唐海斌
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ICU鲍氏不动杆菌分子流行特点研究被引量：2
- 2016年
- 目的了解医院ICU鲍氏不动杆菌的分子流行特点,分析其基因同源相关性,为有效控制医院感染的发生提供实验室依据。方法收集医院2013年3-8月ICU分离的68株鲍氏不动杆菌,采用多位点序列分型技术,PCR扩增7个管家基因片段,并进行测序分析,结果与PubMLST数据库进行比对分析,使用eBURST软件对ST数据进行亲缘关系分析。结果 68株鲍氏不动杆菌被分为13个ST基因型,其中新发现2个ST基因型,其他11个ST基因型均属于克隆复合体92,具有同源相关性。结论医院ICU的鲍氏不动杆菌具有基因同源相关性,并呈现出水平传播的趋势。
- 杨玉琪郝晓柯马越云苏明权徐修礼刘家云周珊唐海斌
- 关键词：重症监护病房鲍氏不动杆菌多位点序列分型
- Beclin1进化保守区-SA融合蛋白偶联生物素-A10适配子制备PSMA靶向系统及其对前列腺癌细胞的抑制被引量：3
- 2016年
- 目的:构建链霉亲和素(streptavidin,SA)与Beclin1进化保守区(evolutionary conserved district,ECD)融合蛋白原核表达载体,将融合蛋白与生物素-前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性适配子A10偶联制备PSMA靶向系统,鉴定其促进PSMA^+前列腺癌细胞凋亡及自噬的功能。方法:采用基因合成技术获得融合基因SA-ECD,克隆至PUC57载体鉴定无误后,再将其定向插入原核表达载体PET30a,IPTG诱导融合蛋白表达,镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白,Western blotting鉴定。按照生物素-A10∶SA-ECD摩尔比为4∶1的比例制备PSMA特异性的偶联物即靶向系统,凝胶迁移阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证SA-ECD与生物素的结合,流式细胞术、Western blotting、锥虫蓝染色分别检测靶向系统对前列腺癌细胞凋亡、自噬相关蛋白表达和细胞活力的影响。结果:双酶切及基因测序证实重组质粒PET30a-SA-ECD构建成功,IPTG诱导SA-ECD融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达并经亲和凝胶层析成功纯化。EMSA实验证明SA-ECD能有效结合生物素-A10。靶向系统可促进PSMA^+前列腺癌细胞凋亡和自噬,同时抑制癌细胞活力。结论:成功表达并纯化融合蛋白SA-ECD,构建的生物素-A10∶SA-ECD靶向系统能够杀伤PSMA^+前列腺癌细胞。
- 高萌刘家云马越云李蕊李卓苏明权唐海斌郝晓柯
- 关键词：前列腺癌
- CREB及p-CREB在前列腺癌细胞增殖中的作用被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)及磷酸化CREB(p-CREB)在前列腺癌细胞增殖中的作用。方法:采用组织芯片技术检测人正常前列腺、前列腺增生、不同分级前列腺癌组织中CREB及p-CREB的表达水平;免疫荧光及Western blotting检测人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1、前列腺癌细胞PC3及LNCap中CREB及p-CREB的表达水平;构建重组人源CREB质粒,并转染PC3及LNCap细胞,Western blotting及CCK-8试剂盒检测转染效率及细胞增殖水平的变化。结果:CREB及p-CREB在前列腺癌组织中表达率明显高于正常前列腺(96%vs 50%,88%vs 40%,P<0.05)和前列腺增生组织(96%vs 80%,88%vs 60%,P<0.05);CREB及p-CREB蛋白水平在前列腺癌PC3及LNCap细胞中表达量显著高于正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1[PC3细胞:(5.10±0.62)vs(2.31±0.40)、(4.31±0.54)vs(2.02±0.38);LNCap细胞:(7.5±0.83)vs(2.31±0.40)、(6.15±0.69)vs(2.02±0.38),均P<0.05)];转染重组质粒CREB可上调前列腺癌细胞PC3及LNCap中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达(均P<0.05),且转染后的PC3及LNCap细胞增殖水平明显增加(P<0.05)。结论:CREB及p-CREB在前列腺癌组织、体外培养前列腺癌细胞PC3及LNCap中高表达,并可上调PC3及LNCap中增殖相关基因PCNA的表达,提高细胞增殖水平。
- 唐海斌马越云苏明权李蕊常亮高萌付晓蕊杨玉琪郝晓柯
- 关键词：前列腺癌增殖
- 抗PSMA适配子介导的细胞自噬与促凋亡系统的构建及其抗前列腺癌功能的初步研究
- 高萌刘家云马越云李蕊李卓苏明权唐海斌郝晓柯
