郑琦
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国海洋大学更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程理学医药卫生更多>>
- 新霉素免疫亲和柱的制备及其性能鉴定
- 新霉素(neomycin)是从弗氏链霉菌(streptomycesfradie)中分离出来的广谱抗菌性抗生素,对革兰氏阴性菌和大多数的革兰氏阳性菌均有显著的抑菌作用.在我国已广泛应用于农牧渔业中,并因为在动物体内日益严重...
- 郑琦
- 关键词:食品检测新霉素免疫亲和柱高效液相色谱法
- 一种水产品中残留新霉素的提取与净化方法
- 本发明涉及药残检测技术领域,公开了一种水产品中残留新霉素的提取与净化方法,包括:1)新霉素提取:将水产样品切块后混匀,充分匀浆;然后放置于离心管中,加入样品提取液进行提取,制得提取液;2)新霉素净化:提前将酶联免疫亲和柱...
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- 文献传递
- 新霉素免疫亲和柱的制备及其性能鉴定被引量:1
- 2016年
- 目的制备新霉素多克隆抗体免疫亲和柱并鉴定其性能。方法将经过蛋白A柱纯化的新霉素多克隆抗体,非定向偶联于sepharose 4B琼脂糖凝胶,间接竞争ELISA方法检测抗体特异性、亲和常数及纯化前后效价;通过考马斯亮蓝法测定偶联前后蛋白浓度计算偶联率,高效液相色谱方法(HPLC)筛选亲和柱最优洗脱剂;将免疫亲和萃取技术与HPLC以离线方式联用测定南美白对虾中的新霉素。结果抗体纯化后效价提高5.67倍,亲和常数为2.02×10~8 L/mol;在4℃、6 h条件下可实现充分偶联;HPLC法筛选亲和柱最优洗脱剂为0.2 mol/L柠檬酸盐缓冲液(含0.5 mol/L NaCl,pH 2.3),平均回收率为104.57%±0.03%(n=6);重复使用5次,柱容量为初始柱容量的85%以上;储存于含有0.02%NaN_3的PBS平衡缓冲液中,110 d后800 ng加标回收率在75%以上;分别按照500、5000、7500μg/kg的浓度对南美白对虾进行加标,加标回收率依次为63.29%±5.30%、80.15%±6.27%、83.87%±0.88%;单个样本免疫萃取柱净化前处理时间较固相萃取缩短2~4 h。结论制备所得的亲和柱准确性高、重现性好,在食品安全检测中具有实际应用的潜力。
- 郑琦曹立民郑洪伟林洪隋建新
- 关键词:新霉素免疫亲和柱高效液相色谱法
- 一种水产品中残留新霉素的提取与净化方法
- 本发明涉及药残检测技术领域,公开了一种水产品中残留新霉素的提取与净化方法,包括:1)新霉素提取:将水产样品切块后混匀,充分匀浆;然后放置于离心管中,加入样品提取液进行提取,制得提取液;2)新霉素净化:提前将酶联免疫亲和柱...
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