主要的经济产物，因此蚕丝产量的多少决定了家蚕经济价值的高低。业界内通常用茧层率(茧层重/茧重)来衡量蚕丝产量的高低，家蚕的茧...
- 唐新
- 关键词：家蚕
- 文献传递
- 一种提高家蚕产丝量的方法
- 本发明公开了提高家蚕产丝量的方法，通过亮氨酸处理家蚕或在家蚕后部丝腺过量表达BmSLC7A5基因，激活mTORC1信号通路，调节蛋白质翻译过程，促进蚕丝蛋白合成，该方法处理的家蚕或转基因家蚕具有很好的经济性状，吐丝量提高...
- 赵萍唐新夏庆友
