马海霞
- 作品数：4 被引量：21H指数：2
- 供职机构：石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 橡胶草高效再生体系的建立和优化被引量：2
- 2016年
- [目的]优化橡胶草再生和遗传转化体系。[方法]以橡胶草茎和叶为外植体,以1/2MS和MS为基本培养基,研究不同激素浓度配比、外植体类型和激素浓度对橡胶草不定芽诱导和生根的影响。[结果]橡胶草进行组织培养的最佳外植体类型为茎,诱导不定芽形成的最佳激素浓度配比为1.0 mg/L 6-BA和0.10 mg/L NAA。诱导不定芽生根的最佳激素浓度为0.10 mg/L NAA,生根率达100%,移栽成活率达95%以上。[结论]建立了橡胶草高效再生体系,对提高橡胶草组织培养的效率和转化率具有重要意义。
- 赵李婧李永梅曹新文马海霞闫洁祝建波
- 关键词：橡胶草
- 橡胶草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A基因表达的初步分析被引量：1
- 2017年
- 分析橡胶草HMGR基因的表达情况,构建原核表达载体,转化BL21菌株并诱导表达。构建细胞融合表达载体,转化GV3101菌株并侵染洋葱表皮细胞,在共聚焦显微镜下观察基因表达情况。构建植物过表达载体并侵染烟草,利用紫外分光光度法检测三萜含量的变化。通过IPTG诱导和SDS-PAGE检测,获得分子量为62.659 1 ku的蛋白,与预期蛋白相符合,且37℃诱导6 h时表达最明显;通过激光共聚焦显微镜观察,该基因主要在细胞膜上表达;紫外可见分光光度法表明转基因烟草中三萜的含量高于空白烟草。橡胶草HMGR基因分别在大肠杆菌、洋葱鳞片内表皮和烟草中成功表达。
- 赵李婧曹新文李永梅马海霞闫洁祝建波
- 关键词：橡胶草原核表达亚细胞定位
- 橡胶草法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与功能分析被引量：10
- 2016年
- 【目的】法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)是天然橡胶生物合成的甲羟戊酸途径中的关键酶,获得橡胶草FPS基因并转化野生橡胶草,为研究FPS基因在橡胶草橡胶生物合成过程中的调控作用奠定基础。【方法】采用同源克隆的方法获得橡胶草FPS基因全长c DNA序列,并对该基因进行生物信息学分析。对橡胶草和其他18种不同高等植物的FPS氨基酸序列进行多序列比对及进化树分析。提取橡胶草不同组织:根、叶柄、叶、花梗、花和种子RNA,对FPS基因进行组织特异性表达分析,并对不同生长时期的橡胶草FPS表达量进行比较,分析橡胶草生长过程中FPS的调节作用。将该基因在野生型橡胶草中过表达,对得到的转基因和野生型植株FPS相对表达水平进行分析,比较转基因和野生型植株橡胶含量的变化。碱煮法提取转基因和野生型橡胶草根部的橡胶,测定橡胶含量。【结果】获得橡胶草FPS基因全长c DNA序列,命名为TKFPS(Gen Bank登录号KJ558350.1)。序列分析表明该基因包含1个1 029 bp的完整开放阅读框,编码342个氨基酸,编码的蛋白质相对分子量为39.35 k D,理论等电点(p I)为5.41,平均疏水性为-0.242。多序列比对结果表明,橡胶草FPS氨基酸序列含有高等植物FPS基因的5个保守结构域,系统发育分析结果显示新疆野生橡胶草与蒲公英处于同一分支,其亲缘关系最近。TMHMM和Target P亚细胞定位分析得知,TKFPS蛋白无跨膜区域,可能定位于细胞质中发挥功能。组织特异性分析结果表明TKFPS在橡胶草的根、叶柄、叶、花梗、花、种子中均有表达,其中,在叶中表达量最高,根次之,在花中表达量最低。重组子p CAMBIA2300-35S-TKFPS经农杆菌介导法转化野生橡胶草叶盘,得到6株转基因植株。实时荧光定量PCR检测发现,与野生型相比,转基因株系FPS的相对表达量水平明显升高,6株转基因株系TKFPS表达量平均�
- 曹新文王秀珍李永梅赵李婧马海霞闫洁
- 关键词：橡胶草生物信息学REAL-TIMEPCR
- 茉莉酸甲酯对橡胶草生理生化及乳管分化的影响被引量：10
- 2017年
- 为了研究喷施不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)对橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin,TKS)农艺性状和乳管分化相关生理生化指标的影响,分析这些指标的变化与乳管分化的关系,明确促进橡胶草乳管分化的最佳MeJA喷施浓度,本试验选择1个月生的盆栽橡胶草为材料,设5个浓度的MeJA处理水平,即0.25、0.50、1.00、2.00和5.00 mmol/L,以喷施含2.2%无水乙醇的蒸馏水处理的橡胶草为对照,研究喷施不同浓度MeJA对橡胶草农艺形状、叶片叶绿素含量、根系活力、根系内源激素含量、根系PAL活性、根系木质素含量及根部韧皮束圈数的影响。结果显示:与对照相比,喷施不同浓度MeJA可增加橡胶草的主根长度、主根粗度和根冠比,但抑制了叶片的生长。喷施不同浓度MeJA提高了叶片叶绿素含量和根系活力;橡胶草根系内源玉米素核甘(ZR)、生长素(IAA)和MeJA含量均呈增加趋势,且均大于对照处理;随着MeJA处理浓度的增大,脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)含量呈先增加后减小的趋势;6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)含量与对照无显著差异。适宜浓度MeJA可增加橡胶草根部苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,提高根系木质素含量,增加韧皮束圈数。经0.25、0.50和1.00 mmol/L MeJA处理后植株韧皮束圈数与对照呈显著差异,与对照相比分别增加了29.4%、35.3%和47.0%。喷施适宜浓度的MeJA可促进根部的生长,优化地上部与地下部的关系;加速根部IAA、MeJA、GA3、ZR和ABA代谢;提高植株PAL活性,增加木质素含量,提高乳管分化能力。因此,可以通过叶面喷施浓度为1.00 mmol/L的MeJA最大限度的促进橡胶草根部乳管分化。
- 马海霞何丽娜海春燕曹新文雷骥良闫洁祝建波
- 关键词：橡胶草乳管分化
