王生余
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA阻断MAPK信号通路并诱导HL-60细胞凋亡被引量：3
- 2007年
- 本研究旨在探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂-SAHA(suberoylanilide hydroxamicacid)诱导人急性髓性白血病细胞株HL-60凋亡的分子机制。采用MTT法,瑞氏-姬姆萨染色和Hoechst33342/PI荧光染色方法,检测SAHA对HL-60细胞生长的抑制作用及细胞的形态变化;通过流式细胞术、Western-blot方法测定HL-60细胞的周期变化以及多种信号蛋白的表达。结果表明:SAHA可以呈剂量时间依赖性抑制HL-60细胞的生长;经2μmol/L SAHA处理12-48小时,HL-60细胞显示细胞周期被阻滞于G0/G1期;经Hoechst33342荧光染色后细胞核出现明显的凋亡小体结构;Western blot检测证实,SAHA作用HL-60细胞后caspase3被激活,其底物蛋白聚ADP核糖聚合酶[po-ly(ADP-ribose)polymerase,PARP]发生剪切,细胞发生凋亡;对细胞凋亡相关信号转导通路P44/42 MAPK及PI3K/Akt检测结果表明,涉及MAPK信号通路的Raf及ERK激酶磷酸化受到明显抑制,而Akt及其下游mTOR激酶的活性没有明显改变。结论:SAHA对HL-60细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡实现,与细胞增殖相关的P44/42 MAPK信号通路被阻断是细胞凋亡发生的机制之一。
- 王颖王生余侯春梅徐元基杜芝燕于晓妉
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHAMAPK细胞凋亡HL-60细胞
- 新型抗肿瘤药物组蛋白去乙酰化酶抑制剂被引量：12
- 2006年
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)是一类新型的抗肿瘤药物,具有高效、低毒的特点, 其作用于肿瘤细胞后能够抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞周期阻滞,促进细胞分化或凋亡。目前该类药物已经在美国进入Ⅱ期临床研究。现综述HDACi的种类、生物学作用、抗肿瘤作用机制等的研究进展。
- 王生余张旭辉于晓妉
- 关键词：肿瘤治疗方案组蛋白去乙酰化酶抑制剂
- CHIP基因及其突变体的克隆及在人卵巢癌细胞SKOV3中的表达被引量：1
- 2005年
- 目的:热休克蛋白70羧基端作用蛋白(CHIP)是近年来新发现的同时具有辅助伴侣分子和E3泛素连接酶活性的特殊蛋白分子,但其对相应底物蛋白代谢和活性的调控机制尚不十分清楚。本研究拟构建含CHIP全长编码基因的真核表达载体,并在此基础上构建含CHIP不同功能结构域突变体和缺失体基因的表达载体,以实现这些基因在真核细胞中的高效表达,为后续探讨CHIP相关功能的实验奠定基础。方法:从高表达CHIP的人非小细胞肺癌H322细胞中提取总RNA,以此为模板,采用逆转录巢式PCR(RT-nested-PCR)获得CHIP全长编码基因,经测序确定序列正确后将CHIP基因连入带有myc标签的克隆载体pCMV-Tag1中,并以此为模板采用点突变的方法构建CHIP基因N端TPR结构域突变体K30A和C端U-box结构域的突变体H260Q以及U-box结构域缺失体U-box(-)。结果:钓取的CHIP基因经测序鉴定序列与GenBank报道完全一致,瞬时转染证实所构建的CHIP及其突变体表达载体可以在人卵巢癌SKOV3细胞中实现高效表达。结论:成功地构建并获得能够在真核细胞内高表达的CHIP及其功能域突变体的表达载体,为进一步探讨真核细胞内CHIP对相关蛋白分子的调控机制奠定了前期基础。
- 王生余原野侯春梅于晓妉
- 关键词：卵巢肿瘤
- 新型抗肿瘤药物-组蛋白去乙酰化酶抑制剂
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂是一类新型的抗肿瘤药物,具有高效、低毒的特点,其作用于肿瘤细胞后能够抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞周期阻滞、促进细胞分化或凋亡.目前该类药物已经在美国进入Ⅱ期临床研究,本文就组蛋白去乙酰化酶抑制剂的种类...
- 王生余张旭辉于晓妉
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂乙酰化修饰肿瘤治疗抗肿瘤药物
- 文献传递
- HDAC抑制剂Depsipeptide对Hsp90功能的影响及其诱导细胞分化机制探讨
- 研究背景:
热休克蛋白/(heat shock proteins,Hsp/)是细胞内最重要的分子伴侣分子,除去参与细胞内一些重要蛋白分子的构象、稳定性及激酶活性调节之外,热休克蛋白的另一重要生...
- 王生余
- 关键词：热休克蛋白90分化
- 文献传递
- 阻断PI3K信号通路显著抑制成骨前体细胞MC3T3-E1的分化被引量：4
- 2004年
- 目的 :研究PI3K信号通路对成骨前体细胞MC3T3 E1分化的调控作用。方法 :首先通过Western印迹试验检测到PI3K信号通路参与成骨细胞分化的调控。应用PI3K激酶的特异性抑制剂LY2 94 0 0 2药物阻断PI3K信号通路的活化 ,通过碱性磷酸酶 (ALP)和vonKossa染色观察成骨前体细胞MC3T3 E1分化的改变。结果 :Western印迹试验显示 ,成骨细胞分化过程中PI3K信号通路明显活化。阻断该信号通路的活化显著抑制成骨细胞碱性磷酸酶的活性 ,同时降低成骨细胞体外形成骨结节结构的能力。结论 :PI3K信号通路参与了成骨细胞分化的调控 ,而这种调控作用是成骨细胞分化所必需的。
- 陈小三于晓妉王生余张明伟毛宁
- 关键词：PI3KMC3T3-E1信号传导碱性磷酸酶成骨细胞分化
- FK228阻断细胞生存信号通路诱导前列腺癌细胞凋亡被引量：4
- 2006年
- 目的：研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂FK228诱导前列腺癌细胞系DU145凋亡的作用机制。方法：MTT比色法测定FK228抑制DU145细胞增殖及其对细胞的杀伤效应；瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态的变化；流式细胞术分析细胞周期的改变；蛋白印迹实验检测细胞内蛋白表达水平的变化。结果：FK228明显抑制DU145细胞体外增殖,并介导细胞死亡；12．5 ng/ml FK228作用细胞48 h后,细胞存活率降至63．7%；伴有细胞形态改变及细胞周期阻滞于G_0/G_1期；细胞内多种重要的激酶蛋白,包括EGFR、Her2、RM-1、Sic、Cdk4、Akt及凋亡抑制蛋白Survivin均发生了不同程度的降解,细胞内两条重要的生存信号通路Raf-MEK-ERK及PI3K/Akt被阻断,细胞发生凋亡。结论：FK228可以通过清除细胞内重要信号蛋白、阻断细胞生存信号通路来诱导DU145细胞发生凋亡。
- 赵名王生余候春梅杜芝燕徐元基于晓妉
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶FK228热休克蛋白90细胞凋亡前列腺癌
- 新型E3连接酶CHIP分子功能的研究
- CHIP是近年来新发现的胞内具有E3泛素连接酶活性的辅助伴侣分子,参与胞内由分子伴侣蛋白和泛素.蛋白酶体途径组成的蛋白质质控系统.新近的研究证实CHIP参与介导一些热休克蛋白90靶蛋白的降解,提示调控CHIP的表达可能在...
- 王生余作易欣于晓妉
- 关键词：热休克蛋白70
- 文献传递
