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滇重楼茎叶总皂苷抗肝癌HepG2细胞活性被引量：9: 2016年; 探究滇重楼茎叶总皂苷对肝癌HepG2细胞增殖的抑制、细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡作用。从滇重楼地上茎叶提取总皂苷,配制成浓度为10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L、80μg/m L和160μg/m L的总皂苷提取物处理HepG2细胞。总皂苷提取物对细胞增殖的抑制作用采用MTT法检测;对细胞周期阻滞作用采用流式细胞术检测;诱导细胞凋亡的作用采用细胞核荧光染色、流式细胞术和caspase-3活性试剂盒检测。结果表明,滇重楼茎叶总皂苷提取物能显著抑制细胞增殖,且具有时间、剂量依赖效应,能阻滞细胞周期于S期,并能诱导细胞凋亡。但其诱导凋亡作用仅高剂量组(≥80μg/m L)效果显著,低剂量组(<80μg/m L)不显著。; 许新恒康梦瑶匡坤燕杜琳颖韦蒙李云坤淦永鉴曾宪垠曹晓涵孟风艳杜小刚; 关键词：滇重楼细胞周期细胞凋亡 CASPASE-3

GnRH主动免疫雌性大鼠调控机制研究被引量：2: 2016年; 旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量,荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示,主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量,至56周处死时,E2和LH含量有微弱上升,但4种激素含量均显著低于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,主动免疫显著下调下丘脑GPR54、KiSS-1、GnRH和ER-αmRNA,垂体GnRH-R、FSH-β和LH-βmRNA以及卵巢FSHR、LHR和ER-αmRNA的表达水平(P<0.05)。结果表明,GnRH主动免疫能显著抑制雌性SD大鼠性腺发育,降低血清性激素含量,通过下丘脑ER-αmRNA-GPR54/KiSS-1通路保持动物较长时间去势;但GnRH主动免疫造成的动物去势存在恢复的可能。; 曹晓涵韩兴发杜小刚陈志渝孟风艳储明星曾宪垠; 关键词：GNRH 主动免疫雌性大鼠

一种卵泡刺激素β亚基活性肽及其应用: 本发明公开了一种卵泡刺激素β亚基活性肽及其应用。该活性肽具有以下序列：Xm‑Yn‑Zc；X包括T、R、D和L中的至少3种氨基酸；Y为肽段LVYKDPARP...; 韩兴发曾宪垠孟风艳

一种FSH抗原及其制备方法以及含有该抗原的FSH疫苗: 本发明公开了一种FSH抗原及其制备方法以及含有该抗原的FSH疫苗。该疫苗包括偶合有载体蛋白的FSH抗原以及佐剂；FSH抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中第4位和/或第17位氨基酸作为偶联位点与载体蛋白偶联...; 韩兴发曾宪垠卓勇孟风艳; 文献传递

一种FSH抗原及其制备方法以及含有该抗原的FSH疫苗: 本发明公开了一种FSH抗原及其制备方法以及含有该抗原的FSH疫苗。该疫苗包括偶合有载体蛋白的FSH抗原以及佐剂；FSH抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中第4位和/或第17位氨基酸作为偶联位点与载体蛋白偶联...; 韩兴发曾宪垠卓勇孟风艳

GnRH主动免疫对雄性藏绵羊血液中甲状腺激素含量的影响被引量：5: 2017年; 为探讨GnRH并列体二聚物(GnRH-TDK)对雄性藏绵羊甲状腺功能的影响,采用GnRH-TDK主动免疫雄性藏绵羊,并将雄性藏绵羊随机分为免疫去势、手术去势及对照3个组,其中免疫去势组于25周龄时初免,8周后加免;手术去势组在试验开始前1周进行外科手术去势;对照组不做任何处理。以初免当天为0周,每4周采集血样1次,加免后8周屠宰所有试验羊并分离两侧睾丸,应用酶联免疫法(ELISA)测定血清抗体滴度及LH、FSH、T、TSH、T3和T4含量变化。结果表明,免疫去势组绵羊产生了良好的抗体反应,初免及加免后体内抗GnRH抗体滴度均快速升高,且血清T含量显著下降(P<0.05),至屠宰时仍维持在较低水平(4.27 ng·m L^(-1)),同时睾丸严重萎缩。与对照组相比,免疫去势组血清TSH、T3及T4未显著下降。由此可见,GnRH主动免疫对血清中TSH、T3及T4浓度无明显影响,即GnRH主动免疫对雄性藏绵羊甲状腺功能无影响。本研究结果为GnRH主动免疫去势的分子机制以及对机体的影响奠定了理论基础。; 周玉芹宋天增韩兴发谭遥刘亚成曹晓涵杜小刚孟风艳储明星曾宪垠; 关键词：主动免疫 GNRH 甲状腺激素

GnRH主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响: 2016年; 旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血清中睾酮、雌二醇及雄烯酮含量,采用高效液相色谱检测脂肪中粪臭素、雄烯酮和血液中雄烯酮含量,荧光定量PCR检测肝中粪臭素代谢相关基因mRNA表达量,ELISA检测肝中粪臭素代谢相关蛋白表达。结果显示,GnRH主动免疫后,血清睾酮浓度显著下降(P<0.05),睾丸严重萎缩。免疫组和手术组公猪血清中睾酮、雌二醇、雄烯酮浓度和脂肪中粪臭素、雄烯酮含量相似(P>0.05),均显著低于对照组(P<0.05)。免疫组公猪肝中CAR、COUP-TF1、CYP2E1、CYB5A、CYP2C49、GSTO2mRNA表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2A19mRNA表达量手术组显著高于免疫组(P<0.05),免疫组显著高于对照组(P<0.05);而PXR、SULT1A1mRNA表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。免疫组公猪肝中CYP2A19、CYP2C49和GSTO2蛋白表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2E1和CYB5A蛋白表达量在手术组最高,对照组最低,免疫组介于两组之间,与两组均有显著性差异(P<0.05);而SULT1A1蛋白表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。综上表明,GnRH主动免疫降低公猪血清中睾酮、雌二醇和雄烯酮含量,上调肝CYP450s和GSTO2基因和蛋白表达,加速粪臭素在肝中的代谢,从而降低公猪膻味。; 随芬芬韩兴发曹晓涵杜小刚孟风艳储明星曾宪垠

西藏绒山羊KAP9.2基因CDS克隆、外显子区多态性及表达分析被引量：3: 2019年; KAP9.2基因是角蛋白关联蛋白(keratin associated protein, KAP)中的一员,在毛发的形成过程中有重要的调控作用。本研究对西藏绒山KAP9.2基因CDS进行了克隆;采用直接测序法对绒山羊200个个体KAP9.2基因外显子区的遗传变异情况进行分析;并利用Real-time PCR分析了KAP9.2基因在不同海拔山羊中的表达。结果显示,西藏绒山羊KAP9.2基因CDS序列为576 bp,编码191个氨基酸;KAP9.2基因外显子存在25处SNP位点及一处30 bp的缺失突变,其中12处SNP为错义突变,其他13处为同义突变。遗传多态性分析表明KAP9.2基因多态性丰富,遗传变异大;连锁分析发现12与388位点、54与93位点、153与159位点、273与279位点完全连锁,H1为优势单倍型;Real-time PCR显示西藏绒山羊KAP9.2基因在高海拔地区m RNA表达水平显著高于特高海拔地区,推测该基因可能促进绒毛的生长。本研究结果揭示了西藏绒山羊KAP9.2基因的遗传多态性及其在不同海拔的表达,为进一步研究KAP9.2基因潜在的功能位点提供一定的理论依据。; 张丹宋天增程琳芸杜小刚孟风艳卜贵鲜孔繁丽韩兴发储明星曹晓涵曾宪垠; 关键词：多态性

GnRH主动免疫与手术去势公猪的粪便Ca、P含量差异及机制研究: 2021年; 实验旨在探讨促性腺激素释放激素(GnRH)主动免疫与手术去势对公猪粪便Ca、P含量差异影响以及影响机制。选择30头10周龄、体重(27.62±2.18 kg)相近(大白×长白×杜洛克)公猪,随机分为对照组、免疫组和手术去势组,每组10头。其中,对照组不做任何处理,手术去势组公猪在出生1周内进行手术阉割,免疫组公猪于10周龄时耳后颈部肌肉注射2 mL 62.5μg GnRH肽当量去势疫苗,8周后加免。加免后饲喂8周屠宰所有公猪,进行血液生长相关激素浓度、小肠黏膜Ca、P转运载体基因表达及粪便Ca、P含量分析。结果显示:与对照组相比,公猪手术去势后十二指肠黏膜Ca转运载体瞬时受体阳离子通道亚家族V成员6(TRPV6)及质膜钙泵1(PMCA1)和P转运载体2B型磷酸钠协同转运蛋白(NPT2b)mRNA表达下调(P<0.05),粪便中Ca、P含量增加(P<0.05);而公猪GnRH主动免疫后上述Ca、P转运载体基因mRNA表达无显著变化,粪便Ca、P含量低于手术去势公猪(P<0.05)。ELISA检测发现,GnRH免疫组公猪血清生长激素(GH)及胰岛素生长因子1(IGF1)浓度高于手术去势组公猪(P<0.05),并且血清IGF1浓度与TRPV6、PMCA1及NPT2bmRNA表达呈正相关(P<0.05)。结果表明,与外科去势相比,GnRH主动免疫不下调公猪肠道黏膜Ca、P离子转运载体基因表达,因而粪便Ca、P含量较低,这可能与其体内相对较高的GH-IGF1有关。; 王彦旭韩兴发曾宪垠曹晓涵孟风艳; 关键词：CA P 粪便去势公猪

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