刘慧中
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学部地方病研究所更多>>
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- T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响，为大骨节病软骨损伤研究提供依据。方法用分化培养基（常规培养液含1％ITS）分别诱导鼠软骨前体细胞系ATDC50、7、14、21d，实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）检测胶原蛋白Ⅱ（ColⅡ）、胶原蛋白X（Col X）的mRNA水平．确定其处于软骨不同分化层；T-2毒素（含量分别为1、5、10、20、50、100μg／L）和T-2毒素＋硒（0．1mg／L）分别作用于ITS诱导0、7、14、21d的ATDC5细胞24、48h，噻唑蓝（MTr）法检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响。结果ITS诱导ATDC5细胞14、21d，软骨细胞C01UmRNA（10．73±4．55、3．16±0．19）均高于0d（1．00±0．00，P均〈0．05）；ITS诱导ATDC5细胞21d，软骨细胞ColXmRNA（49．21±9．54）显著高于0d（1．00±0．00，P〈0．05）。低含量T-2毒素（1、5、10μg／L）作用不同分化层细胞24h出现代谢性补偿现象刺激细胞增殖，作用48h无代谢补偿现象；中高含量T-2毒素（20、50、100μg／L）作用不同分化层细胞24、48h，T-μ2毒素对21d细胞的抑制率[24h：（13．92±2．47）％、（47．78±4．22）％、（67．24±2．48）％，48h：（15．84±2．85）％、（55．31±0．50）％、（70．89±9．88）％]均低于0d[24h：（38．46±6．14）％、（53．20±6．20）％、（73．94±1．93）％，48h：（74．83±1．80）％、（88．98±1．51）％、（92．68±0．42）％]、7d[24h：（24．15±1．27）％、（45．19±1．29）％、（71．79±0．94）％，48h：（47．91±4．71）％、（77．84±0．52）％、（89．41±0．52）％]、14d[24h：（25．87±5．41）％、（62．50±2．50）％、（75．34±1．81）％，48h：（59．53±1．13）％、（80．32±4．54）％、（95．22±1．22）％，P均〈0．05]。T-2毒素＋硒作用不同分化层细胞48h，中高含量T-2毒素（20、50、100μg／L）＋硒时，T-2毒素对21d细胞的抑�
- 何颖陈静宏张丹王梦莹曹峻岭张莹马天有张迎刘慧中
- 关键词：T-2毒素硒大骨节病
- 低硒条件下T-2毒素中毒对大鼠关节软骨氧化损伤作用被引量：6
- 2016年
- 目的通过观察低硒条件下T．2毒素中毒大鼠血清丙二醛（MDA）的变化以及关节软骨4．羟基壬烯醛（4．HNE）和8．羟基鸟苷（8-OHdG）的表达水平，探讨低硒条件下T．2毒素中毒对大鼠关节软骨的氧化损伤作用。方法32只雄性健康SD大鼠按体质量采用随机数字表法分为2组，每组16只。常规饲料组给予硒含量为101．5μg／kg饮食，低硒饲料组给予硒含量为1．1μg／kg饮食。30d后，将常规饲料组分为对照组和T．2组。低硒饲料组分为低硒组和低硒＋T．2毒素组，每组8只大鼠。T．2组和低硒＋T．2毒素组给予T．2毒素（100mg·kg-1·d-1）灌胃饲养。30d后处死大鼠，取左侧膝关节，以HE和番红0．固绿染色，光镜下观察大鼠膝关节软骨病理学改变；免疫组织化学方法检测大鼠关节软骨细胞8-OHdG和4．HNE的表达水平；并用硫代巴比妥酸法检测大鼠血清丙二醛（MDA）含量。结果光镜下低硒＋T．2毒素组关节软骨深层可见片状坏死，软骨细胞死亡变为红染的“细胞影子”。或红染的无结构区域，番红．固绿着色显著减少。低硒＋T一2毒素组8-OHdG和4．HNE阳性表达率[（62．61±10．97）％、（75．03±7．92）％]明显高于对照组[（3．41±2．48）％、（2．28±1．74）％，F：16．24，18．61，P均〈0．05）]。各组血清MDA含量比较，差异有统计学意义（F=4．32，P〈0．05），其中低硒组、T-2毒素组血清MDA含量[（2．803±0．163）、（2．890±0．453）μmol／L]明显高于对照组[（1．873±0．475）μmol／L，P均〈0．05]，低硒＋T．2毒素组血清MDA含量[（3．521±0．292）μmol／L]明显高于低硒组和对照组（P均〈0．05）。结论低硒条件下T-2毒素中毒引起大鼠关节软骨过氧化产物标志物升高。低硒与T．2毒素中毒的大鼠软骨破坏及其软骨细胞死亡与氧化损伤有关。
- 刘慧中王伟夏云王治伦杨浩杰薛森海陈静宏
- 关键词：低硒T-2毒素
- 血管细胞黏附分子-1在大骨节病软骨细胞异常分化过程中的作用被引量：4
- 2018年
- 目的观察血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1）在氧化应激诱导的肥大软骨细胞、大骨节病（KBD）儿童和成人关节软骨以及低硒和T-2毒素中毒大鼠膝关节软骨的表达变化，探讨VCAM-1在大骨节病深层软骨细胞坏死以及分化异常中的作用。方法采用1％混合液（含10mg/L胰岛素、5．5mg／L转铁蛋白、6．7μg/L亚硒酸钠）对小鼠软骨前体细胞ATDC5作用21d，诱导为肥大软骨细胞，选择5-氨基-3-（4-吗啉基）-1，2，3-恶二唑盐酸盐（3-morpholino-sydnonimine hydroehloride，SIN-1）作为自由基供体构建氧化应激致肥大软骨细胞坏死模型。采用荧光定量（Real-time）PCR检测不同浓度SIN-1诱导的肥大软骨细胞中VCAM-1mRNA表达情况。采用免疫组织化学技术检测KBD儿童、成人及对照组关节软骨各层软骨细胞VCAM-1表达情况。采用免疫组织化学技术检测低硒和T-2毒素中毒KBD大鼠动物模型膝关节软骨及骺板软骨各层软骨细胞VCAM-1的表达水平。结果随SIN-1浓度梯度（0、1、3、5mmoL／L）增高，诱导的小鼠关节软骨肥大细胞中VCAM-1mRNA表达降低（1．00±0．00、1．22±0．20、0．71±0．22、0．37±0．16），组间比较差异有统计学意义（F=27．788，P〈0．05）；KBD儿童关节软骨表层、中层VCAM-1阳性细胞率[（16．08±5．20）％、（19．20±9．71）％]高于对照组[（0．00±0．00）％、（0．00±0．00）％]，深层VCAM—1阳性细胞率[（7．00±4．40）％]低于对照组[（51．60±20．58）％，t表、中、深=-10．972、-6．249、6．564，P均〈0．05]。KBD成人关节软骨表层VCAM-1阳性表达率[（7．92±4．29）％]高于对照组[（3．12±1．12）％]，中层[（17．54±8．27）％]表达低于对照组[（31．75±13．30）％]，组间比较差异有统计学意义（t表、中=-3．824、3．037，P〈0．05）。动物实验中，与对照组[（1．89±1．76）％]比较。低硒
- 邵明明邵明明张迎张迎张丹张莹刘慧中何颖王梦莹卢洁孙健陈静宏
- 关键词：大骨节病血管细胞黏附分子-1
- 核心蛋白聚糖表达减少与大骨节病软骨坏死的相关性研究被引量：2
- 2016年
- 目的 观察大骨节病（KBD）儿童手指关节软骨和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠膝关节软骨核心蛋白聚糖（Decorin）的表达,以及T-2毒素和硒对培养软骨细胞Decorin表达的影响,分析Decorin与KBD软骨坏死的相关性.方法 以5例尸检KBD儿童（KBD组）和5例因车祸死亡或畸形手术儿童（对照组）手指关节软骨为研究对象,采用免疫组织化学染色法检测儿童手指关节软骨Decorin的表达情况.选取雄性健康SD大鼠32只,按体质量采用随机数字表法分为常规组、低硒组,每组16只,常规组饲料硒含量为101.5 μg/kg,低硒组饲料硒含量为1.1 μg/kg,30 d后常规组又分为常规组和常规＋T-2组,低硒组分为低硒组和低硒＋T-2组,每组8只,T-2毒素（100 μg/kg,每日2次）采取灌胃饲养,30 d后处死大鼠,取左侧膝关节,用免疫组织化学染色方法检测大鼠关节软骨细胞Decorin表达.体外培养人软骨细胞系C28/I2细胞,加入不同浓度的T-2毒素（0、1、6、12 μg/L）和硒（0、0.1 rmg/L）作用72 h,采用实时荧光定量PCR法检测Decorin mRNA表达.结果 KBD组儿童手指关节软骨表、中、深层Decorin阳性软骨细胞密度[（1.75土0.95）％、（8.92±3.45）％、（0.00±0.00）％]均低于对照组[（21.27±3.44）％、（78.70±8.82）％、（93.12±6.99）％,t=11.76、12.87、31.09,P均＜0.05].低硒＋T-2组大鼠膝关节软骨Decorin表达阳性率[（19.33±2.82）％]明显低于常规组、低硒组及常规＋T-2组[（62.67±5.33）％、（53.17±2.41）％、（34.50±2.64）％,P均＜0.05].在硒为0 mg/L时,6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达（0.38±0.01、0.26±0.03）明显低于0μg/L T-2毒素（对照）组（1.00±0.00,P均＜0.05）.在硒为0.1 mg/L时,0、6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达（1.53±0.06、1.92±0.04、2.50±0.01）高于相同剂量单纯T-2毒素组（1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00,P均＜0.05）.结论 KBD儿童和低硒�
- 王梦莹陈静宏刘慧中王伟王治伦杨占田杨浩杰薛森海
- 关键词：大骨节病核心蛋白聚糖T-2毒素
